豬elisa試劑盒的(de)原(yuan)理:
豬elisa試劑盒的(de)基礎是抗(kang)原(yuan)或(huo)抗(kang)體(ti)的(de)固相化及(ji)抗(kang)原(yuan)或(huo)抗(kang)體(ti)的(de)酶標記(ji)。在(zai)測(ce)定時(shi),受(shou)檢(jian)標(biao)本(測(ce)定其(qi)中(zhong)的(de)抗體(ti)或(huo)抗(kang)原(yuan))與固相載體(ti)表面的抗原(yuan)或(huo)抗(kang)體(ti)起(qi)反應(ying)。此時(shi)固相上(shang)的酶(mei)量與標(biao)本(ben)中受檢(jian)物質(zhi)的(de)量呈壹定的(de)比(bi)例。再(zai)加入酶標(biao)記(ji)的抗原(yuan)或(huo)抗(kang)體(ti),也(ye)通(tong)過(guo)反(fan)應(ying)而結合(he)在固相載體(ti)上(shang)。結合(he)在固相載體(ti)表面的抗原(yuan)或(huo)抗(kang)體(ti)仍(reng)保持其(qi)免疫(yi)學活性(xing),酶(mei)標記(ji)的(de)抗(kang)原(yuan)或(huo)抗(kang)體(ti)既(ji)留(liu)存其(qi)免疫(yi)學活性(xing),又(you)留存(cun)酶(mei)的(de)活性(xing)。加入酶反(fan)應(ying)的(de)底(di)物(wu)後(hou),底(di)物(wu)被(bei)酶(mei)催化成為有色(se)產(chan)物,產(chan)物的量與標(biao)本(ben)中受檢(jian)物質(zhi)的(de)量直接(jie)相關,故(gu)可(ke)根據(ju)呈色(se)的深(shen)淺(qian)進(jin)行(xing)定(ding)性(xing)或(huo)定(ding)量分(fen)析(xi)。因為(wei)酶的催化(hua)效(xiao)率很(hen)高(gao),間(jian)接(jie)地(di)放大(da)了(le)免疫(yi)反應(ying)的(de)結果,使(shi)測(ce)定方(fang)法(fa)達(da)到很(hen)高(gao)的敏(min)感(gan)度(du)。
豬elisa試劑盒操(cao)作步驟(zhou):
1.使(shi)用(yong)前(qian)將(jiang)試劑盒置(zhi)室溫(wen)30分(fen)鐘,恢(hui)復至室(shi)溫(wen)。
2.取所需(xu)用量酶標(biao)板條,設(she)空白(bai)對照(zhao)1孔(kong)、陰(yin)性(xing)/陽(yang)性(xing)對照(zhao)各(ge)2孔(kong),未用的(de)板條盡(jin)快密(mi)封(feng),2~8℃保(bao)存。
3.空(kong)白(bai)對照(zhao)孔(kong)加樣(yang)品稀(xi)釋(shi)液(ye)100μl;陰、陽(yang)性(xing)對照(zhao)孔(kong)分(fen)別加入陰、陽(yang)性(xing)對照(zhao)100μl;樣(yang)品孔(kong)每孔(kong)加入稀(xi)釋(shi)後(hou)的樣(yang)品100μl。
4.混(hun)勻(yun),置(zhi)37℃反應(ying)30分(fen)鐘。
5.扣(kou)去孔(kong)內液體(ti),每孔(kong)加滿洗滌液(ye),靜(jing)置30秒後棄(qi)去(qu),重復洗滌5次(ci),拍(pai)幹。
6.每孔(kong)加酶(mei)標(biao)記物(wu)100μl(空白(bai)孔除(chu)外)。置37℃反(fan)應(ying)30分(fen)鐘。
7.洗滌,同(tong)步(bu)驟5。
8.每孔(kong)依(yi)次(ci)加底(di)物(wu)液(ye)A、底(di)物(wu)液(ye)B各(ge)50μl,混(hun)勻(yun),37℃避(bi)光反(fan)應(ying)10分(fen)鐘。
9.每孔(kong)加終止液50μl,混(hun)勻(yun),用(yong)空白(bai)孔調零,於(yu)450nm(可用(yong)630nm作參比波(bo)長(chang))測(ce)定各(ge)孔(kong)吸(xi)光值(zhi)(A值(zhi))。
豬elisa試劑盒註(zhu)意事(shi)項(xiang):
1.實(shi)驗操(cao)作時(shi)需(xu)戴(dai)手(shou)套、穿工作衣(yi),嚴(yan)格(ge)健全和(he)執(zhi)行(xing)消(xiao)毒隔(ge)離制(zhi)度(du),各(ge)種(zhong)實(shi)驗廢(fei)棄(qi)物都(dou)應(ying)按(an)傳(chuan)染物(wu)處理。
2.終止液具(ju)有腐蝕(shi)性(xing),應(ying)避(bi)免接觸(chu)皮(pi)膚(fu)和(he)衣(yi)物(wu),如(ru)不慎接(jie)觸請立即用(yong)大(da)量自來(lai)水沖(chong)洗。
3.酶標(biao)板從(cong)冷(leng)藏環(huan)境中(zhong)取出時(shi)應(ying)恢(hui)復至室(shi)溫(wen)方(fang)可(ke)開(kai)袋(dai),未用完(wan)的酶(mei)標板需(xu)放(fang)入有幹燥劑的(de)密封(feng)袋(dai)中保(bao)存(cun)。
4.濃縮洗滌液(ye)在(zai)低溫(wen)時(shi)容(rong)易(yi)結晶(jing),使(shi)用(yong)時(shi)需(xu)恢(hui)復至室(shi)溫(wen)以(yi)*溶解。
5.洗滌時(shi)各(ge)孔(kong)均(jun)需加滿液體(ti),防(fang)止孔口有(you)遊離(li)酶(mei)不能洗凈。
6.用(yong)於(yu)檢測(ce)的樣(yang)品應(ying)保(bao)持(chi)新(xin)鮮(xian)。
7.試驗結果的(de)判(pan)定(ding)必(bi)須以(yi)酶(mei)標儀(yi)讀(du)數(shu)為準(zhun)。
8.不同批號試劑組(zu)分(fen)不得混(hun)用(yong)。