馬鏈(lian)球(qiu)菌獸(shou)疫(yi)亞種（ SEZ）核(he)酸(suan)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

產品(pin)特(te)點：
◇高特(te)異性(xing)：與(yu)其他病毒無(wu)交叉反應(ying)，無非特(te)異性(xing)擴(kuo)增(zeng)；
◇高靈(ling)敏(min)度：檢(jian)測(ce)靈(ling)敏(min)度可(ke)達(da)10~100拷(kao)貝(bei)；
◇操(cao)作簡便(bian)：該系列(lie)所有(you)試(shi)劑(ji)均采用相(xiang)同的體(ti)系(xi)和條件，可(ke)同(tong)時(shi)進(jin)行(xing)多個檢(jian)測；
◇高通(tong)量：多種雙(shuang)重(zhong)PCR檢測(ce)以(yi)及三(san)重PCR檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)。

訂(ding)購信息(xi)：
 產品(pin)名稱：馬鏈(lian)球(qiu)菌獸(shou)疫(yi)亞種（ SEZ）核(he)酸(suan)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)
規(gui)格：50T
編(bian)號(hao)：BH-P96806
分類(lei)：熒(ying)光(guang)PCR法
儲(chu)存(cun)條件：-20℃避光(guang)保存(cun)，避免(mian)反復凍融(rong)。
運(yun)輸：低溫(wen)、避光(guang)，快遞(di)免(mian)費送(song)貨(huo)上門。

準(zhun)備(bei)物(wu)品(pin)：
清(qing)理液(ye)（A）                                   毫升(sheng)
染(ran)色(se)液(ye)（t B）                                   微(wei)升
稀釋液(ye)（C）                                   毫升(sheng)
溶(rong)解(jie)液(ye)（tD）                                   毫升(sheng)
產品(pin)說(shuo)明書(shu)                                   1份
使(shi)用及效果：
PCR反(fan)應(ying)特(te)點
(1) 特(te)異性(xing)強(qiang)
PCR反應(ying)的特(te)異性(xing)決(jue)定因素(su)為：
①引物(wu)與(yu)模板(ban)DNA特(te)異正(zheng)確(que)的(de)結(jie)合；
②堿基(ji)配對原(yuan)則(ze)；
③Taq DNA聚合酶合成(cheng)反應(ying)的忠實(shi)性(xing)；
④靶(ba)基(ji)因的特(te)異性(xing)與(yu)保守性(xing)。
其中引物(wu)與(yu)模板(ban)的(de)正(zheng)確(que)結(jie)合是關鍵(jian)。引物(wu)與(yu)模板(ban)的(de)結(jie)合及引物(wu)鏈(lian)的(de)延(yan)伸是遵循堿(jian)基(ji)配對原(yuan)則(ze)的(de)。聚(ju)合酶合成(cheng)反應(ying)的忠實(shi)性(xing)及Taq DNA聚合酶耐(nai)高溫(wen)性(xing)，使(shi)反應(ying)中模板(ban)與(yu)引物(wu)的(de)結(jie)合(復性(xing))可以(yi)在(zai)較高的(de)溫(wen)度下(xia)進(jin)行(xing)，結合的特(te)異性(xing)大(da)大(da)增(zeng)加，被擴(kuo)增(zeng)的(de)靶(ba)基(ji)因片段也(ye)就(jiu)能(neng)保持很高的(de)正(zheng)確(que)度。再(zai)通過選(xuan)擇特(te)異性(xing)和保守性(xing)高的(de)靶基(ji)因區(qu)，其特(te)異性(xing)程(cheng)度就(jiu)更高。
(2) 靈(ling)敏(min)度高
PCR產物(wu)的(de)生(sheng)成(cheng)量是以指數方(fang)式(shi)增(zeng)加的，能(neng)將皮克(ke)(pg=10-12g)量級(ji)的(de)起始(shi)待測(ce)模板(ban)擴(kuo)增(zeng)到(dao)微(wei)克(ke)(ug=10-6g)水(shui)平(ping)。能(neng)從(cong)100萬個細(xi)胞中檢出(chu)壹(yi)個靶(ba)細胞；在(zai)病毒(du)的(de)檢測中，PCR的(de)靈(ling)敏(min)度可(ke)達(da)3個RFU(空(kong)斑(ban)形成(cheng)單位)；在細菌學中zui小檢出(chu)率(lv)為3個細(xi)菌。
(3) 簡便(bian)、快速(su)
PCR反(fan)應(ying)用耐(nai)高溫(wen)的Taq DNA聚(ju)合酶，壹(yi)次(ci)性(xing)地(di)將反應(ying)液(ye)加好後，即在DNA擴(kuo)增(zeng)液(ye)和水(shui)浴(yu)鍋(guo)上進(jin)行(xing)變性(xing)-退(tui)火-延伸反(fan)應(ying)，壹(yi)般在2～4 小時完(wan)成(cheng)擴(kuo)增(zeng)反(fan)應(ying)。擴(kuo)增(zeng)產物(wu)壹(yi)般(ban)用(yong)電(dian)泳(yong)分(fen)析(xi)，不(bu)壹定要(yao)用(yong)同位素(su)，無放射(she)性(xing)汙染(ran)、易推(tui)廣。
(4) 對標本(ben)的純度要(yao)求低
不(bu)需(xu)要(yao)分(fen)離(li)病(bing)毒或(huo)細菌及培養細胞，DNA 粗制品(pin)及總(zong)RNA均可(ke)作(zuo)為擴(kuo)增(zeng)模板(ban)。可(ke)直(zhi)接用(yong)臨(lin)床(chuang)標本(ben)如血(xue)液(ye)、體腔液(ye)、洗(xi)嗽液(ye)、毛發、細胞、活(huo)PCR技(ji)術概(gai)論(lun)。

檢測步驟：
壹(yi)、 試(shi)劑(ji)的(de)準(zhun)備(bei)
從(cong)試(shi)劑(ji)盒(he)中取出(chu)熒(ying)光(guang)PCR反應液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶混(hun)合物(wu)(Enzymes MIX)，冰(bing)上融(rong)化並(bing)振蕩(dang)混(hun)勻後，10000rpm離(li)心(xin)10s。
設所需(xu)要(yao)的(de)PCR反(fan)應管(guan)管(guan)數(shu)為N(N=樣(yang)本(ben)數+1管(guan)陰(yin)性(xing)對照(zhao)+1管(guan)陽(yang)性(xing)對照(zhao))，每個測(ce)試(shi)反應體(ti)系配制如下(xia)表(biao)：
試(shi)劑(ji) 每個反(fan)應加入(ru)的(de)量 N個反(fan)應加入(ru)的(de)量
熒(ying)光(guang)PCR反應液(ye) 14µL N×14µL
酶混(hun)合物(wu) 1 µL N×1 µL
總(zong)量 15 µL N×15µL
（1） 計算好(hao)各試(shi)劑(ji)的(de)使(shi)用量，加入(ru)壹(yi)適當(dang)體積潔(jie)凈離(li)心(xin)管(guan)中，充分混(hun)勻，10000rpm離(li)心(xin)10s，向設定的(de)N個PCR反(fan)應(ying)管(guan)中分別(bie)加入(ru)15μL熒(ying)光(guang)PCR反應液(ye)，向每管(guan)中加入(ru)處(chu)理後樣(yang)品(pin)或(huo)陰性(xing)對照(zhao)(NTC)和陽(yang)性(xing)對照(zhao)(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時(shi)離(li)心(xin)10秒(miao)。
7.2 qPCR反(fan)應條件
將各反(fan)應(ying)管(guan)放入(ru)定量PCR儀(yi)器(qi)的反(fan)應(ying)槽內(nei)。
循環(huan)條件:
1循環(huan) 50℃ for 2 min
預變性(xing) 1循環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增(zeng) 40循環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延伸時(shi)收(shou)集(ji)熒(ying)光(guang)信號(hao)。報告基(ji)團(tuan)：設置為FAM。淬(cui)滅(mie)基(ji)團(tuan)：NONE，請(qing)勿(wu)選(xuan)擇ROX參(can)比熒(ying)光(guang)。
MN-c, 小鼠皮(pi)質神(shen)經元(yuan)甲基(ji)綠(lv)Methyl GreenBS

腺(xian)病毒轉(zhuan)化(hua)的(de)胚(pei)腎細胞;AAV-293 腎足突細(xi)胞*培(pei)養基(ji) 100mL茜(qian)素(su)綠(lv);酸(suan)性(xing)綠(lv)25Alizarin greenBS

前(qian)列(lie)腺平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞RNAHPSMC miRNA5 μg萘酚(fen)綠(lv)BNaphthol Green BBS

SCN2B Others Human  SCN2B 細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 固綠(lv)FCFFast Green FCFBS

大(da)額(e)牛(niu)腎細胞;BFR-K1子(zi)種綠(lv)A；藍AAlphazurine ABS
CM-R095大(da)鼠成(cheng)年表(biao)皮(pi)角質形成(cheng)層細胞*培(pei)養基(ji)100mL兩(liang)性(xing)黴素(su)B()含量測(ce)定Amphotericin B

NP Others H7N9 甲型(xing)流感(gan) H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Nucleocapsid / NP 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 醋酸(suan)增(zeng)血(xue)壓(ya)素(su)>98%,BRAngiotensin Acetate

小鼠胚(pei)胎(tai)成(cheng)纖維(wei)細胞-處(chu)理MEF-mt鎂試(shi)劑(ji)IIARMagnesonII

非(fei)洲綠(lv)猴(hou)腎細胞;Vero E6 類(lei)惡(e)性(xing)色(se)素(su)瘤，A375細(xi)胞 LS 174T(結(jie)腸(chang)腺癌細(xi)胞)高鐵(tie)試(shi)劑(ji)AR,98.5%Ferron

EB病(bing)毒(du)轉化的B細胞;KMY0922酚(fen)試(shi)劑(ji)(3--2-苯並(bing)噻(sai)唑啉(lin)酮(tong)腙(zong)鹽酸(suan)鹽)AR,>98%3-Methyl-2-benzothialinone
馬鏈(lian)球(qiu)菌獸(shou)疫(yi)亞種（ SEZ）核(he)酸(suan)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 大(da)內(nei)皮(pi)素(su)-1 （1-39），豬(zhu)>95%,BRBig Endothelin -1 (1-39),porcine

結(jie)直(zhi)腸腺(xian)癌(ai)細(xi)胞;HCT-8 [HRT-18]腦(nao)鈉(na)素(su)-32，大(da)鼠>95%,BRBNP-32, rat

Hep-3B細(xi)胞，肝癌(ai)細(xi)胞系(xi) 小鼠肺癌細(xi)胞,LLC細(xi)胞 大(da)額(e)牛(niu)與婆羅(luo)門牛雜交F1代(dai)皮膚(fu)成(cheng)纖維(wei)樣細胞;BOS-6鈴(ling)蟾(chan)肽(tai)>95%,BRBombesin

MFC(小鼠胃癌(ai)細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2緩激(ji)肽>95%,BRBradykinin

Promocell C-23025 Fibroblast Growth Medium 3, 成(cheng)纖維(wei)細胞生(sheng)長(chang)培養基(ji)3型(xing)(即用型) 500ml大(da)麥(mai)芽(ya)堿(）HPLC≥95%，Hordenine