①使抗原(yuan)或(huo)抗(kang)體(ti)結合(he)到某種(zhong)固相(xiang)載(zai)體(ti)表面(mian)，並保(bao)持(chi)其(qi)免疫(yi)活(huo)性。

　　②使抗原(yuan)或抗體(ti)與(yu)某種(zhong)酶(mei)連接(jie)成酶(mei)標(biao)抗(kang)原或抗體(ti)，這(zhe)種酶(mei)標(biao)抗(kang)原或抗體(ti)既保留其(qi)免疫(yi)活(huo)性，又保留酶(mei)的(de)活(huo)性。在測(ce)定時(shi)，把受(shou)檢標(biao)本(ben)(測(ce)定其(qi)中(zhong)的(de)抗(kang)體(ti)或抗(kang)原)和酶(mei)標(biao)抗(kang)原或抗體(ti)按不(bu)同的(de)步(bu)驟與(yu)固相(xiang)載(zai)體(ti)表面(mian)的(de)抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)起反應(ying)。用洗滌(di)的(de)方(fang)法(fa)使固(gu)相載(zai)體(ti)上(shang)形(xing)成的(de)抗(kang)原(yuan)抗體(ti)復(fu)合(he)物與(yu)其(qi)他(ta)物質分開，結(jie)合(he)在固(gu)相載(zai)體(ti)上(shang)的(de)酶(mei)量(liang)與(yu)標(biao)本(ben)中受檢物質的(de)量(liang)成壹定的(de)比(bi)例(li)。加(jia)入(ru)酶(mei)反應(ying)的(de)底(di)物後，底物被酶(mei)催化變(bian)為(wei)有色產(chan)物，產物的(de)量(liang)與(yu)標(biao)本(ben)中受檢物質的(de)量(liang)直(zhi)接(jie)相(xiang)關(guan)，故(gu)可根(gen)據(ju)顏(yan)色(se)反應(ying)的(de)深(shen)淺刊物定性或定量(liang)分析。由(you)於酶(mei)的(de)催化頻率(lv)很(hen)高(gao)，故(gu)可地(di)地(di)放大反應(ying)效果，從(cong)而(er)使測(ce)定方法(fa)達(da)到很高(gao)的(de)敏感度。因此，ELISA檢測(ce)是壹(yi)項(xiang)定位、定性和定量(liang)(敏感度可達(da)每毫升ng~pg水平(ping))的(de)綜(zong)合(he)技術(shu)。
 

　　關於載(zai)脂蛋白(bai)ELISA檢測(ce)試(shi)劑盒(he)樣(yang)本到底是(shi)用血清(qing)還(hai)是(shi)血(xue)漿(jiang)問題(ti)，廠家(jia)認為其(qi)實(shi)都(dou)是可以(yi)的(de)。

　　可用作(zuo)ELISA測(ce)定的(de)標(biao)本(ben)十(shi)分廣泛，體(ti)液(ye)（如(ru)血清(qing)）、分泌物（唾液(ye)）和排(pai)泄物（如(ru)尿液(ye)、糞(fen)便(bian)）等(deng)均(jun)可作(zuo)標(biao)本(ben)以測(ce)定其(qi)中(zhong)某(mou)種(zhong)抗(kang)體(ti)或抗(kang)原成份。有些標(biao)本(ben)可直(zhi)接(jie)進(jin)行(xing)測(ce)定（如(ru)血清(qing)、尿(niao)液(ye)），有些則需(xu)經預處(chu)理（如(ru)糞(fen)便(bian)和某(mou)些(xie)分泌物）。大部分ELISA檢測(ce)均(jun)以血(xue)清(qing)為(wei)標(biao)本(ben)。血漿(jiang)中除(chu)尚(shang)含有纖維(wei)蛋(dan)白(bai)原和抗(kang)凝(ning)劑外(wai)，其(qi)他(ta)成份均(jun)同等(deng)於血(xue)清(qing)。制(zhi)備(bei)血(xue)漿(jiang)標(biao)本(ben)需(xu)借助(zhu)於抗(kang)凝(ning)劑，而(er)血清(qing)標(biao)本(ben)只要(yao)待(dai)血清(qing)自(zi)然(ran)凝(ning)固、*塊(kuai)收縮(suo)後即可取(qu)得(de)。除(chu)特(te)殊情(qing)況外(wai)，在醫(yi)學檢驗中(zhong)均(jun)以血(xue)清(qing)作(zuo)為檢測(ce)標(biao)本(ben)。在ELISA中血漿(jiang)和血(xue)清(qing)可同等(deng)應(ying)用。血清(qing)標(biao)本(ben)可按(an)常(chang)規(gui)方法采集(ji)，應(ying)註(zhu)意(yi)避(bi)免溶血，紅(hong)細(xi)胞溶解時(shi)會釋放出具(ju)有過氧(yang)化物酶(mei)活(huo)性的(de)物質，以HRP為標(biao)記(ji)的(de)ELISA測(ce)定中，溶血標(biao)本(ben)可能(neng)會(hui)增(zeng)加(jia)非(fei)特(te)異(yi)性顯色。

　　壹(yi)般(ban)說來，在(zai)5天(tian)內測(ce)定的(de)血(xue)清(qing)標(biao)本(ben)可放置於4℃，超(chao)過(guo)壹(yi)周(zhou)測(ce)定的(de)需(xu)低溫冰存(cun)。凍(dong)結(jie)血(xue)清(qing)融(rong)解(jie)後，蛋白(bai)質局(ju)部濃(nong)縮，分布不(bu)均(jun)，應(ying)充分混勻(yun)宜(yi)輕(qing)緩(huan)，避(bi)免氣泡(pao)，可上(shang)下顛倒混和，不(bu)要(yao)在(zai)混勻(yun)器上(shang)強烈(lie)振(zhen)蕩(dang)。混(hun)濁或有沈(chen)澱的(de)血(xue)清(qing)標(biao)本(ben)應(ying)先離心(xin)或(huo)過(guo)濾，澄(cheng)清(qing)後再檢測(ce)。反復(fu)凍(dong)融(rong)會(hui)使抗體(ti)效價跌(die)落(luo)，所以(yi)測(ce)抗體(ti)的(de)血(xue)清(qing)標(biao)本(ben)如(ru)需(xu)保存(cun)作(zuo)多次檢測(ce)，宜(yi)少(shao)量(liang)分裝冰(bing)存(cun)。保(bao)存(cun)血清(qing)自(zi)采(cai)集(ji)時(shi)就應(ying)註(zhu)意(yi)無(wu)菌操(cao)作(zuo)，也可加(jia)入(ru)適當防(fang)腐(fu)劑。