酶(mei)ELISA試劑(ji)盒步驟(zhou):
壹(yi)、靜置(zhi)貼壁細(xi)胞(bao)(包括(kuo)半貼壁細(xi)胞(bao)的培養)培養要求
1、細胞(bao)要通過(guo)充分漂洗(xi),以(yi)盡(jin)量(liang)除去消化液(ye)的(de)毒(du)性;
2、細(xi)胞(bao)接(jie)種時濃度要稍大(da)壹(yi)些,至少(shao)為5×108細(xi)胞(bao)/L;
3、培養基可用Eagle(MEM)或(huo)DNEM培養;
4、小(xiao)牛(niu)血清濃度為10%-80%;
5、應(ying)在37℃5% CO2的(de)培養箱中(zhong)培養;
6、在起(qi)始(shi)的(de)2天中(zhong)盡(jin)量(liang)減少(shao)振蕩,以(yi)防(fang)止(zhi)剛貼壁的(de)細胞(bao)發(fa)生(sheng)脫(tuo)落(luo),漂浮(fu);
7、待細胞(bao)基本貼壁伸(shen)展並逐(zhu)漸形(xing)成(cheng)網狀(zhuang),應(ying)將原(yuan)代(dai)細(xi)胞(bao)換液(ye);
8、用(yong)骨(gu)髓或(huo)外周血中(zhong)的(de)懸浮(fu)細胞(bao)經靜置(zhi)培養1周時,應(ying)將細胞(bao)懸液(ye)經低(di)速離(li)心(xin)後換液(ye)。