MonoMac6人急(ji)性(xing)單(dan)核細(xi)胞白血病細(xi)胞

公(gong)司產品(pin)僅(jin)供科研研(yan)究使(shi)用、不得(de)用(yong)於臨(lin)床診斷！

1、細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞生(sheng)長(chang)至覆蓋(gai)培養瓶的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培養液，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹(yi)次(ci)；

2）添加 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入 5ml 培(pei)養

液終(zhong)止消化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)細胞用 1-2ml 培(pei)養基重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最(zui)後(hou)放入 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養箱中培養；

2、細胞凍存(cun)：

1）細胞生(sheng)長(chang)至覆蓋(gai)培養瓶的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培養液，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹(yi)次(ci)；

2）添加 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入培(pei)養液終(zhong)

止消化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的(de)凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞，並放(fang)置(zhi)於凍(dong)存(cun)管中(zhong)；

4）先將(jiang)細胞凍存(cun)管放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其(qi)移(yi)入-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮中(zhong)進行(xing)長(chang)期保(bao)存(cun)。使(shi)用程序(xu)

降溫盒可(ke)直接(jie)放入-80℃。

二(er)、細胞培養操作(zuo)

1) 復(fu)蘇細胞：以下(xia)細(xi)胞培養凍存(cun)處理僅(jin)供參考(kao)，具體操作(zuo)步驟以(yi)隨(sui)貨產品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)為(wei)主(zhu)。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞懸(xuan)液的(de)凍存(cun)管在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加4 mL培(pei)養基混(hun)合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)3 min，棄去上(shang)清(qing)液(ye)，加1-2 mL培(pei)養基後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所有細胞懸(xuan)液加入含(han)適(shi)量培養基的(de)培養瓶中(zhong)培養過夜(ye)（或將(jiang)細胞懸(xuan)液加入10 cm皿中，加入約(yue)8 mL培(pei)養基，培(pei)養過夜(ye)）。第(di)二(er)天換(huan)液並(bing)檢查細(xi)胞密(mi)度。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細胞密(mi)度達(da) 80%-90%，即可(ke)進行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養。

a、棄去培養上(shang)清(qing)，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中(zhong)，使(shi)消化(hua)液浸(jin)潤所有細胞，將(jiang)培養瓶置(zhi)於37℃培(pei)養箱中消化(hua)1-2 min（視細(xi)胞情(qing)況而定），然(ran)後(hou)在顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)細胞消化(hua)情(qing)況，若細胞大部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿回操作(zuo)臺，輕(qing)敲幾下培養瓶後(hou)加2-3ml培(pei)養基終(zhong)止消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後(hou)裝入無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加1-2 mL培(pei)養液後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新的(de)含(han)8 mL培(pei)養基的(de)新皿中或者(zhe)瓶中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱中培養。 3) 細胞凍存(cun)：待(dai)細胞生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良好時(shi)，可進行(xing)細(xi)胞凍存(cun)。下面(mian) T25 瓶為(wei)例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞及細胞培養液，裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下離(li)心(xin)4 min，棄去上(shang)清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹(yi)遍，棄盡PBS，進行(xing)細(xi)胞計(ji)數(shu)。

b、根據(ju)細胞數量加入無(wu)血(xue)清(qing)細(xi)胞凍存(cun)液，使(shi)細胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支(zhi)凍存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞懸(xuan)液，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管做(zuo)好標識。將(jiang)凍存(cun)管放(fang)入-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存(cun)。記(ji)錄凍存(cun)管位(wei)置(zhi)以(yi)便(bian)下次(ci)拿取(qu)。

公(gong)司正在(zai)出(chu)售的(de)產品(pin)：

Raw-Blue小(xiao)鼠(shu)單(dan)核細(xi)胞白血病細(xi)胞 Monocytic leukemia cells of Raw-Blue mice DMEM+10% FBS,不能加雙(shuang)抗(kang)+200μg/ml Zeocin 大鼠(shu)纖(xian)維(wei)連(lian)接(jie)蛋(dan)白(FN)ELISA試劑(ji)盒 MHC I /RLA I (Rabbit major histocompatibility complex I )  兔(tu)主(zhu)要(yao)組織(zhi)相容(rong)性(xing)復(fu)合(he)體Ⅰ類(lei) 96T

MCSF： 巨(ju)噬(shi)細(xi)胞克(ke)隆刺激(ji)因子(zi)抗(kang)體 IL17RA Others Human 人(ren) IL17RA / CD217 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

CL-0419QSG-7701(人(ren)正常肝(gan)細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠(shu)纖(xian)維(wei)介(jie)素蛋(dan)白(FGL2)ELISA試劑(ji)盒 CD4(Human cluster Of differentiation)  人(ren)CD4分(fen)子(zi) 96T

MDM2： 雙(shuang)微體2癌(ai)基(ji)因抗(kang)體 小(xiao)鼠(shu)結(jie)締(di)組(zu)織(zhi)L細(xi)胞株(zhu)929克(ke)隆;L-929 [L929]

NCI-H838(人(ren)非小細(xi)胞肺癌(ai)細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 Hep G2(肝(gan)癌(ai)細(xi)胞) 大鼠(shu)纖(xian)維(wei)膠凝(ning)蛋(dan)白1(FCN1)ELISA試劑(ji)盒 BLAP (Rabbit) 兔(tu)骨堿性(xing)0酸酶(mei) ELISA 試劑(ji)盒 96T

HAI-1： 肝(gan)細胞生(sheng)長(chang)因子(zi)激(ji)活物(wu)抑(yi)制劑(ji)抗(kang)體 T-105BIII型膠(jiao)原(yuan)酶(含(han)100mL酶(mei)解(jie)緩(huan)沖(chong)液(ye))10mL

HT1080細(xi)胞，人成(cheng)纖(xian)維(wei)肉瘤細(xi)胞 熱帶(dai)念(nian)珠(zhu)菌 tTA基(ji)因修飾(shi)的(de)小鼠(shu)畸(ji)胎(tai)瘤細(xi)胞(B類);F9-CAG-tTA-1A3 人(ren)多(duo)巴胺(an)D1受(shou)體(D1R)ELISA 試劑(ji)盒 Gelsolin 凝(ning)溶(rong)膠蛋(dan)白抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HA tag(12CA5)： HA tag標簽(qian)單(dan)克(ke)隆抗(kang)體 TNFRSF1A Others Human 人(ren) TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

中(zhong)國倉鼠(shu)卵巢細胞(亞系(xi)克(ke)隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36 人多(duo)巴胺(an)(DA)ELISA 試劑(ji)盒 GFP 綠(lv)色熒光蛋(dan)白 0.5mg

Heamachrome： 血(xue)紅素抗(kang)體 EB病毒(du)轉(zhuan)化(hua)的(de)人B淋巴細(xi)胞;KMYB

MonoMac6人(ren)急性(xing)單(dan)核細(xi)胞白血病細(xi)胞MG-63人(ren)骨肉瘤細(xi)胞 Human osteosarcoma cell line MG-63 MEM培養基(GIBCO)+10%熱(re)滅(mie)活FBS 大鼠(shu)多(duo)藥耐藥(yao)蛋(dan)白1(ABCB1)ELISA試劑(ji)盒 RLN(Human Relaxin)  人(ren)松弛(chi)肽/松弛(chi)素(su) 96T

Phospho-PLC gamma 1(Ser1248)： 0酸化(hua)0酯(zhi)酶Cγ1抗(kang)體 IL2RG Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) IL2RG 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

EB病毒(du)轉(zhuan)化(hua)的(de)人B淋巴細(xi)胞;KMY0910 大鼠(shu)多(duo)效(xiao)生(sheng)長(chang)因子(zi)(PTN)ELISA試劑(ji)盒 IL-6  大鼠(shu)白介(jie)素6 96T

Phospho-PLC γ1 (Tyr783)： 0酸化(hua)0酯(zhi)酶Cγ1抗(kang)體 大額牛(niu)與(yu)婆羅門牛(niu)雜(za)交F1代皮(pi)膚(fu)成(cheng)纖維(wei)樣細(xi)胞;BOS-5

人(ren)胚肺成(cheng)纖維(wei)細胞;HFL1 人淋巴成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞培養基 100mL 大鼠(shu)多(duo)肽YY/酪酪肽(PYY)ELISA試劑(ji)盒 P(Human Growth Hormone Binding Protein)  人(ren)生(sheng)長(chang)激素結(jie)合(he)蛋(dan)白 96T

三(san)、培養註意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收到(dao)細胞後(hou)首先觀(guan)察(cha)細胞瓶是(shi)否(fou)完(wan)好，培(pei)養液是(shi)否(fou)有(you)漏液(ye)、渾濁等(deng)現象(xiang)，若有上(shang)述現(xian)象(xiang) 發(fa)生(sheng)請及時和我們聯(lian)系(xi)。

2. 仔細(xi)閱讀細胞說明(ming)書(shu)，了解(jie)細(xi)胞相關(guan)信息，如(ru)細(xi)胞形(xing)態(tai)、所用培養基、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所需 細胞因子(zi)等(deng)，確保細(xi)胞培養條件(jian)壹(yi)致，若由於培(pei)養條件(jian)不壹(yi)致而導致細(xi)胞出(chu)現問(wen)題，責任由 客(ke)戶(hu)自(zi)行(xing)承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精擦拭(shi)細胞瓶表(biao)面，顯微鏡下觀(guan)察(cha)細胞狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸(shu)問題，部(bu)分(fen)細(xi)胞由於溫度 變(bian)化(hua)及劇(ju)烈碰亡(wang)破(po)碎(sui)形(xing)成碎(sui)片，是(shi)正常現象(xiang)。觀(guan)察(cha)好細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒精消毒瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞可以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細胞直接(jie)混(hun)勻收集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的(de)培養基重(zhong)懸(xuan) 細胞，並接(jie)種到(dao)新的(de)培養瓶或培(pei)養皿中，置(zhi)於培(pei)養箱中進行(xing)培(pei)養。

5. 請客戶(hu)用相同(tong)條件(jian)的(de)培養基用(yong)於細(xi)胞培養。

6. 建議客戶(hu)收到(dao)細胞後(hou)前 3 天(tian)各拍(pai)幾張細(xi)胞照片，記(ji)錄細胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和我司技術部(bu)溝(gou)通 交流。由於運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因，個(ge)別(bie)敏(min)感(gan)細胞會(hui)出(chu)現不穩定(ding)的(de)情(qing)況，請及時和我們聯(lian)系(xi)，告知細胞 的(de)具體情(qing)況，以便(bian)我們的(de)技術人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪直至問題解決。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供科研使(shi)用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的(de)培養基 (灌(guan)液(ye)培(pei)養基) 不能再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養細胞，請換(huan)用按(an)照說明(ming)書(shu)細胞培 養條件(jian)新配(pei)制的(de)培養基來(lai)培(pei)養細胞。     收到(dao)細胞後(hou)第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代(dai)建議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。