同型(xing)半(ban)ELISA檢(jian)測(ce)試劑盒樣本(ben)處(chu)理(li)及(ji)要求(qiu):
1. 血(xue)清(qing):室溫血(xue)液自然凝(ning)固(gu)10-20分鐘,離心(xin)20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
仔(zai)細(xi)收集(ji)上清(qing),保存(cun)過(guo)程中如出(chu)現沈(chen)澱,應(ying)再次離(li)心(xin)。
2. 血漿:應(ying)根(gen)據(ju)標(biao)本(ben)的(de)要求(qiu)選擇(ze)EDTA或檸(ning)檬酸(suan)鈉作為抗凝(ning)劑,混(hun)合10-20分鐘後,離(li)心(xin)20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔(zai)細(xi)收集(ji)上清(qing),保存(cun)過(guo)程中如有沈(chen)澱形成(cheng),應(ying)該(gai)再次離(li)心(xin)。
3. 尿液:用(yong)無菌(jun)管(guan)收集(ji),離心(xin)20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔(zai)細(xi)收集(ji)上清(qing),保存(cun)過(guo)程中如有沈(chen)澱形成(cheng),應(ying)再次離(li)心(xin)。胸腹水、腦脊液參(can)照實(shi)行(xing)。
4. 細(xi)胞培(pei)養(yang)上清(qing):檢(jian)測(ce)分泌(mi)性(xing)同型(xing)半(ban)ELISA檢(jian)測(ce)試劑盒的(de)成(cheng)份時(shi),用(yong)無菌(jun)管(guan)收集(ji)。離心(xin)20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔(zai)細(xi)收集(ji)上清(qing)。檢(jian)測(ce)細(xi)胞內(nei)的(de)成(cheng)份時(shi),用(yong)PBS(PH7.2-7.4)稀(xi)釋細(xi)胞懸液,細(xi)胞濃(nong)度達到(dao)100萬(wan)/ml左右。通(tong)過反(fan)復凍(dong)融,以使(shi)細(xi)胞破壞並放(fang)出(chu)細(xi)胞內(nei)成(cheng)份。離(li)心(xin)20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔(zai)細(xi)收集(ji)上清(qing)。保存(cun)過(guo)程中如有沈(chen)澱形成(cheng),應(ying)再次離(li)心(xin)。
5. 組(zu)織標本(ben):切(qie)割標(biao)本(ben)後,稱(cheng)取重量(liang)。加(jia)入(ru)壹(yi)定(ding)量(liang)的(de)PBS,PH7.4。用(yong)液氮(dan)迅(xun)速冷凍(dong)保存(cun)備(bei)用(yong)。標(biao)本(ben)融化後仍(reng)然保持(chi)2-8℃的(de)溫度。加(jia)入(ru)壹(yi)定(ding)量(liang)的(de)PBS(PH7.4),用(yong)手(shou)工或勻(yun)漿器將標本(ben)勻(yun)漿充分。離(li)心(xin)20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔(zai)細(xi)收集(ji)上清(qing)。分裝(zhuang)後壹(yi)份(fen)待檢(jian)測(ce),其余冷(leng)凍(dong)備(bei)用(yong)。
6. 標(biao)本(ben)采集(ji)後盡(jin)早(zao)進(jin)行提(ti)取,提取同型(xing)半(ban)ELISA檢(jian)測(ce)試劑盒按(an)相關(guan)文(wen)獻(xian)進行,提取後應(ying)盡(jin)快進行(xing)實(shi)驗。若不(bu)能(neng)馬上進(jin)行(xing)試驗,可(ke)將標本(ben)放(fang)於(yu)-20℃保存(cun),但應(ying)避(bi)免反復凍(dong)融.
7. 不能(neng)檢(jian)測(ce)含(han)NaN3的(de)樣品,因NaN3抑制辣根(gen)過氧化(hua)物酶(mei)的(de)(HRP)活(huo)性(xing)。