MOVAS小鼠(shu)主(zhu)動(dong)脈血管(guan)平(ping)滑肌(ji)細(xi)胞

公司(si)產(chan)品僅供(gong)科研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨床診(zhen)斷(duan)！

1、細(xi)胞傳(chuan)代：

1）細(xi)胞生(sheng)長至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的 80%面積(ji)時，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養液，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下(xia)觀察，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加入 5ml 培(pei)養

液終(zhong)止消化(hua)，再輕輕(qing)吹打(da)細(xi)胞使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將懸(xuan)液轉移至 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈澱細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養基重懸(xuan)，然(ran)後按 1:2 比(bi)例進(jin)行分瓶(ping)傳(chuan)代，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞

培(pei)養箱中(zhong)培養；

2、細(xi)胞凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞生(sheng)長至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的 80%面積(ji)時，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養液，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下(xia)觀察，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加入培(pei)養液終(zhong)

止消化(hua)，輕輕吹(chui)打(da)細(xi)胞使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將懸(xuan)液轉移至 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞，並(bing)放(fang)置(zhi)於(yu)凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞凍(dong)存(cun)管(guan)放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入液氮中(zhong)進(jin)行長期保(bao)存(cun)。使(shi)用(yong)程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫盒(he)可直(zhi)接放(fang)入-80℃。

二、細(xi)胞培(pei)養操作(zuo)

1) 復(fu)蘇細(xi)胞：以(yi)下(xia)細(xi)胞培(pei)養凍(dong)存(cun)處(chu)理僅供(gong)參考，具體(ti)操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨貨(huo)產品(pin)說明書(shu)為主。將含(han)有1 mL細(xi)胞懸(xuan)液的凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速搖(yao)晃解凍(dong)，加4 mL培(pei)養基混合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條件(jian)下(xia)離心3 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培(pei)養基後吹勻。然後將所(suo)有(you)細(xi)胞懸(xuan)液加入含(han)適(shi)量(liang)培(pei)養基的培(pei)養瓶(ping)中(zhong)培養過夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液加入10 cm皿(min)中(zhong)，加入約(yue)8 mL培(pei)養基，培養過夜）。第(di)二天(tian)換液並檢(jian)查細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代：如果(guo)細(xi)胞密(mi)度(du)達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄去(qu)培(pei)養上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離子(zi)的PBS潤洗(xi)細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸潤所(suo)有(you)細(xi)胞，將(jiang)培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱中(zhong)消化(hua)1-2 min（視細(xi)胞情(qing)況(kuang)而定(ding)），然(ran)後在(zai)顯微(wei)鏡下(xia)觀察細(xi)胞消(xiao)化(hua)情(qing)況(kuang)，若細(xi)胞大(da)部分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速拿(na)回操作(zuo)臺，輕敲(qiao)幾(ji)下(xia)培養瓶(ping)後加2-3ml培(pei)養基終(zhong)止消化(hua)。輕輕打(da)勻後裝(zhuang)入無(wu)菌離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，補加(jia)1-2 mL培養液後吹勻。

c、將細(xi)胞懸(xuan)液按1:2比(bi)例分到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養基的新(xin)皿(min)中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞生(sheng)長狀態(tai)良好(hao)時，可進(jin)行細(xi)胞凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例；a、收(shou)集細(xi)胞及細(xi)胞培(pei)養液，裝(zhuang)入無(wu)菌離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下(xia)離心4 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹遍，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細(xi)胞計(ji)數。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞數量(liang)加(jia)入無(wu)血清細(xi)胞凍(dong)存(cun)液，使(shi)細(xi)胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混(hun)勻，每支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞懸(xuan)液，註意凍(dong)存(cun)管(guan)做好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉入液氮灌(guan)儲存(cun)。記(ji)錄凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次(ci)拿(na)取。

三、培養註意事項 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後首先(xian)觀察細(xi)胞瓶(ping)是否完好(hao)，培養液是否有漏液、渾濁等(deng)現象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述現(xian)象(xiang) 發(fa)生(sheng)請及時和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞說明書(shu)，了解細(xi)胞相(xiang)關信息，如細(xi)胞形(xing)態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養基、血清(qing)比(bi)例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞因子(zi)等(deng)，確保(bao)細(xi)胞培(pei)養條件(jian)壹致，若(ruo)由於(yu)培(pei)養條件(jian)不(bu)壹致而導致細(xi)胞出(chu)現(xian)問(wen)題，責任由 客(ke)戶自(zi)行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細(xi)胞瓶(ping)表(biao)面，顯微(wei)鏡下(xia)觀察細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸問(wen)題，部(bu)分細(xi)胞由於(yu)溫(wen)度(du) 變化(hua)及劇(ju)烈(lie)碰亡(wang)破碎形(xing)成(cheng)碎片(pian)，是正常現(xian)象。觀察好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精(jing)消毒瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞可(ke)以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞直(zhi)接混(hun)勻收(shou)集細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養基重懸(xuan) 細(xi)胞，並(bing)接(jie)種(zhong)到新(xin)的(de)培(pei)養瓶(ping)或培(pei)養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱中(zhong)進(jin)行培養。

5. 請客(ke)戶用(yong)相(xiang)同條件(jian)的(de)培(pei)養基用(yong)於(yu)細(xi)胞培(pei)養。

6. 建(jian)議客(ke)戶收(shou)到(dao)細(xi)胞後前 3 天(tian)各拍幾(ji)張(zhang)細(xi)胞照片，記(ji)錄細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和(he)我(wo)司(si)技(ji)術部溝通 交(jiao)流(liu)。由於(yu)運(yun)輸的(de)原因，個(ge)別(bie)敏(min)感細(xi)胞會(hui)出(chu)現(xian)不穩(wen)定(ding)的情(qing)況(kuang)，請及時和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)，告知(zhi)細(xi)胞 的(de)具體(ti)情(qing)況(kuang)，以(yi)便(bian)我(wo)們(men)的(de)技(ji)術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤回訪(fang)直(zhi)至問(wen)題解決(jue)。

7. 該細(xi)胞僅供(gong)科研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸用(yong)的(de)培(pei)養基 (灌液培養基) 不能(neng)再用(yong)來(lai)培養細(xi)胞，請(qing)換用(yong)按(an)照說明書(shu)細(xi)胞培(pei) 養條件(jian)新(xin)配(pei)制(zhi)的(de)培養基來(lai)培養細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細(xi)胞後第壹次(ci)傳(chuan)代建(jian)議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公司(si)正(zheng)在(zai)出(chu)售(shou)的產(chan)品(pin)：

IL17RD Protein Canine 重(zhong)組狗 IL17RD 蛋(dan)白(bai) (His 標簽(qian)) 大(da)鼠(shu)熱(re)休(xiu)克(ke)蛋(dan)白(bai)40(HSP40)ELISA試劑盒(he) CCSA-3(Human colon cancer-specific antigen-3)  人(ren)大(da)腸癌(ai)專壹抗原3 96T

NKp80： 細(xi)胞毒性(xing)受體(ti)NK-p80抗體 STXBP3 Others Human 人(ren) STXBP3 / UNC-18C 桿狀病(bing)毒-昆蟲細(xi)胞裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照)

小鼠(shu)成(cheng)年表(biao)皮(pi)角(jiao)質(zhi)形(xing)成(cheng)層細(xi)胞培(pei)養基 100mL 大(da)鼠(shu)熱(re)休(xiu)克(ke)蛋(dan)白(bai)40(HSP-40)ELISA 試劑盒(he) ATR(Mouse anti-thrombin receptor)  小鼠(shu)抗受體(ti) 96T

CD112： 細(xi)胞粘(zhan)附(fu)分(fen)子(zi)CD112抗體 NRK細(xi)胞，大(da)鼠(shu)腎細(xi)胞 人(ren)原位(wei)胰腺(xian)腺癌細(xi)胞,BxPC-3細(xi)胞 CM-R117大(da)鼠(shu)視(shi)網(wang)膜muller細(xi)胞100mL

FAM3B Others Human 人(ren) FAM3B 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照) 大(da)鼠(shu)熱(re)休(xiu)克(ke)蛋(dan)白(bai)27(HSP-27)ELISA試劑盒(he) MPO  大(da)鼠(shu)髓(sui)過(guo)氧化(hua)物酶 96T

IGIP： 免(mian)疫(yi)球蛋(dan)白(bai)A誘(you)導同源蛋(dan)白(bai)抗體 人(ren)間充質(zhi)幹細(xi)胞-臍(qi)帶 小鼠(shu)骨骼(ge)肌(ji)肌肉母瘤(liu)細(xi)胞，G-7細(xi)胞 P815(肥(fei)大(da)細(xi)胞瘤(liu)細(xi)胞)

B3G2 Others Human 人(ren) B3G2 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照) 人(ren)5脂加(jia)氧酶(5-LO/LOX)ELISA 試劑盒(he) CTGF (connective tissue growth factor) 結締(di)組織(zhi)生(sheng)長因子(zi)(多(duo)肽(tai)抗原) 0.5mg

IL-2： 白(bai)介素2抗體 中(zhong)國(guo)倉鼠(shu)卵(luan)巢(chao)細(xi)胞;CHO

L929細(xi)胞，小鼠(shu)成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞 3T3-L1(小鼠(shu)脂肪細(xi)胞) 小鼠(shu)腦(nao)瘤(liu)細(xi)胞;BC3H1 人(ren)5羥色(se)胺(an)轉運(yun)受體(ti)蛋(dan)白(bai)ELISA試劑盒(he) Cyclin E 周(zhou)期素E/原癌(ai)基因抗原 0.5mg

IL-2： 白(bai)介素2抗體 IL17RA Others Human 人(ren) IL17RA / CD217 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照)

MOVAS小鼠(shu)主(zhu)動(dong)脈血管(guan)平(ping)滑肌(ji)細(xi)胞EB病(bing)毒轉(zhuan)化(hua)的人(ren)B淋巴(ba)細(xi)胞;KM9402 人(ren)大(da)隱靜(jing)脈內皮(pi)細(xi)胞培(pei)養基 100mL 大(da)鼠(shu)白(bai)介素10(IL-10)ELISA 試劑盒(he) PG-A(Human Pepsinogen A)  人(ren)原A 96T

phospho-Proteasome 20S beta 7(Ser214)： 0酸(suan)化(hua)蛋(dan)白(bai)酶體PSMβ7抗體 CL-0376LA795(小鼠(shu)肺(fei)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2

BRL 3A, 大(da)鼠(shu)肝(gan)正常細(xi)胞 大(da)鼠(shu)白(bai)介素1(IL-1)ELISA試劑盒(he) PLAUR/uPAR(Human Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor)  型纖(xian)溶酶原激(ji)活(huo)物受體(ti) 96T

Radixin： 根(gen)蛋(dan)白(bai)抗體 TMED4 Others Human 人(ren) TMED4 / ERS25 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照)

COS-7 非(fei)洲綠(lv)猴(hou)SV40 轉化(hua)的腎細(xi)胞 大(da)鼠(shu)白(bai)介素1(IL-1)ELISA 試劑盒(he) uPA(Human urokinase plasminogen activator)  人(ren)型纖溶酶原激(ji)活(huo)物 96T