SW1353人(ren)腎(shen)上(shang)腺皮質(zhi)小細胞癌(ai)細胞

公(gong)司(si)產品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)研研究(jiu)使用、不得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細胞傳代(dai)：

1）細胞生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清洗細胞壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞回縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入 5ml 培(pei)養(yang)

液終止(zhi)消化，再(zai)輕輕(qing)吹(chui)打細胞使之脫落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移至 15ml 離心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上清，沈澱(dian)細胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按 1:2 比(bi)例進行(xing)分瓶(ping)傳代(dai)，最(zui)後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)；

2、細胞凍(dong)存：

1）細胞生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清洗細胞壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞回縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入培(pei)養(yang)液終

止(zhi)消化，輕(qing)輕吹(chui)打細胞使之脫落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移至 15ml 離心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適量(liang)的(de)凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞，並放(fang)置於凍(dong)存管中；

4）先將(jiang)細胞凍(dong)存管放(fang)置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其(qi)移入-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入液氮(dan)中(zhong)進行(xing)長期保存。使用程序

降溫盒可(ke)直(zhi)接放(fang)入-80℃。

二(er)、細胞培(pei)養(yang)操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以下(xia)細胞培(pei)養(yang)凍(dong)存處理(li)僅(jin)供(gong)參(can)考，具(ju)體(ti)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨(huo)產品(pin)說明書(shu)為(wei)主。將(jiang)含有1 mL細胞懸(xuan)液的(de)凍(dong)存管在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中迅速(su)搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下離心3 min，棄去上清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所有細胞懸(xuan)液加(jia)入含適量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過(guo)夜（或將(jiang)細胞懸(xuan)液加(jia)入10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜）。第(di)二(er)天換液並檢(jian)查(zha)細胞密(mi)度。

2) 細胞傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞密(mi)度達(da) 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄去培(pei)養(yang)上(shang)清，用不含鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消化液浸潤所有細胞，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中消化1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞消化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞大部(bu)分變圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿(na)回操作(zuo)臺，輕敲幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消化。輕(qing)輕打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌離心管中，1000 rpm離(li)心5 min，棄去上清液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液按1:2比(bi)例分到新的(de)含8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新皿(min)中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細胞凍(dong)存：待(dai)細胞生(sheng)長(chang)狀態良(liang)好時，可進(jin)行(xing)細胞凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集細胞及細胞培(pei)養(yang)液，裝入無(wu)菌離心管中，1000 rpm條(tiao)件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗壹遍，棄盡(jin)PBS，進行(xing)細胞計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細胞數(shu)量(liang)加(jia)入無(wu)血(xue)清細胞凍(dong)存液，使細胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管凍(dong)存1mL細胞懸(xuan)液，註意凍(dong)存管做(zuo)好標識。將(jiang)凍(dong)存管放(fang)入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄(lu)凍(dong)存管位置(zhi)以便(bian)下(xia)次拿(na)取。

公(gong)司(si)正在(zai)出(chu)售的(de)產品(pin)：

Nidogen 2： 巢(chao)蛋白(bai)NID2抗體(ti) SAC-IIC3細胞，腹(fu)水(shui)瘤(liu)細胞 人(ren)結(jie)腸(chang)癌細胞,CACO-2細胞 斑(ban)馬(ma)魚(yu)尾鰭細胞;AB.9

ST6GALNAC2 Others Mouse 小鼠(shu) STHM / ST6GALNAC2 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽性對照(zhao)) 大鼠(shu)酸(suan)性成(cheng)纖維(wei)細胞生(sheng)長(chang)因子(zi)(FGF1)ELISA試劑(ji)盒(he) IGFBP-1(Human insulin-like growth factors binding protein 1)  人結合(he)蛋白(bai)1 96T

NHEDC2： 線(xian)粒體(ti)/氫交換蛋白(bai)質(zhi)2抗體(ti) 小膠(jiao)質(zhi)細胞生(sheng)長(chang)添加(jia)物(wu)MGS

EC9706人(ren)食(shi)管癌細胞 Human esophageal cancer cell line EC9706. DMEM+10%FBS 大鼠(shu)酸(suan)性成(cheng)纖維(wei)細胞生(sheng)長(chang)因子(zi)(aFGF/FGF-1)ELISA試劑(ji)盒(he) ADRA1A  大鼠(shu)能(neng)a1A受(shou)體(ti) 96T

Neurogenin 1： 神(shen)經元素(su)1抗體(ti) ACVR1 Others Mouse 小鼠(shu) ALK-2 / ACVR1 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽性對照(zhao))

IL-1RA： 白(bai)介素-1受(shou)體(ti)拮(jie)抗劑(ji)抗體(ti) 恒河猴腎(shen)細胞;RM-1 人(ren)胰(yi)腺癌細胞，HPAC細胞 SGC-7901(胃(wei)腺癌細胞)

CD68 Others Rat 大鼠(shu) CD68 / Macrosialin 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽性對照(zhao)) 人ω幹(gan)擾(rao)素(IFN-ω)ELISA 試劑(ji)盒(he) PDGF-BB peptide 血小板源(yuan)性生(sheng)長(chang)因子(zi)-BB抗原 0.5mg

IKK gamma： KB抑(yi)制(zhi)蛋白(bai)激(ji)酶(mei)γ抗體(ti) CM-H022人(ren)前(qian)列(lie)腺成(cheng)纖維(wei)細胞培(pei)養(yang)基(ji)100mL

SP2/0-Ag14細胞，鼠(shu)骨(gu)髓瘤細胞 BALB/3T3(BALB/C小鼠(shu)胚成(cheng)纖維(wei)細胞) 人(ren)羊膜(mo)細胞;WISH 人(ren)γ肽(Pγ)ELISA 試劑(ji)盒(he) Pdx1(pancreatic and duodenal homeobox 1) 胰(yi)十(shi)二(er)指腸(chang)同(tong)源(yuan)異(yi)型(xing)盒基(ji)因抗原 0.5mg

phospho-IKK gamma (Ser85)： 0酸(suan)化KB抑(yi)制(zhi)蛋白(bai)激(ji)酶(mei)γ抗體(ti) IL12A Others Human 人(ren) IL12A / NKSF1 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽性對照(zhao))

SW1353人(ren)腎(shen)上(shang)腺皮質(zhi)小細胞癌(ai)細胞SQSTM1： 泛素(su)結(jie)合(he)蛋白(bai)P62抗體(ti) 原代(dai)單(dan)核細胞特(te)制(zhi)無(wu)血(xue)清添加(jia)劑(ji)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：1ml

RLF, 大鼠(shu)淋(lin)巴(ba)成(cheng)纖維(wei)細胞 大鼠(shu)玻(bo)連蛋白(bai)(VTN)ELISA試劑(ji)盒(he) PLSCR1(Human phospholipid scramblase 1)  人0脂爬行(xing)酶1 96T

Rap2A： Rap2A抗體(ti) CD40 Others Canine 狗(gou) CD40 / TNFRSF5 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽性對照(zhao))

HEPG2.2.15 肝癌細胞HBV病(bing)毒(du)株 大鼠(shu)波(bo)形(xing)蛋白(bai)(VIM)ELISA試劑(ji)盒(he) HMGCS1(Human 3-hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A synthase 1)  人3-羥基(ji)-3-甲(jia)基(ji)戊(wu)二(er)酰(xian)合(he)酶(mei)1 96T

Reg3 gamma： 胰(yi)島(dao)β細胞生(sheng)長(chang)因子(zi)Reg IIIγ抗體(ti) Ke-3細胞，腎(shen)癌(ai)(瘤(liu)株(zhu)) 人子(zi)宮(gong)內膜(mo)癌(ai)細胞,RL95-2細胞 人(ren)腸(chang)微血(xue)管內皮(pi)細胞總(zong)RNAHIMEC NA

三(san)、培(pei)養(yang)註意事項(xiang) 

1. 收(shou)到細胞後(hou)首先觀察(cha)細胞瓶(ping)是(shi)否完(wan)好，培(pei)養(yang)液是(shi)否有漏液、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象，若(ruo)有上述(shu)現(xian)象 發(fa)生(sheng)請(qing)及時和我(wo)們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞說(shuo)明(ming)書(shu)，了(le)解細胞相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞形(xing)態、所用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清比例、所需(xu) 細胞因子(zi)等(deng)，確(que)保細胞培(pei)養(yang)條(tiao)件壹致，若(ruo)由(you)於培(pei)養(yang)條(tiao)件不壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致細胞出(chu)現(xian)問題(ti)，責任(ren)由 客(ke)戶自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用 75%酒(jiu)精擦(ca)拭細胞瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞狀態。因運輸問題(ti)，部分細胞由(you)於(yu)溫度 變化及劇(ju)烈碰亡(wang)破碎形(xing)成(cheng)碎片(pian)，是(shi)正常(chang)現(xian)象。觀(guan)察(cha)好細胞狀態後(hou)，75%酒(jiu)精消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可(ke)以消化，懸(xuan)浮細胞直(zhi)接混勻(yun)收(shou)集細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞，並接種到新的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或培(pei)養(yang)皿(min)中，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用(yong)相(xiang)同(tong)條(tiao)件的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細胞培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶收(shou)到細胞後(hou)前(qian) 3 天各拍幾(ji)張(zhang)細胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞狀態，便於(yu)和我(wo)司(si)技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通(tong) 交流。由於(yu)運輸的(de)原因，個(ge)別敏(min)感細胞會出現(xian)不穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況(kuang)，請(qing)及時和我(wo)們聯(lian)系，告(gao)知細胞 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以便(bian)我(wo)們的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤(zong)回訪直至問題(ti)解決(jue)。

7. 該細胞僅(jin)供(gong)科(ke)研使用。

8. 備(bei)註：運輸用的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液培(pei)養(yang)基(ji)) 不能(neng)再用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細胞，請(qing)換用按照(zhao)說明書(shu)細胞培(pei) 養(yang)條(tiao)件新配(pei)制(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細胞。     收(shou)到細胞後(hou)第(di)壹次(ci)傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。