小反(fan)芻(chu)獸疫病毒(du)（PPRV）核酸檢測試劑(ji)盒(he)

產(chan)品(pin)特(te)點(dian)：
◇高(gao)特(te)異(yi)性(xing)：與(yu)其他病毒(du)無(wu)交叉反應(ying)，無(wu)非(fei)特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增；
◇高(gao)靈(ling)敏(min)度：檢測靈(ling)敏(min)度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該(gai)系(xi)列(lie)所有(you)試劑均(jun)采(cai)用相同的(de)體系(xi)和條件，可同時進行(xing)多(duo)個檢測(ce)；
◇高(gao)通(tong)量：多(duo)種雙重(zhong)PCR檢測以(yi)及(ji)三重(zhong)PCR檢測試(shi)劑盒(he)。

訂(ding)購(gou)信(xin)息：
 產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng)：小反(fan)芻(chu)獸疫病毒(du)(PPRV)核酸檢測試劑(ji)盒(he)
規格(ge)：50T
編(bian)號(hao)：BH-P96807
分(fen)類：熒光(guang)PCR法
儲(chu)存(cun)條件：-20℃避光(guang)保(bao)存(cun)，避免(mian)反復凍融。
運輸：低(di)溫、避(bi)光(guang)，快(kuai)遞免(mian)費送貨(huo)上門。

準備物品(pin)：
清理(li)液(ye)（A）                                   毫升
染色液(ye)（t B）                                   微升
稀(xi)釋(shi)液（C）                                   毫升
溶解液(ye)（tD）                                   毫升
產(chan)品(pin)說明(ming)書(shu)                                   1份(fen)
使用及效果：
PCR反應特(te)點
(1) 特異性(xing)強
PCR反應的(de)特異(yi)性決(jue)定(ding)因素(su)為：
①引物與模(mo)板(ban)DNA特異正確(que)的(de)結合(he)；
②堿(jian)基(ji)配對原則(ze)；
③Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)合(he)成(cheng)反(fan)應(ying)的(de)忠實(shi)性(xing)；
④靶基因的(de)特異(yi)性與(yu)保(bao)守(shou)性(xing)。
其中(zhong)引物與模(mo)板(ban)的(de)正確(que)結合(he)是關(guan)鍵(jian)。引物與模(mo)板(ban)的(de)結合(he)及(ji)引物鏈的(de)延(yan)伸是遵循(xun)堿(jian)基(ji)配對原則(ze)的(de)。聚(ju)合(he)酶(mei)合(he)成(cheng)反(fan)應(ying)的(de)忠實(shi)性(xing)及(ji)Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)耐(nai)高(gao)溫(wen)性(xing)，使反應中(zhong)模(mo)板(ban)與(yu)引物的(de)結合(he)(復性(xing))可以(yi)在(zai)較高(gao)的(de)溫度下(xia)進行(xing)，結(jie)合(he)的(de)特異(yi)性大(da)大(da)增加，被(bei)擴(kuo)增的(de)靶基(ji)因片段也就能保(bao)持很(hen)高(gao)的(de)正確(que)度。再通過選(xuan)擇(ze)特(te)異性和保(bao)守(shou)性(xing)高(gao)的(de)靶基(ji)因區(qu)，其(qi)特異性程(cheng)度就更(geng)高(gao)。
(2) 靈(ling)敏(min)度高(gao)
PCR產(chan)物的(de)生成(cheng)量是以(yi)指(zhi)數方(fang)式增(zeng)加(jia)的(de)，能將(jiang)皮克(pg=10-12g)量級的(de)起始待(dai)測模(mo)板(ban)擴(kuo)增到微(wei)克(ug=10-6g)水平。能從(cong)100萬個細(xi)胞(bao)中(zhong)檢出(chu)壹個靶(ba)細(xi)胞(bao)；在(zai)病毒(du)的(de)檢測(ce)中(zhong)，PCR的(de)靈(ling)敏(min)度可達3個RFU(空斑(ban)形成單(dan)位(wei))；在(zai)細(xi)菌(jun)學(xue)中(zhong)zui小檢(jian)出(chu)率為3個細(xi)菌(jun)。
(3) 簡便、快(kuai)速
PCR反應用耐高(gao)溫(wen)的(de)Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)，壹次性(xing)地將(jiang)反(fan)應液加好(hao)後，即在(zai)DNA擴(kuo)增液(ye)和(he)水浴鍋上(shang)進行(xing)變(bian)性-退火-延(yan)伸反應(ying)，壹般(ban)在(zai)2～4 小時完成(cheng)擴(kuo)增反(fan)應(ying)。擴(kuo)增產(chan)物壹般(ban)用電泳(yong)分(fen)析，不(bu)壹定要用同位(wei)素(su)，無(wu)放射性汙染、易推廣(guang)。
(4) 對標本的(de)純度要求(qiu)低(di)
不(bu)需(xu)要分(fen)離病毒(du)或細(xi)菌(jun)及(ji)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，DNA 粗制品(pin)及(ji)總(zong)RNA均(jun)可作為擴(kuo)增模(mo)板(ban)。可(ke)直接(jie)用臨床標(biao)本如(ru)血液、體(ti)腔(qiang)液、洗嗽(sou)液(ye)、毛發、細(xi)胞(bao)、活(huo)PCR技(ji)術概論(lun)。

檢測步(bu)驟(zhou)：
壹、 試劑的(de)準備
從(cong)試劑盒(he)中(zhong)取(qu)出(chu)熒光(guang)PCR反應液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶混合(he)物(Enzymes MIX)，冰上融化(hua)並振(zhen)蕩(dang)混勻後，10000rpm離心(xin)10s。
設所需(xu)要的(de)PCR反應管(guan)管(guan)數(shu)為N(N=樣本數(shu)+1管(guan)陰性(xing)對照+1管(guan)陽(yang)性(xing)對(dui)照)，每個測(ce)試反(fan)應(ying)體系(xi)配(pei)制如下(xia)表：
試劑 每個反(fan)應加(jia)入的(de)量 N個反應(ying)加入的(de)量
熒光(guang)PCR反應液(ye) 14µL N×14µL
酶混合(he)物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好(hao)各試劑(ji)的(de)使用量，加入壹適(shi)當體(ti)積潔(jie)凈(jing)離心(xin)管(guan)中(zhong)，充分(fen)混勻，10000rpm離心(xin)10s，向設定(ding)的(de)N個PCR反應管(guan)中(zhong)分(fen)別加入15μL熒光(guang)PCR反應液(ye)，向每(mei)管(guan)中(zhong)加入處理(li)後樣品(pin)或陰性(xing)對照(NTC)和陽性(xing)對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心(xin)10秒。
7.2 qPCR反應條件
將(jiang)各反應(ying)管(guan)放入定(ding)量PCR儀器的(de)反應(ying)槽內(nei)。
循環(huan)條件:
1循環(huan) 50℃ for 2 min
預變(bian)性 1循環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增 40循環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延(yan)伸時收集熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)。報告基團：設置為FAM。淬(cui)滅基團：NONE，請勿(wu)選(xuan)擇(ze)ROX參(can)比熒(ying)光(guang)。
MMP8 Others Human  MMP8 / CLG1 細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) 乙酰胺(Standard for GC,≥99.5%(GC))AcetamideStandard for GC,≥99.5%(GC)

中(zhong)國倉(cang)鼠(shu)肺(fei)細(xi)胞(bao);V79茴香醛(Standard for GC,≥99%(GC)) p-AnisaldehydeStandard for GC,≥99%(GC)

EPHA1 Others Mouse 小鼠(shu) EphA1 / EPH receptor A1 細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) 癸二(er)酸二(er)辛酯（DOS）(Standard for GC, ≥98.5% (GC))Bis(2-ethylhexyl) sebacateStandard for GC, ≥98.5% (GC)

A549 肺(fei)腺癌(ai)1，4-丁(ding)二(er)醇(chun)(BDO)(standard for GC,≥99%(GC))1,4-Butanediolstandard for GC,≥99%(GC)

Li-7肝癌(ai)細(xi)胞(bao) Li-7 human hepatocarcinoma cells 1640+10%FBS1,2,4-丁(ding)三(san)醇(chun)（BT）(standard for GC,≥99.5%(GC))(±)-1,2,4-Butanetriolstandard for GC,≥99.5%(GC)
小鼠(shu)腮(sai)腺細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基 100mLL-5乙酯0.985H-Glu(OEt)-OH

HUVEC[HUV-EC-C]臍(qi)靜脈(mai)內皮細(xi)胞(bao) Human umbilical vein endothelial cells HUVEC[HUV-EC-C] DMEM+10%FBSN-乙酰-DL-0.98N-Acetyl-DL-leucine

IL18BP Protein Mouse 重(zhong)組小鼠(shu) IL18BP 蛋(dan)白(bai) (His 標簽)N-碳(tan)芐(bian)氧(yang)基賴(lai)氨(an)酸,N6-Cbz-L-賴氨(an)酸98%，BRN6-Cbz-L-Lysine

PA-1(卵巢(chao)腺癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 H9c2(2-1)(大鼠心(xin)肌(ji)細(xi)胞(bao))DL-賴氨(an)酸>98%,BRDL-Lysine

CL-0269CW-2(結腸癌(ai)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2DL-鹽酸鹽>98%,BRDL-Arginine
小反(fan)芻(chu)獸疫病毒(du)(PPRV)核酸檢測試劑(ji)盒(he)NCI-H1395肺(fei)腺癌(ai)細(xi)胞(bao) Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1395 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS[Tyr9]- β-促激(ji)素(su) (豬(zhu))>95%,BR[Tyr9]- β-MSH (porcine)

FAM3D Protein Human 重(zhong)組 FAM3D 蛋(dan)白(bai) (His 標簽)α-心鈉(na)素(su)(1-28), human>95%,BRα-ANF(1-28), human

293來源(yuan)病毒(du)包(bao)裝細(xi)胞(bao);ΦA 上皮細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基 100mLα-促激(ji)素(su)>95%,BRα-MSH

髓核細(xi)胞(bao)總(zong)RNAHNPC NAβ-澱粉(fen)樣蛋(dan)白(bai)(1-42),>95%,BRβ-Amyloid Peptide (1-42), human

REG1A Others Cynomolgus 食蟹(xie)猴 REG1A / PSPS 細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) [Nle8’18,Tyr34]-甲狀(zhuang)旁(pang)腺(xian)激(ji)素(su)(7-34)酰胺 (牛)>95%,BR[Nle8’18,Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)