人elisa試(shi)劑盒(he)操作(zuo)過(guo)程(cheng):
1、從(cong)室(shi)溫(wen)平(ping)衡20min後的鋁(lv)箔袋中(zhong)取出所(suo)需(xu)板(ban)條(tiao),剩余板條(tiao)用(yong)自封袋密(mi)封放(fang)回4℃。
2、設置(zhi)標(biao)準品孔、樣(yang)本孔(kong)和空白(bai)孔,空白(bai)孔什(shen)麽(me)都(dou)不(bu)加;人elisa試(shi)劑盒(he)孔各加不(bu)同濃(nong)度的標(biao)準品50μL。
3、待測樣(yang)本孔(kong)先(xian)加待測樣(yang)本10μL,再(zai)加樣(yang)本稀釋(shi)液(ye)40μL。
4、隨(sui)後標準品孔和樣(yang)本孔(kong)中(空白(bai)孔不(bu)加)參與辣根過氧化(hua)物(wu)酶(mei)(HRP)符號(hao)的檢(jian)測(ce)抗(kang)體(ti)100μL,,用(yong)封板(ban)膜(mo)封住(zhu)反(fan)應(ying)孔,37℃水浴(yu)鍋或恒溫箱溫(wen)育60min。
5、棄去(qu)液(ye)體(ti),吸(xi)水紙(zhi)上(shang)拍幹(gan),每(mei)孔加滿(man)洗滌液(ye),靜置(zhi)1min,甩去(qu)洗滌液(ye),吸(xi)水紙(zhi)上(shang)拍幹(gan),如(ru)此(ci)重(zhong)復(fu)洗(xi)板5次(ci)(也(ye)可(ke)用(yong)洗板(ban)機(ji)洗(xi)板)。
6、全部孔(kong)參與底物(wu)A、B各50μL,37℃避(bi)光孵育15min。
7、全部孔(kong)參與停(ting)止液(ye)50μL,15min內(nei),在450nm波利益測(ce)定各孔的OD值。
人elisa試(shi)劑盒(he)實驗(yan)要點及(ji)說(shuo)明:
1.本方法適用(yong)於(yu)貼(tie)壁(bi)細(xi)胞培(pei)育,而不(bu)適用(yong)於(yu)人elisa試(shi)劑盒(he)培(pei)育,可運用(yong)滴(di)片(pian)法;
2.所(suo)運用(yong)的蓋玻片(pian)應(ying)該為(wei)優質玻璃(li)制(zhi)作(zuo),並(bing)通(tong)過(guo)鉻酸洗(xi)液(ye)處理;
3.蓋玻片(pian)十分(fen)薄(bo),易碎(sui),取(qu)放(fang)蓋玻片(pian)時動(dong)作要輕;
4.假如(ru)需(xu)要更多成長狀(zhuang)況共同的(de)細(xi)胞,可(ke)以運用(yong)較(jiao)大的培(pei)育皿,但不(bu)宜過(guo)大,以避(bi)免(mian)培(pei)育液(ye)的(de)浪費和(he)添(tian)加汙染機(ji)率(lv);
5.假如(ru)細(xi)胞貼(tie)壁(bi)成長才(cai)能較(jiao)差,可將(jiang)蓋玻片(pian)在0.5%多(duo)聚賴(lai)氨(an)酸溶(rong)液(ye)中(zhong)浸(jin)泡(pao)5-10分鐘(zhong)並(bing)自然(ran)曬幹(gan)。