腸道(dao)腺(xian)病(bing)毒(du)核(he)酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)（熒光PCR法(fa)）

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 產(chan)品(pin)名稱：腸道(dao)腺(xian)病(bing)毒(du)核(he)酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)（熒光PCR法(fa)）
規(gui)格(ge)：50T
編(bian)號：BH-P97253
分(fen)類：熒光PCR法(fa)
儲(chu)存條(tiao)件：-20℃避(bi)光保(bao)存，避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融。
運(yun)輸(shu)：低(di)溫、避光(guang)，快遞(di)免費送貨上(shang)門。

準(zhun)備物(wu)品(pin)：
清理(li)液(ye)（A）                                   毫(hao)升
染(ran)色液(ye)（t B）                                   微升
稀(xi)釋(shi)液(ye)（C）                                   毫(hao)升
溶解(jie)液(ye)（tD）                                   毫(hao)升
產(chan)品(pin)說明書                                   1份
使(shi)用(yong)及效(xiao)果(guo)：
產(chan)品(pin)特點(dian)：
◇高(gao)特異(yi)性(xing)：與其(qi)他(ta)病(bing)毒(du)無(wu)交(jiao)叉反(fan)應，無非特異(yi)性(xing)擴(kuo)增(zeng)；
◇高(gao)靈敏(min)度(du)：檢(jian)測靈(ling)敏度(du)可達(da)10~100拷(kao)貝；
◇操(cao)作簡(jian)便(bian)：該(gai)系列(lie)所(suo)有試(shi)劑均(jun)采用(yong)相同的(de)體(ti)系和條(tiao)件，可(ke)同時進行(xing)多個(ge)檢(jian)測；
◇高(gao)通量(liang)：多(duo)種(zhong)雙(shuang)重(zhong)PCR檢(jian)測以(yi)及(ji)三(san)重(zhong)PCR檢(jian)測試(shi)劑盒(he)。

PCR反(fan)應特點(dian)
(1) 特異(yi)性(xing)強
PCR反(fan)應的(de)特異(yi)性(xing)決定因(yin)素為(wei)：
①引物與模(mo)板DNA特異(yi)正確的(de)結(jie)合(he)；
②堿(jian)基配對原則；
③Taq DNA聚(ju)合(he)酶合(he)成(cheng)反(fan)應的(de)忠(zhong)實性(xing)；
④靶(ba)基因(yin)的(de)特異(yi)性(xing)與保(bao)守(shou)性(xing)。
其(qi)中引物與模(mo)板的(de)正確結(jie)合(he)是(shi)關鍵。引物與模(mo)板的(de)結(jie)合(he)及引物鏈(lian)的(de)延(yan)伸(shen)是(shi)遵(zun)循堿基配對原則的(de)。聚(ju)合(he)酶合(he)成(cheng)反(fan)應的(de)忠(zhong)實性(xing)及Taq DNA聚(ju)合(he)酶耐高溫性(xing)，使反(fan)應中模板與引物的(de)結(jie)合(he)(復(fu)性(xing))可(ke)以(yi)在(zai)較(jiao)高的(de)溫(wen)度(du)下進行(xing)，結合(he)的(de)特異(yi)性(xing)大大增(zeng)加，被(bei)擴(kuo)增(zeng)的(de)靶(ba)基因(yin)片段(duan)也就能(neng)保持很(hen)高(gao)的(de)正確度(du)。再通(tong)過選(xuan)擇特異(yi)性(xing)和保守(shou)性(xing)高(gao)的(de)靶(ba)基因(yin)區，其(qi)特異(yi)性(xing)程(cheng)度(du)就更(geng)高。
(2) 靈(ling)敏度(du)高
PCR產(chan)物的(de)生(sheng)成(cheng)量(liang)是(shi)以(yi)指(zhi)數方(fang)式增(zeng)加的(de)，能(neng)將(jiang)皮(pi)克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級的(de)起(qi)始待測模板擴(kuo)增(zeng)到微克(ke)(ug=10-6g)水(shui)平。能(neng)從(cong)100萬(wan)個(ge)細胞(bao)中檢(jian)出壹(yi)個(ge)靶細(xi)胞；在(zai)病(bing)毒(du)的(de)檢(jian)測中，PCR的(de)靈(ling)敏度(du)可達(da)3個(ge)RFU(空斑形(xing)成(cheng)單(dan)位)；在(zai)細(xi)菌(jun)學(xue)中zui小(xiao)檢(jian)出率為(wei)3個(ge)細菌(jun)。
(3) 簡(jian)便、快(kuai)速(su)
PCR反(fan)應用(yong)耐高溫的(de)Taq DNA聚(ju)合(he)酶，壹次性地將(jiang)反(fan)應液(ye)加好後(hou)，即在(zai)DNA擴(kuo)增(zeng)液(ye)和(he)水浴(yu)鍋上(shang)進行(xing)變性(xing)-退(tui)火(huo)-延(yan)伸(shen)反應，壹般(ban)在(zai)2～4 小(xiao)時完(wan)成(cheng)擴(kuo)增(zeng)反應。擴(kuo)增(zeng)產物壹(yi)般用(yong)電(dian)泳(yong)分(fen)析(xi)，不(bu)壹定(ding)要(yao)用(yong)同位素，無放射(she)性汙染(ran)、易(yi)推廣。
(4) 對標(biao)本的(de)純(chun)度(du)要(yao)求(qiu)低(di)
不(bu)需要(yao)分(fen)離(li)病(bing)毒(du)或(huo)細(xi)菌(jun)及(ji)培(pei)養(yang)細(xi)胞，DNA 粗(cu)制品(pin)及(ji)總(zong)RNA均(jun)可(ke)作為(wei)擴(kuo)增(zeng)模板。可(ke)直接(jie)用(yong)臨床標(biao)本如(ru)血(xue)液(ye)、體(ti)腔液(ye)、洗嗽液(ye)、毛(mao)發(fa)、細(xi)胞(bao)、活PCR技(ji)術概(gai)論(lun)。

檢(jian)測步(bu)驟(zhou)：
壹(yi)、 試(shi)劑的(de)準(zhun)備
從(cong)試(shi)劑盒(he)中取出(chu)熒光PCR反(fan)應液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶混合(he)物(Enzymes MIX)，冰(bing)上(shang)融化(hua)並振(zhen)蕩混(hun)勻後(hou)，10000rpm離(li)心10s。
設所需(xu)要(yao)的(de)PCR反(fan)應管管數為(wei)N(N=樣(yang)本數+1管陰性對照(zhao)+1管陽(yang)性對照(zhao))，每(mei)個(ge)測試(shi)反應體系(xi)配制如(ru)下(xia)表(biao)：
試(shi)劑 每(mei)個(ge)反應加入(ru)的(de)量(liang) N個(ge)反應加入(ru)的(de)量(liang)
熒光PCR反(fan)應液(ye) 14µL N×14µL
酶混合(he)物 1 µL N×1 µL
總(zong)量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算(suan)好各(ge)試(shi)劑的(de)使(shi)用(yong)量，加入(ru)壹適(shi)當體(ti)積(ji)潔凈離(li)心管中，充分(fen)混(hun)勻，10000rpm離(li)心10s，向(xiang)設定的(de)N個(ge)PCR反(fan)應管中分(fen)別(bie)加入(ru)15μL熒光PCR反(fan)應液(ye)，向(xiang)每(mei)管中加入(ru)處(chu)理(li)後樣(yang)品(pin)或(huo)陰性(xing)對照(zhao)(NTC)和(he)陽(yang)性對照(zhao)(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時離(li)心10秒。
7.2 qPCR反(fan)應條件
將(jiang)各(ge)反(fan)應管放入(ru)定量(liang)PCR儀器的(de)反(fan)應槽內。
循(xun)環條(tiao)件:
1循(xun)環 50℃ for 2 min
預(yu)變(bian)性 1循(xun)環 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增(zeng) 40循(xun)環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延(yan)伸(shen)時收(shou)集(ji)熒光信(xin)號。報告(gao)基團(tuan)：設置為(wei)FAM。淬(cui)滅(mie)基團(tuan)：NONE，請(qing)勿選擇(ze)ROX參(can)比(bi)熒光。

胚胎肺(fei)成(cheng)纖維(wei)細胞(bao);WI-38三(san)醋酸(suan)甘(gan)油(you)酯(>98%,BR)Glycerol triacetate>98%,BR

PIEC細(xi)胞，豬(zhu)髖動(dong)脈(mai)內皮(pi)細(xi)胞 結(jie)腸癌細(xi)胞(bao),T84細(xi)胞 CM-H061腎(shen)小球(qiu)內皮(pi)細(xi)胞*培養(yang)基(ji)100mL鈉(na)(>98%,BR)Glycine  salt>98%,BR

大鼠胰(yi)島(dao)細胞(bao)瘤細(xi)胞(bao);INS-1乙(yi)醇(chun)酸(suan)(>98%,BR)Glycolic acid>98%,BR

RK1 Others Human  kA / RK1 細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 硬(ying)脂酸(suan)單(dan)甘油(you)酯(>98%,BR)GMS, glycerol monostearate>98%,BR

心(xin)肌細胞(bao)Many types of cells　5 ×105方(fang)(1ml)氯(lv)化金Gold (III) chloride tetrahydrateBC
結(jie)腸平滑(hua)肌細胞(bao)cDNAHCSMC cDNAAR,≥99.8% carbonate anhydrous

NCL-H460細(xi)胞，非小(xiao)細(xi)胞肺(fei)癌 肺(fei)動(dong)脈(mai)內皮(pi)細(xi)胞,HPAEC細(xi)胞 肝(gan)動(dong)脈(mai)平滑(hua)肌細胞(bao)Many types of cells　5 × 105方(fang)(1ml)D-果(guo)糖>99%,BRD-Fructose

犬(quan)腎細(xi)胞(bao);MDCK(NBL-2)核(he)黃素1酸(suan)鈉(na)水合(he)物核(he)黃素73.0 ~79.0%Riboflavin 5'-monophosphate  salt hydrate

TNFRSF10A Others Human  TNFRSF10A / CD261 / APO2 細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 溴化乙錠(ding)溶液(ye)，10 mg/ml>98%,BREB, Ethidium bromide stock solution, 10 mg/ml

CL-0231TE-1(食管癌細胞)5×106cells/瓶(ping)×2APMSF(進分(fen))進分(fen),sigma A6664p-APMSF,
腸道(dao)腺(xian)病(bing)毒(du)核(he)酸(suan)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)（熒光PCR法(fa)）RajiButt's瘤細(xi)胞(bao) Raji human Butt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS葡(pu)聚糖T7shēng huà shì jì容(rong)量：50毫(hao)克(ke)

FGF12 Protein Canine 重(zhong)組狗(gou) FGF12 蛋(dan)白(bai)4-肖(xiao)基(ji)-L-本(ben)炳安(an)醋 4-nitno-3-phqnyl-L-clcninq 949-99-2

AML-193(急性(xing)單(dan)核細(xi)胞白(bai)血(xue)病(bing)單核(he)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 神(shen)經細胞(bao)HN尿酸(suan)酶shēng huà shì jì容(rong)量：25克(ke)

腎(shen)小球(qiu)內皮(pi)細(xi)胞cDNAHRGEC cDNACOOMASSIEBRILLIANTBLUEG-250考(kao)馬斯(si)亮(liang)蘭G-250超(chao)級藍色至紅(hong)色結晶粉(fen)末RTsigma

IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹(xie)猴(hou) IFNGR / IFNGR1 細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 12027-06-4化(hua)銨;化(hua)铔AMMoniuM iodide