MM.1S人(ren)多發(fa)性骨(gu)髓瘤(liu)細(xi)胞(bao)

公司(si)產品(pin)僅供科研研究(jiu)使(shi)用(yong)、不得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆蓋(gai)培(pei)養瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的(de)培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至培養瓶中(zhong)，倒(dao)置顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回縮變圓(yuan)後(hou)加(jia)入 5ml 培養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化，再輕(qing)輕(qing)吹打(da)細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離心管(guan)中，1000rpm 離心 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱細胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養基(ji)重懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行分瓶傳(chuan)代(dai)，最(zui)後(hou)放入 37℃，5%CO2細胞(bao)

培養箱中培養；

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆蓋(gai)培(pei)養瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的(de)培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至培養瓶中(zhong)，倒(dao)置顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回縮變圓(yuan)後(hou)加(jia)入培養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化，輕(qing)輕(qing)吹打(da)細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離心管(guan)中，1000rpm 離心 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並放置於凍(dong)存管(guan)中；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞(bao)凍(dong)存管(guan)放置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其(qi)移入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉入液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行長(chang)期(qi)保存。使(shi)用(yong)程序(xu)

降(jiang)溫盒(he)可(ke)直接(jie)放入-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培養操作

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下(xia)細胞(bao)培養凍(dong)存處(chu)理僅供參(can)考，具(ju)體操作步驟以隨(sui)貨(huo)產品(pin)說明(ming)書為主。將(jiang)含有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存管(guan)在 37℃水浴(yu)中迅(xun)速(su)搖晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培養基(ji)混合(he)均勻。在1000 rpm條件下(xia)離心3 min，棄去上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後(hou)吹勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入含適(shi)量(liang)培(pei)養基(ji)的(de)培(pei)養瓶中(zhong)培(pei)養過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培(pei)養基(ji)，培養過(guo)夜(ye)）。第二天(tian)換液(ye)並檢(jian)查細(xi)胞(bao)密(mi)度。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果細胞(bao)密(mi)度達(da) 80%-90%，即(ji)可進(jin)行傳(chuan)代(dai)培(pei)養。

a、棄去培(pei)養上(shang)清(qing)，用不(bu)含鈣(gai)、鎂離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中(zhong)，使(shi)消(xiao)化液(ye)浸潤所有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養瓶置於37℃培養箱中消化1-2 min（視細胞(bao)情況而(er)定），然(ran)後(hou)在顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)消化情況，若(ruo)細胞(bao)大部(bu)分變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿回操作臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培養瓶後(hou)加(jia)2-3ml培養基(ji)終止(zhi)消化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後(hou)裝入無(wu)菌離心管(guan)中，1000 rpm離心5 min，棄去上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹勻。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例(li)分到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培(pei)養基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)，置於培養箱中培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)態良好時，可(ke)進(jin)行細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶為例；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養液(ye)，裝入無(wu)菌離心管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心4 min，棄去上(shang)清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹遍，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細(xi)胞(bao)計數。

b、根據(ju)細胞(bao)數量(liang)加(jia)入無(wu)血清(qing)細胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管(guan)做(zuo)好標識。將(jiang)凍(dong)存管(guan)放入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存(cun)。記錄凍(dong)存管(guan)位置以(yi)便下(xia)次(ci)拿取(qu)。

公(gong)司(si)正在出(chu)售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

CL-0427RL1(大鼠肺(fei)成纖維樣(yang)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2 大鼠線(xian)粒(li)體解偶聯蛋白(bai)1(UCP1)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) sCD40L (Rabbit differentiation 40 ligand)  兔子(zi)可(ke)溶性CD40配體 96T

MEK2： 原活(huo)化蛋白(bai)激(ji)酶(mei)激(ji)酶(mei)2抗體 小鼠胚(pei)胎(tai)成纖維細(xi)胞(bao)(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)

NCI-H716(人(ren)結直腸(chang)腺(xian)癌細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 MDA-MB-231(癌(ai)細(xi)胞(bao)) 大鼠線(xian)粒(li)體甘(gan)油(you)-3-0酸酰基(ji)轉移酶(mei)(GPAM)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) sMHC-2(Mouse soluble myosin heavy chain 2)  小鼠可(ke)溶性肌球蛋白(bai)重(zhong)鏈(lian) 96T

Matriptase： 蛋白(bai)裂(lie)解酶(壹種(zhong)新(xin)的(de)癌(ai)基(ji)因(yin))抗體 中國倉(cang)鼠卵(luan)巢(chao)細(xi)胞(bao)(亞系(xi)克隆);CHO-HCV-NS5A

IL36G Protein Human 重組(zu)人(ren) IL36G / IL1F9 蛋白(bai) (aa 18-169) 大鼠線(xian)粒(li)體超(chao)氧化物歧化酶(SOD2)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) MT  大鼠金(jin)屬硫蛋白(bai) 96

HCV-NS1： 丙型肝炎病毒(du)-NS1抗體 IL11RA Others Human 人(ren) IL11RA / IL11Rα 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性對照(zhao))

中國(guo)倉(cang)鼠(shu)卵(luan)巢(chao)細(xi)胞(bao)(亞系(xi)克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA 人(ren)多聚ADP核(he)糖(tang)聚合(he)酶(PARP)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) GATA-3(GATA binding factor 3) GATA結合蛋白(bai)3抗原 0.5mg

HCV-NS3： 丙型肝炎病毒(du)-NS3抗體 EB病毒(du)轉化的(de)人(ren)B淋巴(ba)細胞(bao);KMYF

MDA-MB-453(人(ren)癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 狗(gou) CD2 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 人(ren)多巴(ba)色素異(yi)構(gou)酶(DT)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) GATA-4(GATA binding factor 4) GATA結合蛋白(bai)4抗原 0.5mg

HCV-NS4a： 丙型肝炎病毒(du)-NS4a抗體 巨噬細胞(bao)生長(chang)添(tian)加(jia)物MGS

MM.1S人(ren)多發(fa)性骨(gu)髓瘤(liu)細(xi)胞(bao)EB病毒(du)轉化的(de)人(ren)B淋巴(ba)細胞(bao);KMY0927 大鼠氧化酶(DAO)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Human Pancreastatin  人(ren)胰抑制(zhi)素 96T

Plasminogen： 纖維蛋白(bai)溶酶原(yuan)抗體 婆(po)羅(luo)門牛皮膚成纖維樣(yang)細(xi)胞(bao);BOS-4

人(ren)胎(tai)兒(er)胸腺(xian)細胞(bao)株;HFT-8810 [HFT8810] 人(ren)淋巴(ba)內皮細胞(bao)培養基(ji) 100mL 大鼠兒(er)茶(cha)酚抑素(CST)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) NGF  大鼠神(shen)經生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi) 96T

p95 NBS1： DNA修(xiu)復(fu)蛋白(bai)NBS1抗體 原代(dai)軟(ruan)骨(gu)細胞(bao)特制(zhi)基(ji)礎培(pei)養基(ji)Many types of cells包裝：500/250/100ml

DKK1 Protein Rhesus 重組(zu)恒(heng)河猴(hou) DKK-1 / Dkk1 蛋白(bai) (256 Asn/Gln, Fc 標(biao)簽(qian)) 大鼠兒(er)茶(cha)酚胺(CA)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) MIP-3 Alpha/CCL20  大鼠巨(ju)噬細胞(bao)炎性蛋白(bai)3α 96T

三、培(pei)養註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先(xian)觀(guan)察細(xi)胞(bao)瓶是否完(wan)好，培養液(ye)是否有漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述現象(xiang) 發(fa)生(sheng)請及時和(he)我們(men)聯系(xi)。

2. 仔細(xi)閱讀細胞(bao)說明(ming)書，了(le)解細胞(bao)相關(guan)信(xin)息，如(ru)細(xi)胞(bao)形態、所用培養基(ji)、血清(qing)比例(li)、所需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確保細胞(bao)培養條(tiao)件壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於培養條(tiao)件不(bu)壹致(zhi)而(er)導(dao)致細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題(ti)，責任(ren)由(you) 客戶自行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)狀態。因(yin)運輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分細(xi)胞(bao)由(you)於溫度(du) 變(bian)化及劇烈(lie)碰(peng)亡破(po)碎形成碎片(pian)，是正常(chang)現象(xiang)。觀(guan)察好細胞(bao)狀態後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置於 37℃培養箱放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞(bao)可以(yi)消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)直接(jie)混(hun)勻收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養基(ji)重懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並接(jie)種(zhong)到新(xin)的(de)培(pei)養瓶或(huo)培(pei)養皿(min)中，置於培養箱中進(jin)行培(pei)養。

5. 請(qing)客戶用(yong)相(xiang)同條(tiao)件的(de)培(pei)養基(ji)用於細胞(bao)培養。

6. 建(jian)議(yi)客戶收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)前 3 天各拍(pai)幾(ji)張細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記錄細胞(bao)狀態，便於和(he)我司(si)技(ji)術部(bu)溝通 交流(liu)。由(you)於運輸(shu)的(de)原(yuan)因(yin)，個別敏(min)感(gan)細胞(bao)會出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況，請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體情況，以(yi)便我們(men)的(de)技(ji)術人(ren)員跟蹤(zong)回訪(fang)直(zhi)至問(wen)題(ti)解決。

7. 該細(xi)胞(bao)僅供科研使(shi)用(yong)。

8. 備註(zhu)：運輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養基(ji) (灌液(ye)培(pei)養基(ji)) 不能再用(yong)來培(pei)養細(xi)胞(bao)，請換用(yong)按(an)照(zhao)說明(ming)書細(xi)胞(bao)培 養條(tiao)件新(xin)配制(zhi)的(de)培(pei)養基(ji)來培(pei)養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)第壹次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。