背(bei)景(jing)染(ran)色(se)較深(shen)的(de)原因(yin)有(you)哪(na)些(xie)?

1、抗(kang)體濃(nong)度過(guo)高壹(yi)抗(kang)濃度過(guo)高是(shi)常(chang)見(jian)的(de)原因(yin)之壹。解(jie)決(jue)辦法(fa)是(shi)每(mei)次(ci)使(shi)用(yong)新抗(kang)體前(qian)應(ying)當(dang)對(dui)其工作(zuo)濃度進(jin)行測試，使每(mei)壹(yi)抗(kang)體個(ge)體(ti)化(hua)找到適(shi)合(he)自(zi)己實驗(yan)室的(de)理想工作(zuo)濃度既使(shi)是(shi)即(ji)用(yong)型的(de)抗(kang)體也應(ying)如此，不能(neng)只(zhi)簡(jian)單(dan)的(de)按(an)說(shuo)明(ming)書進(jin)行染(ran)色(se)。

2、抗(kang)體孵(fu)音時(shi)間(jian)過(guo)長或(huo)溫(wen)度較(jiao)高(gao)解(jie)決辦法(fa)是(shi)嚴(yan)格執(zhi)行操作(zuo)規程(cheng)更好(hao)隨身(shen)佩(pei)帶報時(shi)表或(huo)報時(shi)鐘及時(shi)提醒(xing)避免(mian)因(yin)遺(yi)忘(wang)而造成時(shi)間(jian)延(yan)長。現在(zai)流(liu)行的(de)二(er)步(bu)法(fa)(Polymer)敏感性(xing)很高(gao)要(yao)求壹(yi)抗(kang)孵(fu)育(yu)的(de)時(shi)間(jian)不是傳統(tong)的(de)1小(xiao)時(shi)而是30分(fen)鐘因(yin)此要根(gen)據(ju)染(ran)色(se)結(jie)果進行調整。

3、DAB變質和顯(xian)色時(shi)間(jian)太長DAB更好(hao)現用(yong)現配(pei)如有(you)沈(chen)渣(zha)應(ying)進行過(guo)濾後再用(yong)。配(pei)制(zhi)好(hao)的(de)DAB不應(ying)存(cun)放時(shi)間(jian)太長因(yin)為(wei)在(zai)沒(mei)有(you)酶的(de)情(qing)況(kuang)下(xia)過(guo)氧化氫(qing)也會遊(you)離(li)出氧原子(zi)與(yu)DAB產(chan)生(sheng)反應(ying)而降低DAB的(de)效(xiao)力(li)，未用完(wan)的(de)DAB存(cun)放在(zai)冰(bing)箱(xiang)裏幾(ji)天後再用(yong)這(zhe)種(zhong)似(si)乎(hu)節約(yue)的(de)辦法(fa)是(shi)不可取的(de)。DAB的(de)顯(xian)色更(geng)好(hao)在(zai)顯(xian)微鏡下監(jian)控(kong)達到(dao)理想的(de)染(ran)色(se)程度時(shi)立即(ji)終止反(fan)應(ying)。不過(guo)當(dang)染(ran)色(se)片太多時(shi)或(huo)用染(ran)色(se)機時(shi)這樣(yang)做似(si)乎(hu)不現實但(dan)至少應(ying)對(dui)壹(yi)些(xie)新的(de)或(huo)少用(yong)的(de)抗(kang)體顯(xian)色時(shi)進行監控避(bi)免顯(xian)色時(shi)間(jian)過(guo)長。

4、組織變幹修(xiu)復(fu)液(ye)溢(yi)出後未及時(shi)補充液(ye)體、染(ran)色(se)切片太多、動(dong)作(zuo)太慢(man)、忘(wang)記(ji)滴液(ye)、滴液(ye)流失(shi)等(deng)都是造(zao)成組織變幹的(de)原因(yin)。解決的(de)辦法(fa)是(shi)操作(zuo)要認(ren)真仔細采用DAKO筆或(huo)PAPPen在(zai)組織周圍(wei)畫圈(quan)可以有(you)效(xiao)的(de)避(bi)免(mian)液(ye)體流失(shi)也能(neng)提(ti)高(gao)操作(zuo)速度。

5、切(qie)片(pian)在(zai)緩(huan)沖(chong)液(ye)或(huo)修(xiu)復(fu)液(ye)中浸(jin)泡(pao)時(shi)間(jian)太長(大於24小(xiao)時(shi))原因(yin)上不清(qing)楚(chu)，但現(xian)象存(cun)在(zai)。有(you)的(de)實驗(yan)室喜(xi)歡(huan)前(qian)將切(qie)片脫蠟至(zhi)修(xiu)復(fu)第二(er)天加抗(kang)體進(jin)行免疫組化染(ran)色(se)如果將裝(zhuang)有(you)切片(pian)和修(xiu)復(fu)液(ye)的(de)容(rong)器(qi)放(fang)在(zai)40C冰(bing)箱(xiang)過(guo)夜(ye)對(dui)結(jie)果無明顯(xian)影響(xiang)如(ru)果(guo)放在(zai)室溫(wen)特別是(shi)炎(yan)熱的(de)夏(xia)天(tian)會出現(xian)背(bei)景(jing)著(zhe)色因(yin)此，不可存(cun)放時(shi)間(jian)太長。

6、壹抗(kang)變質、質量(liang)差(cha)的(de)多(duo)克(ke)降抗(kang)體註(zhu)意(yi)抗(kang)體的(de)有(you)效(xiao)期過(guo)期的(de)抗(kang)體要(yao)麽(me)不昂色要(yao)麽(me)背(bei)暑(shu)著色(se)，用新買(mai)抗(kang)體時(shi)更好(hao)設(she)立陽性對(dui)照(zhao)和用(yong)使用過(guo)的(de)抗(kang)體作(zuo)比較(jiao)