柯(ke)薩(sa)奇(qi)病(bing)毒(du)B1型(xing)核(he)酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒

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 產品(pin)名稱(cheng)：柯(ke)薩(sa)奇(qi)病(bing)毒(du)B1型(xing)核(he)酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒
規格(ge)：50T
編(bian)號(hao)：BH-P96396
分類(lei)：熒(ying)光(guang)PCR法
儲存(cun)條件(jian)：-20℃避光(guang)保存，避免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。
運輸(shu)：低溫(wen)、避光(guang)，快遞(di)免(mian)費送貨(huo)上門(men)。
產品(pin)特點：
◇高特異性：與(yu)其(qi)他(ta)病毒(du)無交(jiao)叉(cha)反(fan)應，無非特異性擴增；
◇高靈(ling)敏度：檢(jian)測靈敏度可達(da)10~100拷貝；
◇操(cao)作簡(jian)便(bian)：該(gai)系(xi)列(lie)所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)均采(cai)用相同的(de)體(ti)系(xi)和(he)條件(jian)，可(ke)同時進(jin)行多(duo)個(ge)檢(jian)測；
◇高通(tong)量：多(duo)種雙(shuang)重PCR檢(jian)測以及(ji)三重PCR檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒。

準備(bei)物(wu)品(pin)：
清理(li)液(ye)（A）                                   毫升(sheng)
染色(se)液(ye)（t B）                                   微(wei)升
稀釋液(ye)（C）                                   毫升(sheng)
溶解(jie)液(ye)（tD）                                   毫升(sheng)
產品(pin)說明(ming)書(shu)                                   1份
使用及效果(guo)：
PCR反應(ying)特點
(1) 特異性強(qiang)
PCR反應(ying)的(de)特異性決(jue)定(ding)因(yin)素(su)為：
①引(yin)物(wu)與模(mo)板(ban)DNA特異正(zheng)確(que)的(de)結(jie)合(he)；
②堿基配(pei)對原(yuan)則(ze)；
③Taq DNA聚合(he)酶(mei)合成反(fan)應(ying)的(de)忠(zhong)實性；
④靶基因(yin)的特異性與(yu)保守性。
其中引(yin)物(wu)與模(mo)板(ban)的正(zheng)確(que)結(jie)合(he)是(shi)關(guan)鍵。引(yin)物(wu)與模(mo)板(ban)的結(jie)合及引(yin)物(wu)鏈的(de)延伸是(shi)遵(zun)循堿基配(pei)對原(yuan)則(ze)的(de)。聚(ju)合酶(mei)合成反(fan)應(ying)的(de)忠(zhong)實性及Taq DNA聚合(he)酶(mei)耐高(gao)溫(wen)性(xing)，使反應(ying)中模(mo)板(ban)與引(yin)物(wu)的結(jie)合(復(fu)性)可以在(zai)較高的溫(wen)度下進(jin)行，結合(he)的(de)特異性大(da)大(da)增加(jia)，被擴增的(de)靶基因(yin)片(pian)段(duan)也就能(neng)保持很高(gao)的正(zheng)確(que)度。再通(tong)過選(xuan)擇特異性和(he)保守性高(gao)的靶基因(yin)區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wu)的生成量(liang)是(shi)以指(zhi)數方式增加(jia)的，能(neng)將皮克(ke)(pg=10-12g)量級(ji)的(de)起始(shi)待(dai)測(ce)模(mo)板(ban)擴增到微(wei)克(ke)(ug=10-6g)水平。能(neng)從100萬(wan)個(ge)細胞中檢(jian)出壹個(ge)靶細胞；在病毒(du)的(de)檢(jian)測中，PCR的靈(ling)敏度可達(da)3個(ge)RFU(空斑(ban)形成單(dan)位)；在細菌(jun)學中zui小檢(jian)出率(lv)為3個(ge)細菌(jun)。
(3) 簡便(bian)、快速(su)
PCR反應(ying)用耐高(gao)溫(wen)的(de)Taq DNA聚合(he)酶(mei)，壹次(ci)性地(di)將反應(ying)液(ye)加(jia)好(hao)後(hou)，即在(zai)DNA擴增液(ye)和(he)水(shui)浴(yu)鍋上(shang)進行變性(xing)-退火-延伸反(fan)應，壹般(ban)在(zai)2～4 小時完成擴增反(fan)應(ying)。擴增產物(wu)壹般(ban)用電(dian)泳分析，不壹定(ding)要(yao)用同位素(su)，無放射性汙(wu)染、易(yi)推廣(guang)。
(4) 對標(biao)本的(de)純度要求(qiu)低
不需要(yao)分離(li)病(bing)毒(du)或細菌(jun)及(ji)培養(yang)細胞，DNA 粗制(zhi)品(pin)及總(zong)RNA均可作為(wei)擴增模(mo)板(ban)。可直(zhi)接(jie)用臨床(chuang)標(biao)本如血液(ye)、體(ti)腔液(ye)、洗(xi)嗽(sou)液(ye)、毛發(fa)、細胞、活(huo)PCR技(ji)術概論。
大耳(er)山(shan)羊(yang)腎(shen)細胞;LDG-2麗絲(si)胺(an)羅丹明(ming)B/酸性(xing)紅(hong)52/磺酰(xian)羅(luo)丹明(ming)B Sulforhodamine BBS

A549/DDP細胞，耐DDP肺癌細胞 中國(guo)倉(cang)鼠肺(fei)細胞,CHL細胞 CM-M002小鼠(shu)肺(fei)血(xue)管(guan)平滑肌細胞*培養(yang)基100mL麗絲(si)胺(an)羅丹明(ming)B/酸性(xing)紅(hong)52/磺酰(xian)羅(luo)丹明(ming)B Sulforhodamine BBS

S-180(小鼠(shu)肉瘤細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2氯化羅丹明(ming)110；羅丹明(ming)110Rhodamine 110 chloride>99%

Gibco 10639011 STEM PRO-34- COMBO 500ml羅丹明(ming)123Rhodamine 123用於(yu)熒(ying)光(guang)標(biao)記

腎(shen)臟上(shang)皮細胞HREpiC曲(qu)美布汀堿Trimebutine base>98%,BR
FLT4 Others Human  VEGFR3 / FLT4 細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) L-核(he)糖(tang)>98%,BRL-(+)-Ribose

CL-0308TE-13(食(shi)管癌細胞)5×106cells/瓶(ping)×2L-核(he)糖(tang)()>98%,L-(+)-Ribose

VNN1 Others Mouse 小鼠(shu) VNN1 / Vanin-1 細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 2-脫(tuo)氧(yang)-L-核(he)糖(tang)>98%,BR2-Deoxy-L-ribose

小鼠(shu)胰(yi)島細胞*培養(yang)基 100mLD-葡(pu)萄糖(tang)壹水(shui)>99%,BRD-Glucose, monohydrate

PC9肺癌細胞 PC9 human lung cancer cells DMEM+10% FBS十二(er)烷(wan)基硫酸鈉(分子(zi)生物(wu)學級)>99%,分子(zi)生物(wu)學級SDS
柯(ke)薩(sa)奇(qi)病(bing)毒(du)B1型(xing)核(he)酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒細胞;Hela 229 [HeLa229]4'-羧(suo)基(ji)苯並(bing)-15-冠(guan)5-(>98.0%(GC)(T))>98.0%(GC)(T)4'-Carboxybenzo-15-crown 5-Ether

IFNB1 Others Mouse 小鼠(shu) IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 4'-羧(suo)基(ji)苯並(bing)-18-冠(guan)6-(>97.0%(GC)(T))>97.0%(GC)(T)4'-Carboxybenzo-18-crown 6-Ether

CRT 神(shen)經(jing)膠質(zhi)瘤細胞24-冠(guan)8-(>93.0%(GC))>93.0%(GC)24-Crown 8-Ether

MHCC-97H肝癌細胞(高轉移(yi)) MHCC-97H human hepatoma cells (high ansfer) DMEM+10%FBS二苯(ben)並(bing)-18-冠(guan)-6-(>99.0%(GC))>99.0%(GC)Dibenzo-18-crown 6-Ether

TNFSF8 Protein Cynomolgus 重組(zu)食(shi)蟹(xie)猴(hou) CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白(bai) (His 標(biao)簽)13-乙基(ji)-18,19-二去(qu)甲基-17α-pregn-4-en-20-yn-17-ol(左(zuo)雜(za)質D)美國進(jin)口13-Ethyl-18,19-dinor-17α-pregn-4-en-20-yn-17-ol(Levonorgestrel Impurity D)
檢(jian)測步驟(zhou)：
壹、 試(shi)劑(ji)的(de)準備(bei)
從試(shi)劑(ji)盒中取(qu)出熒(ying)光(guang)PCR反應(ying)液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混(hun)合物(wu)(Enzymes MIX)，冰(bing)上融(rong)化並(bing)振蕩混(hun)勻(yun)後(hou)，10000rpm離心(xin)10s。
設所(suo)需(xu)要的(de)PCR反應(ying)管(guan)管數(shu)為(wei)N(N=樣本數(shu)+1管陰(yin)性對(dui)照(zhao)+1管陽(yang)性對(dui)照(zhao))，每個(ge)測試(shi)反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)配(pei)制(zhi)如下表：
試(shi)劑(ji) 每個(ge)反應(ying)加(jia)入的量 N個(ge)反應(ying)加(jia)入的量
熒(ying)光(guang)PCR反應(ying)液(ye) 14µL N×14µL
酶(mei)混(hun)合物(wu) 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算(suan)好(hao)各(ge)試(shi)劑(ji)的(de)使用量，加(jia)入壹適(shi)當(dang)體(ti)積潔凈(jing)離(li)心(xin)管(guan)中，充(chong)分混(hun)勻(yun)，10000rpm離心(xin)10s，向設(she)定(ding)的(de)N個(ge)PCR反應(ying)管(guan)中分(fen)別加(jia)入15μL熒(ying)光(guang)PCR反應(ying)液(ye)，向(xiang)每管(guan)中加(jia)入處(chu)理(li)後(hou)樣品(pin)或陰(yin)性對(dui)照(zhao)(NTC)和陽(yang)性對(dui)照(zhao)(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時離(li)心(xin)10秒(miao)。
7.2 qPCR反應(ying)條(tiao)件(jian)
將各(ge)反(fan)應(ying)管(guan)放入定(ding)量(liang)PCR儀器(qi)的(de)反應(ying)槽(cao)內(nei)。
循環條件(jian):
1循環 50℃ for 2 min
預變(bian)性(xing) 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收(shou)集熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)。報(bao)告(gao)基(ji)團：設置為FAM。淬(cui)滅基團(tuan)：NONE，請(qing)勿選(xuan)擇ROX參比熒(ying)光(guang)。