柯(ke)薩(sa)奇(qi)病(bing)毒B2型核酸檢測試劑盒(he)

產品(pin)特點(dian)：
◇高特異(yi)性(xing)：與其(qi)他(ta)病(bing)毒無交叉(cha)反應(ying)，無非特異(yi)性(xing)擴(kuo)增(zeng)；
◇高靈(ling)敏(min)度：檢測靈敏(min)度可達(da)10~100拷貝(bei)；
◇操作簡便(bian)：該(gai)系(xi)列(lie)所有試劑均采(cai)用(yong)相同(tong)的(de)體(ti)系(xi)和(he)條(tiao)件(jian)，可(ke)同(tong)時(shi)進行(xing)多個檢測；
◇高通(tong)量(liang)：多種(zhong)雙重(zhong)PCR檢測以(yi)及三(san)重(zhong)PCR檢測試劑盒(he)。

訂(ding)購信(xin)息(xi)：
 產品(pin)名(ming)稱：柯薩(sa)奇(qi)病(bing)毒B2型核酸檢測試劑盒(he)
規格(ge)：50T
編號(hao)：BH-P96397
分類(lei)：熒(ying)光PCR法(fa)
儲(chu)存(cun)條(tiao)件(jian)：-20℃避光保存(cun)，避免(mian)反復(fu)凍融。
運(yun)輸：低(di)溫(wen)、避光，快遞免(mian)費(fei)送(song)貨(huo)上(shang)門。

準備(bei)物(wu)品(pin)：
清(qing)理(li)液(ye)（A）                                   毫(hao)升(sheng)
染色(se)液（t B）                                   微(wei)升
稀釋(shi)液(ye)（C）                                   毫(hao)升(sheng)
溶解(jie)液（tD）                                   毫(hao)升(sheng)
產品(pin)說明(ming)書                                   1份
使用(yong)及效(xiao)果：
PCR反應(ying)特點(dian)
(1) 特異(yi)性(xing)強(qiang)
PCR反應(ying)的(de)特異(yi)性(xing)決定因素為(wei)：
①引物(wu)與模板DNA特異(yi)正確(que)的(de)結(jie)合；
②堿(jian)基配對原(yuan)則；
③Taq DNA聚合酶合成(cheng)反(fan)應(ying)的(de)忠(zhong)實(shi)性(xing)；
④靶基(ji)因的(de)特異(yi)性(xing)與保守(shou)性(xing)。
其中(zhong)引物(wu)與模板的(de)正確(que)結(jie)合是關鍵(jian)。引物(wu)與模板的(de)結(jie)合及引(yin)物(wu)鏈的(de)延伸是遵循堿(jian)基配對原(yuan)則的(de)。聚合酶合成(cheng)反(fan)應(ying)的(de)忠(zhong)實(shi)性(xing)及Taq DNA聚合酶耐高(gao)溫(wen)性(xing)，使(shi)反(fan)應(ying)中模板與引(yin)物(wu)的(de)結(jie)合(復(fu)性(xing))可以(yi)在(zai)較(jiao)高的(de)溫度(du)下進(jin)行(xing)，結(jie)合的(de)特異(yi)性(xing)大(da)大(da)增(zeng)加，被擴增(zeng)的(de)靶基(ji)因片段也就能(neng)保持(chi)很高的(de)正確(que)度。再(zai)通過(guo)選擇(ze)特異(yi)性(xing)和(he)保守(shou)性(xing)高(gao)的(de)靶基(ji)因區，其特異(yi)性(xing)程(cheng)度(du)就更(geng)高。
(2) 靈敏(min)度高
PCR產物(wu)的(de)生成量(liang)是以(yi)指(zhi)數(shu)方式(shi)增(zeng)加的(de)，能(neng)將皮克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級(ji)的(de)起始(shi)待測模板擴(kuo)增(zeng)到微(wei)克(ke)(ug=10-6g)水(shui)平(ping)。能(neng)從100萬個細(xi)胞(bao)中(zhong)檢出壹個靶細(xi)胞(bao)；在(zai)病(bing)毒的(de)檢測中，PCR的(de)靈敏(min)度可達(da)3個RFU(空(kong)斑(ban)形(xing)成(cheng)單(dan)位(wei))；在細(xi)菌(jun)學中(zhong)zui小檢出率為(wei)3個細(xi)菌(jun)。
(3) 簡便(bian)、快速
PCR反應(ying)用(yong)耐高(gao)溫(wen)的(de)Taq DNA聚合酶，壹次(ci)性(xing)地(di)將(jiang)反(fan)應液(ye)加好後(hou)，即(ji)在DNA擴增(zeng)液和水(shui)浴(yu)鍋上(shang)進行(xing)變(bian)性(xing)-退火(huo)-延伸反應，壹般(ban)在(zai)2～4 小時完成(cheng)擴增(zeng)反應。擴(kuo)增(zeng)產物壹般(ban)用(yong)電泳分析，不(bu)壹定(ding)要用(yong)同位(wei)素，無放(fang)射(she)性(xing)汙(wu)染(ran)、易推(tui)廣(guang)。
(4) 對標(biao)本(ben)的(de)純度(du)要求(qiu)低(di)
不(bu)需要分離(li)病(bing)毒或(huo)細(xi)菌(jun)及培(pei)養細(xi)胞(bao)，DNA 粗制品(pin)及總(zong)RNA均可作為擴(kuo)增(zeng)模板。可(ke)直(zhi)接(jie)用(yong)臨床(chuang)標本(ben)如(ru)血液、體(ti)腔(qiang)液、洗嗽液(ye)、毛(mao)發(fa)、細(xi)胞(bao)、活(huo)PCR技(ji)術(shu)概論。

檢測步驟(zhou)：
壹、 試劑的(de)準備(bei)
從試劑盒(he)中(zhong)取出熒(ying)光PCR反應(ying)液(BC-qPCR MIX)、酶混(hun)合物(wu)(Enzymes MIX)，冰上(shang)融化並(bing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)後(hou)，10000rpm離(li)心10s。
設所(suo)需要的(de)PCR反應(ying)管(guan)管(guan)數(shu)為(wei)N(N=樣本(ben)數(shu)+1管(guan)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)+1管(guan)陽性(xing)對(dui)照(zhao))，每個測試反應體(ti)系(xi)配制如(ru)下表：
試劑 每個反(fan)應(ying)加入的(de)量(liang) N個反(fan)應(ying)加入的(de)量(liang)
熒(ying)光PCR反應(ying)液 14µL N×14µL
酶混(hun)合物(wu) 1 µL N×1 µL
總(zong)量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計算(suan)好各試劑的(de)使用(yong)量(liang)，加入壹適(shi)當體(ti)積潔(jie)凈離(li)心管(guan)中，充(chong)分混勻(yun)，10000rpm離(li)心10s，向設定的(de)N個PCR反應(ying)管(guan)中分別加入15μL熒(ying)光PCR反應(ying)液，向每管(guan)中加入處理(li)後(hou)樣品(pin)或陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)(NTC)和陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離(li)心10秒(miao)。
7.2 qPCR反應(ying)條(tiao)件(jian)
將各反應(ying)管(guan)放(fang)入(ru)定(ding)量(liang)PCR儀(yi)器(qi)的(de)反應(ying)槽(cao)內。
循環(huan)條(tiao)件(jian):
1循環(huan) 50℃ for 2 min
預變性(xing) 1循環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴增(zeng) 40循環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收(shou)集熒(ying)光信(xin)號(hao)。報告(gao)基團：設(she)置(zhi)為FAM。淬(cui)滅基團：NONE，請勿選(xuan)擇(ze)ROX參(can)比熒(ying)光。
大(da)額牛(niu)皮膚(fu)成(cheng)纖(xian)維(wei)樣細(xi)胞(bao);BOS-2四(si)丙(bing)基氫氧化銨(an)25%溶液(ye)Tetrapropylammonium hydroxide 25% solutionBR

Caki-1, 腎透明(ming)細(xi)胞(bao)癌(ai)皮膚(fu)轉(zhuan)移細(xi)胞(bao)毒(du)胡(hu)蘿(luo)蔔(bu)素(>95% (HPLC),BC)Thapsigargin, from Thapsia garganica>95% (HPLC),BC

腦瘤(liu)細(xi)胞(bao);SF763 大(da)鼠頜(he)下(xia)腺(xian)上(shang)皮細(xi)胞(bao)*培(pei)養基 100mL硫黃(huang)素(su) T(>75%,BS)Thioflavin T>75%,BS

食管(guan)癌組織源(yuan)性(xing)原(yuan)代細(xi)胞(bao)Many types of cells(1ml)/1ml硫藤(teng)黃(huang)素(su)(>95%,BC)Thiolutin from Streptomyces luteosporeus>95%,BC

GP140 Others HIV 類(lei)缺(que)陷病(bing)毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp140 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 硫堇(jin)(>90%,BS)Thionin>90%,BS
PC-3前列(lie)腺(xian)癌細(xi)胞(bao) Human prostate cancer PC-3 cells F-12培(pei)養基+10%FBS（）含(han)量(liang)測定Benzhexol

SCG2 Protein Human 重(zhong)組 SCG2 / Secretogranin II 蛋白(bai) (His 標簽(qian))（）含(han)量(liang)測定Folic acid

小鼠腹(fu)脊髓(sui)神(shen)經細(xi)胞(bao)(MN-vsc)(1×106) lovo, 結(jie)腸癌(ai)細(xi)胞(bao) Human()檢查(zha)Calcium gluconate

中國(guo)倉鼠(shu)卵巢細(xi)胞(bao)(亞系(xi)克(ke)隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163（）含(han)量(liang)測定Pyrantel pamoate

VNN1 Others Mouse 小鼠 VNN1 / Vanin-1 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) ,唑啉(lin)>99%,BRCefazolin
柯薩(sa)奇(qi)病(bing)毒B2型核酸檢測試劑盒(he)CHL1 Others Human  CHL1 / CALL 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 酸性(xing)羅丹明(ming)B，英文(wen)名(ming)或英文(wen)縮寫：Lissamine rhodamine B，級(ji)別：BS，規格(ge)：1克(ke)

腦血管(guan)周細(xi)胞(bao)RNAHBVP miRNA5 μg頭孢(bao)坐(zuo)林內 Cqfczolin 2923-19-9

PLA2G12B Others Mouse 小鼠 PLA2G12B / PLA2G13 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) L-MINEL-甲(蛋酸)美國(guo)藥典級(ji)白(bai)色(se)至米白色粉末(mo)COLDsigma

Kyse510 食管(guan)癌細(xi)胞(bao)2-環己(ji)基乙磺酸，英文(wen)名(ming)或英文(wen)縮寫：CHES，級(ji)別：IND，規格(ge)：100克(ke)

CL-0394NCI-H2170(肺鱗(lin)癌細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2Agar,Bacterological 100g 日本(ben)分裝