細(xi)胞應用(yong)結(jie)果
細(xi)胞膜(mo)的脂(zhi)質(zhi)雙分(fen)子層(ceng)被(bei)劈分(fen)開(kai)以後(hou)，其外層的內(nei)表(biao)面(mian)稱(cheng)胞質(zhi)外面或(huo)E面(mian)(extracellular face, E face);其(qi)內(nei)層的(de)外表(biao)面(mian)稱(cheng)胞質(zhi)面或(huo)P面(mian)(plasmic face, P face)。P面(mian)常(chang)見(jian)許(xu)多(duo)膜(mo)內(nei)粒(li)子，E面(mian)則較少。壹般認為膜(mo)內(nei)粒(li)子是(shi)細(xi)胞膜(mo)結(jie)構中(zhong)的向(xiang)前(qian)蛋白顆粒(li)的圖(tu)像。膜(mo)內(nei)粒(li)子的(de)數量(liang)與分(fen)布隨(sui)膜(mo)的功能(neng)狀態(tai)而(er)變(bian)化(hua)，因此冷凍(dong)蝕刻(ke)復(fu)型技(ji)術(shu)適(shi)用(yong)於(yu)生(sheng)物(wu)膜(mo)內(nei)部結(jie)構與功能(neng)的研究。

細(xi)胞冷凍(dong)蝕刻(ke)復(fu)型主要步(bu)驟

冷凍(dong)　將(jiang)樣品組(zu)織浸入冷凍(dong)保護(hu)劑中(zhong)，然後(hou)再將(jiang)樣品放入(ru)液氮(dan)(-196攝(she)氏度)內(nei)快速冷凍(dong)。

斷(duan)裂(lie)　在(zai)真(zhen)空條件(jian)下(xia)使(shi)樣品斷(duan)裂(lie)，斷(duan)裂(lie)面(mian)常(chang)為(wei)組(zu)織、細(xi)胞的薄(bo)弱部(bu)位，如(ru)細(xi)胞膜(mo)脂(zhi)質(zhi)雙分(fen)子層(ceng)的疏水(shui)極之(zhi)間。

蝕刻(ke)　在(zai)真(zhen)空內(nei)使(shi)溫度(du)回升到-100攝氏度，使(shi)斷(duan)裂(lie)面(mian)含遊(you)離(li)水較多之(zhi)處(chu)的(de)冰(bing)晶(jing)生(sheng)化，形成凹凸(tu)不平的(de)"浮(fu)雕"效(xiao)果。

復(fu)型　在(zai)斷(duan)裂(lie)面(mian)上(shang)先後(hou)噴鍍(du)鉑和碳，形成金屬(shu)復(fu)型膜(mo)稱(cheng)復(fu)型(replica)，用(yong)次氯酸鈉(na)等腐(fu)蝕夜將(jiang)組(zu)織溶(rong)解(jie)，取(qu)復(fu)型膜(mo)在透射(she)電(dian)鏡下(xia)觀(guan)察。