sv-huc-1人(ren)膀胱上(shang)皮(pi)永生(sheng)化細(xi)胞(bao)

公(gong)司(si)產品(pin)僅供(gong)科研研(yan)究(jiu)使用、不得(de)用於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆(fu)蓋培養瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養瓶中的培養液(ye)，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次；

2）添加 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養

液終止消(xiao)化，再輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離心管(guan)中，1000rpm 離心 5min；

3）棄上(shang)清，沈(chen)澱細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基(ji)重懸，然(ran)後按 1:2 比例(li)進行分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養(yang)箱中培養；

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆(fu)蓋培養瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養瓶中的培養液(ye)，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次；

2）添加 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru)培(pei)養液終

止消(xiao)化，輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離心管(guan)中，1000rpm 離心 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置(zhi)於(yu)凍存管(guan)中；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍存管(guan)放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其(qi)移入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮中進行長期保(bao)存。使(shi)用程序(xu)

降(jiang)溫盒可(ke)直接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇細(xi)胞(bao)：以(yi)下細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍存處(chu)理(li)僅(jin)供參考，具(ju)體操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨產品(pin)說明(ming)書為(wei)主(zhu)。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的凍存管(guan)在(zai) 37℃水浴(yu)中迅(xun)速搖(yao)晃解凍，加4 mL培養基(ji)混合(he)均(jun)勻。在1000 rpm條(tiao)件下離心3 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基後(hou)吹勻。然(ran)後將(jiang)所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的培(pei)養瓶(ping)中培養過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入(ru)10 cm皿中，加入(ru)約(yue)8 mL培養基，培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)）。第二天換液(ye)並(bing)檢(jian)查(zha)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進行傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄去(qu)培養(yang)上(shang)清，用不含(han)鈣、鎂離子(zi)的PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶中，使消(xiao)化液(ye)浸(jin)潤所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養瓶置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後在顯微(wei)鏡下觀(guan)察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫落(luo)，迅(xun)速拿(na)回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶後(hou)加2-3ml培養基終(zhong)止消(xiao)化。輕輕打勻後裝(zhuang)入(ru)無菌離心管(guan)中，1000 rpm離心5 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養液(ye)後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)按1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新的(de)含(han)8 mL培養(yang)基的新皿中或者瓶中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱中培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀態(tai)良(liang)好時(shi)，可(ke)進行細(xi)胞(bao)凍存。下面(mian) T25 瓶為(wei)例(li)；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液，裝入(ru)無菌離心管(guan)中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，用PBS清洗壹遍(bian)，棄盡PBS，進行細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根據細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無血清細(xi)胞(bao)凍存液，使細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支(zhi)凍存管(guan)凍存1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註意(yi)凍存管(guan)做好(hao)標(biao)識。將(jiang)凍存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱，24 h後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮灌儲存(cun)。記(ji)錄凍存管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便(bian)下次拿(na)取。

三(san)、培養註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先觀(guan)察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完(wan)好，培(pei)養(yang)液(ye)是否有(you)漏(lou)液(ye)、渾濁(zhuo)等現象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述(shu)現象(xiang) 發(fa)生請(qing)及時和我們(men)聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了(le)解細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所(suo)用培養(yang)基(ji)、血清比(bi)例(li)、所(suo)需 細(xi)胞(bao)因(yin)子等(deng)，確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培養(yang)條件不(bu)壹致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)出(chu)現問(wen)題(ti)，責任(ren)由(you) 客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面(mian)，顯微(wei)鏡下觀(guan)察細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸問(wen)題(ti)，部分(fen)細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫度(du) 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈碰(peng)亡破碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正常現象(xiang)。觀(guan)察好細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞(bao)可(ke)以消(xiao)化，懸浮(fu)細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混勻收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培(pei)養基重懸 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種到新的(de)培養瓶或培(pei)養皿中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱中進行培養。

5. 請客戶用相同(tong)條件的(de)培(pei)養基(ji)用於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各拍(pai)幾(ji)張細(xi)胞(bao)照片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便於(yu)和我司(si)技(ji)術部溝(gou)通(tong) 交流。由(you)於(yu)運(yun)輸的(de)原因(yin)，個別敏(min)感細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現不(bu)穩(wen)定的(de)情況(kuang)，請及(ji)時(shi)和我們(men)聯(lian)系，告知細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體情(qing)況(kuang)，以便(bian)我們(men)的(de)技(ji)術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤回(hui)訪(fang)直至問(wen)題(ti)解決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供(gong)科研使用。

8. 備(bei)註：運(yun)輸用的培(pei)養(yang)基 (灌液培(pei)養(yang)基(ji)) 不能再用來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用按照說明(ming)書(shu)細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條件新配制(zhi)的培養(yang)基來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第壹次傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿。

公司(si)正在出售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

NGFB： 神經(jing)生(sheng)長因(yin)子β抗(kang)體 SCARB1 Others Mouse 小(xiao)鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性對照)

CL-0079ES-2(人(ren)卵(luan)巢(chao)透(tou)明(ming)細(xi)胞(bao)癌(ai)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠(shu)髓(sui)過(guo)氧化物(wu)酶(mei)特異性抗(kang)中性粒(li)細(xi)胞(bao)胞(bao)質抗(kang)體(ti)IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑(ji)盒 FN(Mouse Fibronectin)  小鼠纖連(lian)蛋(dan)白 96T

C9orf127： 鼻咽癌細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)基因(yin)6抗體(ti) 大(da)鼠(shu)腦膠(jiao)質瘤(liu)細(xi)胞(bao);C6

SF126(人(ren)腦瘤細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 RD(惡性胚(pei)胎(tai)橫(heng)紋(wen)肌(ji)瘤(liu)) 大(da)鼠(shu)髓(sui)過(guo)氧化物(wu)酶(mei)特異性抗(kang)中性粒(li)細(xi)胞(bao)胞(bao)質抗(kang)體(ti)IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA 試劑(ji)盒 Flt3(Mouse FMS-like tyrosine kinase 3)  小鼠FMS樣酪酸激酶(mei)3 96T

Sodium / Hydrogen Exchanger 1： 氫(qing)通(tong)道蛋(dan)白抗(kang)體(ti) EB病毒(du)轉(zhuan)化的(de)人(ren)B淋巴細(xi)胞(bao);HH-16

IRGM： 免(mian)疫相(xiang)關(guan)鳥苷(gan)三(san)0酸酶(mei)基(ji)因(yin)抗體(ti) IL3RA Others Human 人(ren) IL3RA / CD123 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性對照)

人(ren)胰腺癌細(xi)胞(bao);PANC-1 人(ren)癌(ai)易(yi)感蛋(dan)白1(BRCA-1)ELISA 試劑(ji)盒 PAR4 (protease-activated receptor 4) 蛋(dan)白酶(mei)活(huo)化受體(ti)4/前(qian)列腺細(xi)胞(bao)雕亡(wang)反應蛋(dan)白4抗(kang)原(yuan) 0.5mg

IL-13Ra2： 白(bai)細(xi)胞(bao)介素(su)-13受體(ti)a2抗(kang)體 人(ren)肺(fei)腺癌細(xi)胞(bao);Calu-3

RKO(人(ren)結(jie)腸(chang)腺癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 甲(jia)型流(liu)感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素(su) (Hemagglutinin / HA) 桿(gan)狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性對照) 人(ren)癌(ai)胚(pei)鐵蛋(dan)白(CEF) ELISA 試劑(ji)盒 PARP(poly ADP-ribose polymerase)N-Terminus 多(duo)腺苷(gan)二(er)0酸多(duo)聚(ju)酶(mei)抗(kang)原(N端(duan)) 0.5mg

I-309： 嗜(shi)酸粒(li)細(xi)胞(bao)趨化蛋(dan)白CCL1抗(kang)體(ti) 直腸(chang)粘(zhan)膜(mo)上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(1ml)

sv-huc-1人(ren)膀胱上(shang)皮(pi)永生(sheng)化細(xi)胞(bao)Rho B： RhoB蛋(dan)白抗(kang)體(ti) HT1080細(xi)胞(bao)，纖維肉(rou)瘤(liu)細(xi)胞(bao) 細(xi)胞(bao),HCE1細(xi)胞(bao) 人(ren)表皮黑(hei)色(se)素(su)細(xi)胞(bao)-中色素(su)總RNAHEM-m NA

CD83 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) CD83 / HB15 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性對照) 大(da)鼠(shu)補(bu)體(ti)成(cheng)分(fen)5(C5)ELISA試劑(ji)盒 CDK-2(Human Cyclin-dependent kinase 2)  人(ren)周期素(su)依賴(lai)性激酶(mei)2 96T

Relaxin 3 receptor 1： G蛋(dan)白偶(ou)聯(lian)受體(ti)135/松(song)弛素(su)受體(ti)3抗(kang)體 小(xiao)鼠肺(fei)腺癌低轉(zhuan)移細(xi)胞(bao)(VAP33-GFP融合(he)蛋(dan)白穩(wen)定(ding)過(guo)表達(da));LA1-VAP33-GFP

CL-0307SW1116(人(ren)結(jie)腸(chang)腺癌細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠(shu)補(bu)體(ti)成(cheng)分(fen)4a(C4a)ELISA試劑(ji)盒 CDK-1(Human Cyclin-dependent kinase 1)  人(ren)周期素(su)依賴(lai)性激酶(mei)1 96T

CHEK2： 絲(si)酸(suan)蛋(dan)白激酶(mei)1抗(kang)體 FGFR4 Others Human 人(ren) FGFR4 / FGF Receptor 4 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性對照)