海(hai)鷗彎曲菌核酸(suan)檢(jian)測試劑盒(he)（熒光PCR法）

訂(ding)購信息(xi)：
 產(chan)品名稱：海(hai)鷗彎曲菌核酸(suan)檢(jian)測試劑盒(he)（熒光PCR法）
規(gui)格(ge)：50T
編(bian)號：BH-P96453
分(fen)類(lei)：熒(ying)光PCR法
儲(chu)存(cun)條(tiao)件(jian)：-20℃避光保(bao)存(cun)，避免(mian)反復(fu)凍(dong)融。
運(yun)輸(shu)：低(di)溫、避光，快遞(di)免(mian)費送(song)貨上(shang)門(men)。
產(chan)品特(te)點(dian)：
◇高(gao)特(te)異(yi)性：與(yu)其他病(bing)毒無交叉反應(ying)，無(wu)非特(te)異(yi)性擴(kuo)增(zeng)；
◇高(gao)靈敏(min)度(du)：檢測靈敏(min)度(du)可(ke)達10~100拷(kao)貝；
◇操(cao)作簡(jian)便：該系(xi)列(lie)所(suo)有試(shi)劑均采(cai)用(yong)相(xiang)同的(de)體系(xi)和(he)條(tiao)件，可(ke)同(tong)時(shi)進(jin)行(xing)多(duo)個檢測；
◇高(gao)通量(liang)：多種雙(shuang)重(zhong)PCR檢(jian)測以及(ji)三重(zhong)PCR檢(jian)測試劑盒(he)。

準(zhun)備(bei)物(wu)品：
清理(li)液（A）                                   毫(hao)升
染(ran)色液（t B）                                   微升(sheng)
稀(xi)釋(shi)液（C）                                   毫(hao)升
溶(rong)解液（tD）                                   毫(hao)升
產(chan)品說(shuo)明書(shu)                                   1份(fen)
使(shi)用(yong)及效(xiao)果(guo)：
PCR反應(ying)特(te)點(dian)
(1) 特(te)異(yi)性強
PCR反應(ying)的(de)特(te)異(yi)性決(jue)定因素(su)為(wei)：
①引(yin)物(wu)與(yu)模板(ban)DNA特(te)異(yi)正確(que)的(de)結(jie)合(he)；
②堿(jian)基(ji)配對原(yuan)則；
③Taq DNA聚(ju)合酶(mei)合成(cheng)反應(ying)的(de)忠實(shi)性；
④靶(ba)基因的(de)特(te)異(yi)性與(yu)保(bao)守(shou)性。
其中引物(wu)與(yu)模板(ban)的(de)正確(que)結(jie)合(he)是關鍵。引物(wu)與(yu)模板(ban)的(de)結(jie)合(he)及引物(wu)鏈的(de)延(yan)伸(shen)是(shi)遵(zun)循(xun)堿(jian)基(ji)配對原(yuan)則的(de)。聚合(he)酶(mei)合成(cheng)反應(ying)的(de)忠實(shi)性及Taq DNA聚(ju)合酶(mei)耐高(gao)溫性，使(shi)反應(ying)中模板(ban)與(yu)引物(wu)的(de)結(jie)合(he)(復(fu)性)可(ke)以(yi)在(zai)較高的(de)溫度(du)下進行(xing)，結(jie)合(he)的(de)特(te)異(yi)性大大(da)增(zeng)加，被擴(kuo)增(zeng)的(de)靶(ba)基因片段也就能保(bao)持(chi)很高(gao)的(de)正確(que)度(du)。再通過選(xuan)擇特(te)異(yi)性和保(bao)守(shou)性高的(de)靶(ba)基因區(qu)，其特(te)異(yi)性程度(du)就更高(gao)。
(2) 靈敏(min)度(du)高
PCR產(chan)物(wu)的(de)生成量是以(yi)指數(shu)方式增(zeng)加的(de)，能將(jiang)皮(pi)克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級的(de)起始待測模板(ban)擴(kuo)增(zeng)到(dao)微克(ke)(ug=10-6g)水平(ping)。能從100萬(wan)個細胞中檢出(chu)壹個靶(ba)細胞；在病(bing)毒的(de)檢測中，PCR的(de)靈敏(min)度(du)可(ke)達3個RFU(空(kong)斑形成(cheng)單(dan)位(wei))；在(zai)細菌(jun)學(xue)中zui小檢出率為(wei)3個細菌(jun)。
(3) 簡(jian)便、快速(su)
PCR反應(ying)用(yong)耐高(gao)溫的(de)Taq DNA聚(ju)合酶(mei)，壹次(ci)性地將(jiang)反應(ying)液加好(hao)後，即在(zai)DNA擴(kuo)增(zeng)液和水浴鍋上(shang)進行(xing)變(bian)性-退(tui)火-延(yan)伸(shen)反應(ying)，壹(yi)般在(zai)2～4 小時完(wan)成(cheng)擴(kuo)增(zeng)反應(ying)。擴(kuo)增(zeng)產(chan)物(wu)壹(yi)般用(yong)電泳(yong)分析(xi)，不(bu)壹(yi)定要用(yong)同位(wei)素，無(wu)放射性汙(wu)染(ran)、易推(tui)廣(guang)。
(4) 對標(biao)本的(de)純(chun)度(du)要求低(di)
不(bu)需要分(fen)離病(bing)毒或細(xi)菌(jun)及培(pei)養細胞，DNA 粗(cu)制品及(ji)總(zong)RNA均可(ke)作(zuo)為(wei)擴(kuo)增(zeng)模(mo)板(ban)。可(ke)直(zhi)接(jie)用(yong)臨床(chuang)標(biao)本如(ru)血液、體腔(qiang)液、洗嗽(sou)液、毛發(fa)、細(xi)胞、活PCR技(ji)術(shu)概論(lun)。
中國倉(cang)鼠(shu)卵巢(chao)細胞(亞系克(ke)隆(long));CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)乙(yi)二(er)醇雙(shuang)[4-(乙(yi)氧(yang)羰基(ji))苯(ben)基](>98.0%(GC))Ethylene Glycol Bis[4-(ethoxycarbonyl)phenyl] Ether>98.0%(GC)

FRhK-4細(xi)胞，恒河(he)猴(hou)胚(pei)腎(shen)細(xi)胞 胚(pei)胎胰腺(xian)組織(zhi)來(lai)源(yuan)細(xi)胞,CCC-HPE-2細(xi)胞 CM-M064小鼠(shu)前列(lie)腺(xian)上(shang)皮細(xi)胞*培(pei)養基100mL乙(yi)二(er)醇雙(shuang)(4-羧(suo)苯(ben)基)(>95.0%(T))Ethylene Glycol Bis(4-carboxyphenyl) Ether>95.0%(T)

大(da)鼠(shu)癌細(xi)胞;MADB1069,9-雙(shuang)[4-(2-羥(qiang)乙(yi)氧(yang)基)苯(ben)基]芴(wu)(>98.0%(GC))9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene>98.0%(GC)

IL1RAP Others Human  IL1R3 細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照) pre-ELM-11(>98.0%(T))pre-ELM-11>98.0%(T)

脂(zhi)肪細(xi)胞生長(chang)添加(jia)物(wu)PAGS苯(ben)均四(si)酸(suan)(>98.0%(T))Pyromellitic Acid>98.0%(T)
小鼠(shu)膀(pang)胱成纖維(wei)細(xi)胞*培(pei)養基 100mL蔗糖(tang)分子(zi)生物(wu)學(xue)級Sucrose

AtT-20小鼠(shu)垂體瘤(liu)細胞 AtT-20 mouse pituitary tumor cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSD-海(hai)藻糖(tang)二水≥98%,BRD-(+)-Trehalose, dihydrate

IL12B Protein Mouse 重(zhong)組小鼠(shu) IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 標(biao)簽(qian))亮(liang)綠SF(淡(dan)黃)BSLight Green SF Yellowish

U-118 MG(腦(nao)星形膠(jiao)質(zhi)母細(xi)胞瘤) 5×106cells/瓶(ping)×2 SK-OV-3 [SKOV-3](卵巢(chao)癌細胞)健(jian)那綠(lv)BBSJanus Green B

CM-M012小鼠(shu)肺動脈成纖維(wei)細(xi)胞*培(pei)養基100mL酸(suan)性綠3BS，進(jin)口原(yuan)裝(zhuang)Guinea Green B
海(hai)鷗彎曲菌核酸(suan)檢(jian)測試劑盒(he)（熒光PCR法）A9細(xi)胞，皮下(xia)結(jie)締組織(zhi)細(xi)胞 肝(gan)星形細(xi)胞正常(chang),LX-2細(xi)胞 CL-0088H4-IIE(大(da)鼠(shu)肝癌(ai)細胞 )5×106cells/瓶(ping)×25-尿(niao)苷(gan)>99%,BR5-Iodo-Uridine

敘(xu)利亞倉(cang)鼠(shu)腎(shen)細(xi)胞;BHK-215--2'-脫(tuo)氧(yang)尿苷(gan)(苷(gan))>98%,BR5-Iodo-deoxyuridine

FCN1 Others Human  Ficolin-1 / Ficolin-A / FCN1 細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照) 5--2'-脫(tuo)氧(yang)胞苷(gan)>98%,BR5-Iodo-deoxycytidine

神(shen)經(jing)元細(xi)胞Many types of cells　5 ×105方(1ml)2'-甲(jia)氧(yang)基尿(niao)苷(gan)>98%,BR2’-OMe Uridine

NA Others H3N2 甲(jia)型(xing)流(liu)感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 神(shen)經(jing)氨酸(suan)酶(mei) (Neuraminidase / NA) 細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照) TES. Na;2-[(三(羥(qiang)甲基)甲(jia)基)氨(an)基]-1-乙(yi)磺酸(suan)鈉>99%,ARTES
檢(jian)測步驟：
壹(yi)、 試(shi)劑的(de)準(zhun)備(bei)
從(cong)試劑盒(he)中取出(chu)熒光PCR反應(ying)液(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混合(he)物(wu)(Enzymes MIX)，冰(bing)上(shang)融化(hua)並(bing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻後，10000rpm離(li)心10s。
設(she)所需要的(de)PCR反應(ying)管(guan)管數(shu)為(wei)N(N=樣(yang)本數(shu)+1管(guan)陰性對照+1管(guan)陽(yang)性對照)，每(mei)個測試反應(ying)體(ti)系配制如(ru)下(xia)表(biao)：
試(shi)劑 每(mei)個反應(ying)加(jia)入的(de)量 N個反應(ying)加(jia)入的(de)量
熒(ying)光PCR反應(ying)液 14µL N×14µL
酶(mei)混合(he)物(wu) 1 µL N×1 µL
總(zong)量 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算好(hao)各試劑的(de)使(shi)用(yong)量，加(jia)入壹(yi)適當(dang)體(ti)積(ji)潔(jie)凈離心管中，充分(fen)混勻(yun)，10000rpm離(li)心10s，向(xiang)設(she)定的(de)N個PCR反應(ying)管(guan)中分別(bie)加(jia)入15μL熒(ying)光PCR反應(ying)液，向每(mei)管(guan)中加入處(chu)理(li)後樣(yang)品或(huo)陰(yin)性對照(NTC)和(he)陽(yang)性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離(li)心(xin)10秒(miao)。
7.2 qPCR反應(ying)條(tiao)件
將(jiang)各反應(ying)管(guan)放入定(ding)量PCR儀(yi)器的(de)反應(ying)槽內。
循(xun)環(huan)條件(jian):
1循(xun)環(huan) 50℃ for 2 min
預(yu)變性 1循(xun)環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增(zeng) 40循(xun)環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延(yan)伸(shen)時(shi)收集(ji)熒光信(xin)號。報(bao)告基(ji)團：設(she)置為(wei)FAM。淬(cui)滅(mie)基(ji)團：NONE，請(qing)勿選(xuan)擇ROX參(can)比熒(ying)光。