查帕雷病(bing)毒(du)核(he)酸(suan)檢(jian)測試劑盒（熒光PCR法）

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 產品名稱：查(zha)帕雷病(bing)毒(du)核(he)酸(suan)檢(jian)測試劑盒（熒光PCR法）
規格(ge)：50T
編(bian)號(hao)：BH-P96485
分(fen)類(lei)：熒(ying)光PCR法
儲(chu)存條件(jian)：-20℃避光保存，避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融(rong)。
運輸(shu)：低(di)溫(wen)、避光，快(kuai)遞免(mian)費(fei)送(song)貨(huo)上(shang)門。

準(zhun)備(bei)物品：
清(qing)理(li)液(ye)（A）                                   毫(hao)升(sheng)
染色(se)液(ye)（t B）                                   微升(sheng)
稀(xi)釋(shi)液(ye)（C）                                   毫(hao)升(sheng)
溶解液(ye)（tD）                                   毫(hao)升(sheng)
產品說明書                                   1份
使用及效果：
產品特(te)點(dian)：
◇高(gao)特(te)異(yi)性(xing)：與(yu)其(qi)他(ta)病(bing)毒(du)無交(jiao)叉反應(ying)，無(wu)非(fei)特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增；
◇高(gao)靈敏度(du)：檢測靈敏度(du)可達(da)10~100拷(kao)貝；
◇操(cao)作(zuo)簡便(bian)：該(gai)系(xi)列(lie)所(suo)有(you)試(shi)劑均采(cai)用相(xiang)同的體系(xi)和(he)條件(jian)，可同時(shi)進行(xing)多個檢(jian)測；
◇高通(tong)量(liang)：多種雙(shuang)重(zhong)PCR檢(jian)測以及三重PCR檢測試劑盒。

PCR反應(ying)特(te)點(dian)
(1) 特(te)異(yi)性(xing)強(qiang)
PCR反應(ying)的特(te)異(yi)性(xing)決(jue)定因(yin)素(su)為：
①引物與模(mo)板DNA特(te)異(yi)正(zheng)確的結合(he)；
②堿(jian)基配對(dui)原(yuan)則；
③Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)合(he)成(cheng)反應(ying)的忠實(shi)性(xing)；
④靶(ba)基因的特(te)異(yi)性(xing)與(yu)保守(shou)性。
其中(zhong)引(yin)物與模(mo)板的正確結合(he)是(shi)關(guan)鍵(jian)。引(yin)物與模(mo)板的結合(he)及引物鏈的延伸是(shi)遵(zun)循(xun)堿(jian)基配對(dui)原(yuan)則的。聚合(he)酶(mei)合(he)成(cheng)反應(ying)的忠實(shi)性(xing)及Taq DNA聚合(he)酶(mei)耐高溫(wen)性(xing)，使反應(ying)中(zhong)模板與(yu)引(yin)物的結合(he)(復性)可(ke)以在(zai)較(jiao)高(gao)的溫度(du)下(xia)進行(xing)，結合(he)的特(te)異(yi)性(xing)大大增加(jia)，被(bei)擴增的靶(ba)基因片(pian)段也就能保持很(hen)高(gao)的正確度(du)。再通(tong)過選擇特(te)異(yi)性(xing)和(he)保守(shou)性高(gao)的靶(ba)基因區(qu)，其(qi)特(te)異(yi)性(xing)程(cheng)度(du)就更高(gao)。
(2) 靈敏度(du)高
PCR產物的生成(cheng)量(liang)是(shi)以指(zhi)數(shu)方式(shi)增加(jia)的，能將皮克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級的起始(shi)待測模板擴(kuo)增到(dao)微克(ke)(ug=10-6g)水平。能從(cong)100萬個細胞中檢出壹個靶(ba)細胞；在病(bing)毒(du)的檢測中，PCR的靈敏度(du)可達(da)3個RFU(空斑(ban)形(xing)成(cheng)單位)；在(zai)細菌學(xue)中(zhong)zui小(xiao)檢出率(lv)為3個細菌。
(3) 簡(jian)便(bian)、快(kuai)速
PCR反應(ying)用(yong)耐高溫(wen)的Taq DNA聚合(he)酶(mei)，壹次性地將反應(ying)液(ye)加(jia)好(hao)後(hou)，即(ji)在(zai)DNA擴(kuo)增液(ye)和(he)水浴(yu)鍋(guo)上(shang)進行(xing)變性-退(tui)火(huo)-延伸反應(ying)，壹般在(zai)2～4 小(xiao)時(shi)完(wan)成(cheng)擴(kuo)增反應(ying)。擴(kuo)增產物壹般用(yong)電(dian)泳(yong)分(fen)析(xi)，不(bu)壹定要(yao)用(yong)同位(wei)素(su)，無(wu)放(fang)射性(xing)汙(wu)染、易推(tui)廣(guang)。
(4) 對(dui)標本的純度(du)要(yao)求低(di)
不(bu)需要(yao)分(fen)離(li)病(bing)毒(du)或細菌及培(pei)養細胞，DNA 粗(cu)制(zhi)品及總(zong)RNA均可(ke)作(zuo)為擴增模(mo)板。可(ke)直接用(yong)臨床標本如(ru)血液(ye)、體(ti)腔(qiang)液(ye)、洗(xi)嗽(sou)液(ye)、毛發、細胞、活(huo)PCR技術(shu)概論。

檢測步驟(zhou)：
壹、 試(shi)劑的準(zhun)備(bei)
從(cong)試劑盒中取出熒(ying)光PCR反應(ying)液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混合(he)物(Enzymes MIX)，冰(bing)上融(rong)化(hua)並(bing)振蕩(dang)混勻後(hou)，10000rpm離(li)心10s。
設所(suo)需要(yao)的PCR反應(ying)管(guan)管數(shu)為N(N=樣本數(shu)+1管陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)+1管(guan)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))，每(mei)個測試反應(ying)體(ti)系(xi)配制如下(xia)表(biao)：
試(shi)劑 每(mei)個反應(ying)加(jia)入(ru)的量(liang) N個反應(ying)加(jia)入(ru)的量(liang)
熒(ying)光PCR反應(ying)液(ye) 14µL N×14µL
酶(mei)混合(he)物 1 µL N×1 µL
總(zong)量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算好(hao)各(ge)試(shi)劑的使用(yong)量(liang)，加入(ru)壹適當體(ti)積(ji)潔(jie)凈離(li)心管(guan)中，充(chong)分(fen)混(hun)勻，10000rpm離(li)心10s，向設定的N個PCR反應(ying)管(guan)中分(fen)別(bie)加入(ru)15μL熒(ying)光PCR反應(ying)液(ye)，向每(mei)管中(zhong)加(jia)入(ru)處(chu)理(li)後(hou)樣(yang)品(pin)或(huo)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)(NTC)和(he)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時離(li)心10秒。
7.2 qPCR反應(ying)條(tiao)件(jian)
將各(ge)反應(ying)管(guan)放入(ru)定量(liang)PCR儀(yi)器(qi)的反應(ying)槽(cao)內。
循(xun)環(huan)條件(jian):
1循(xun)環(huan) 50℃ for 2 min
預(yu)變(bian)性 1循(xun)環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增 40循(xun)環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延(yan)伸時收(shou)集(ji)熒光信(xin)號(hao)。報告(gao)基團：設置為FAM。淬(cui)滅(mie)基團：NONE，請勿選擇(ze)ROX參(can)比(bi)熒光。

整(zheng)合(he)SV40基因的上皮(pi)細胞;HBL-100 [HBL100]鈮標準(zhun)溶液(ye)(1000μg/ml)Niobium standard1000μg/ml

DNASE1 Others Human  DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 鎳(nie)標準(zhun)溶液(ye)(100μg/mL，基體:1%HNO3)Nickel Standard100μg/mL，基體:1%HNO3

CL-0384MDA-MB-468-06(癌細胞)5×106cells/瓶(ping)×2鉀(jia)標準(zhun)溶液(ye)(500mg/L,溶劑：水)Potassium standard500mg/L,溶劑：水

Mv1Lu細胞，貂肺上皮(pi)細胞 紅白細胞白血病(bing)細胞,HEL細胞 皮膚(fu)成(cheng)纖(xian)維細胞;HSAS4鉀標準(zhun)溶液(ye)(1000µg/mL,基體:1%HCl) Potassium Solution1000µg/mL,基體:1%HCl

鯉魚(yu)尾鰭(qi)細胞;YZ16鐠標準(zhun)溶液(ye)(1000μg/ml)Praseodymium standard1000μg/ml
LAYN Others Human  Layilin 細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 硫(liu)酸(suan)鈣(gai)(>99%,BR)>99%,BRCalcium sulfate, anhydrous

CM-H084臍靜(jing)脈(mai)平滑(hua)肌(ji)細胞*培(pei)養基100mL二(er)環己基碳二(er)亞胺(>99%,BR)>99%,BRDCC, Dicyclohexylcarbodiimide

SERPINI1 Others Mouse 小鼠(shu) SerpinI1 / Neuroserpin 細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 丁(ding)二(er)酸(suan)二(er)甲(jia)酯(>99%,BR)>99%,BRDimethyl succinate

小鼠角(jiao)膜(mo)上(shang)皮細胞*培(pei)養基 100mL二(er)甲(jia)基甲(jia)酮鈉(na)鹽(>97%,BR)>97%,BRDimethylglyoxime  salt

L6565小鼠(shu)白血病(bing)克(ke)隆細胞系(xi) L6565 murine leukemia cell line RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS直接藍(lan)71(≥50%,BR)≥50%,BRDirect blue 71
查(zha)帕雷病(bing)毒(du)核(he)酸(suan)檢(jian)測試劑盒（熒光PCR法）軟(ruan)骨(gu)細胞Many types of cells　5 × 105方(fang)(1ml)N-苯(ben)甲(jia)酰(xian)-2'-脫氧(yang)胞苷>98%,BRbz-dC

MAP3K8 Others Human  TPL2 / MAP3K8 / MEKK8 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) N6-苯(ben)甲(jia)酰(xian)-2'-脫氧(yang)腺(xian)苷(gan)>98%,BRbz-dA

KM小(xiao)鼠子(zi)瘤(liu)株(zhu);U145'-O-三苯(ben)甲(jia)基尿苷(gan)>97%,BRTrt-rU

NIH/3T3細胞，胚胎成(cheng)纖(xian)維細胞 高轉(zhuan)移(yi)肝癌(ai)細胞,LM3細胞 CL-0104HEp-2(喉表(biao)皮(pi)樣(yang)癌(ai)細胞)5×106cells/瓶(ping)×2Trt-dU>98%,BRTrt-dU

敘利(li)亞(ya)倉(cang)鼠腎(shen)細胞;BHK-21N2-洛(luo)沙坦(tan)-洛(luo)沙坦(tan)(洛(luo)沙坦(tan)雜(za)質)美國進口N2-Losartanyl-losartan (Losartan Impurity)