偽(wei)狂犬病病毒(du)核酸(suan)檢測試劑(ji)盒（熒(ying)光(guang)PCR法）

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 產品(pin)名(ming)稱：偽(wei)狂犬病病毒(du)核酸(suan)檢測試劑(ji)盒（熒(ying)光(guang)PCR法）
規(gui)格(ge)：50T
編號：BH-P96640
分類：熒(ying)光(guang)PCR法
儲存(cun)條件(jian)：-20℃避光(guang)保(bao)存(cun)，避免(mian)反復(fu)凍(dong)融。
運輸(shu)：低(di)溫(wen)、避光(guang)，快遞(di)免費送(song)貨上(shang)門(men)。

準(zhun)備物品(pin)：
清(qing)理(li)液(ye)（A）                                   毫升(sheng)
染色液(ye)（t B）                                   微升(sheng)
稀釋(shi)液(ye)（C）                                   毫升(sheng)
溶(rong)解液(ye)（tD）                                   毫升(sheng)
產品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)                                   1份(fen)
使(shi)用(yong)及(ji)效(xiao)果(guo)：
產品(pin)特(te)點(dian)：
◇高特(te)異(yi)性：與(yu)其(qi)他病毒(du)無(wu)交(jiao)叉(cha)反應(ying)，無(wu)非(fei)特(te)異(yi)性擴增；
◇高靈(ling)敏度：檢(jian)測(ce)靈敏度可(ke)達(da)10~100拷貝；
◇操(cao)作簡便(bian)：該系列所有試(shi)劑均采用(yong)相(xiang)同的(de)體(ti)系和(he)條件(jian)，可(ke)同時(shi)進行(xing)多(duo)個(ge)檢(jian)測；
◇高通(tong)量：多種(zhong)雙(shuang)重PCR檢測(ce)以(yi)及(ji)三(san)重(zhong)PCR檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒。

PCR反應(ying)特(te)點(dian)
(1) 特(te)異(yi)性強
PCR反應(ying)的特(te)異(yi)性決(jue)定因(yin)素為：
①引(yin)物與模板(ban)DNA特(te)異(yi)正(zheng)確的(de)結合(he)；
②堿基配對(dui)原(yuan)則；
③Taq DNA聚合(he)酶合(he)成反(fan)應(ying)的忠(zhong)實性；
④靶基因的(de)特(te)異(yi)性與(yu)保(bao)守性。
其中引(yin)物與模板(ban)的正(zheng)確結(jie)合(he)是(shi)關(guan)鍵(jian)。引(yin)物與模板(ban)的結(jie)合(he)及(ji)引(yin)物鏈的(de)延(yan)伸是(shi)遵(zun)循(xun)堿基配對(dui)原(yuan)則的。聚合(he)酶合(he)成反(fan)應(ying)的忠(zhong)實性及(ji)Taq DNA聚合(he)酶耐(nai)高(gao)溫(wen)性，使(shi)反(fan)應(ying)中模板(ban)與引(yin)物的結(jie)合(he)(復(fu)性)可(ke)以在(zai)較(jiao)高(gao)的溫(wen)度下(xia)進(jin)行，結(jie)合(he)的特(te)異(yi)性大大增加(jia)，被(bei)擴增的(de)靶(ba)基因片(pian)段(duan)也(ye)就能保(bao)持很高的正(zheng)確度。再(zai)通(tong)過選擇特(te)異(yi)性和(he)保(bao)守性高(gao)的(de)靶基因區(qu)，其特(te)異(yi)性程(cheng)度就更(geng)高(gao)。
(2) 靈敏度高(gao)
PCR產物(wu)的(de)生(sheng)成量(liang)是(shi)以(yi)指數方(fang)式增加(jia)的(de)，能將(jiang)皮(pi)克(ke)(pg=10-12g)量級的起始(shi)待測模板(ban)擴增到微克(ke)(ug=10-6g)水平(ping)。能從(cong)100萬(wan)個(ge)細胞中檢出(chu)壹個(ge)靶(ba)細胞；在(zai)病毒(du)的檢(jian)測中，PCR的靈(ling)敏度可(ke)達(da)3個(ge)RFU(空斑形成單(dan)位)；在(zai)細菌學(xue)中zui小(xiao)檢(jian)出率(lv)為(wei)3個(ge)細菌。
(3) 簡便(bian)、快(kuai)速(su)
PCR反應(ying)用耐(nai)高溫(wen)的Taq DNA聚合(he)酶，壹次(ci)性地(di)將(jiang)反應(ying)液(ye)加好後(hou)，即(ji)在(zai)DNA擴增液(ye)和(he)水浴(yu)鍋(guo)上(shang)進(jin)行變性-退火-延(yan)伸反(fan)應(ying)，壹般(ban)在(zai)2～4 小(xiao)時(shi)完成擴增反(fan)應(ying)。擴增產(chan)物(wu)壹般(ban)用(yong)電泳(yong)分析，不壹定(ding)要(yao)用(yong)同位(wei)素，無(wu)放(fang)射(she)性汙(wu)染(ran)、易(yi)推廣(guang)。
(4) 對標本的(de)純(chun)度要(yao)求(qiu)低(di)
不需(xu)要(yao)分(fen)離(li)病毒(du)或(huo)細菌及(ji)培(pei)養(yang)細胞，DNA 粗制品(pin)及(ji)總(zong)RNA均可(ke)作為擴增模板(ban)。可(ke)直接用臨床(chuang)標本如(ru)血(xue)液(ye)、體(ti)腔液(ye)、洗(xi)嗽(sou)液(ye)、毛發(fa)、細胞、活(huo)PCR技術概論(lun)。

檢測(ce)步驟(zhou)：
壹、 試劑(ji)的(de)準(zhun)備
從試(shi)劑(ji)盒(he)中取出(chu)熒(ying)光(guang)PCR反應(ying)液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶混合(he)物(Enzymes MIX)，冰上(shang)融化(hua)並(bing)振蕩(dang)混勻後(hou)，10000rpm離(li)心10s。
設所需(xu)要(yao)的(de)PCR反應(ying)管(guan)管(guan)數為N(N=樣(yang)本數+1管(guan)陰性對(dui)照(zhao)+1管(guan)陽性對(dui)照(zhao))，每個(ge)測(ce)試反應(ying)體(ti)系配制如下(xia)表：
試劑(ji) 每個(ge)反(fan)應(ying)加入(ru)的(de)量 N個(ge)反(fan)應(ying)加入(ru)的(de)量
熒(ying)光(guang)PCR反應(ying)液(ye) 14µL N×14µL
酶混合(he)物 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計算(suan)好(hao)各(ge)試劑的(de)使(shi)用(yong)量，加(jia)入(ru)壹適當(dang)體(ti)積潔(jie)凈(jing)離(li)心管(guan)中，充(chong)分混勻，10000rpm離(li)心10s，向設定的(de)N個(ge)PCR反應(ying)管(guan)中分別加(jia)入(ru)15μL熒(ying)光(guang)PCR反應(ying)液(ye)，向每管(guan)中加入(ru)處(chu)理(li)後(hou)樣(yang)品(pin)或(huo)陰性對(dui)照(zhao)(NTC)和(he)陽性對(dui)照(zhao)(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shi)離(li)心10秒(miao)。
7.2 qPCR反應(ying)條件(jian)
將各(ge)反(fan)應(ying)管(guan)放入(ru)定(ding)量PCR儀器(qi)的反(fan)應(ying)槽內(nei)。
循(xun)環條(tiao)件(jian):
1循(xun)環 50℃ for 2 min
預(yu)變性 1循(xun)環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循(xun)環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延(yan)伸時(shi)收(shou)集(ji)熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)。報(bao)告(gao)基團(tuan)：設置為(wei)FAM。淬滅(mie)基團(tuan)：NONE，請(qing)勿選(xuan)擇ROX參比(bi)熒(ying)光(guang)。

小(xiao)腦顆(ke)粒(li)細胞cDNAHCGC cDNA硫酸(suan)四(si)水(shui)化(hua)合(he)物Spectinomycin sulfate tetrahydrate美國進口(kou)

CDH1 Others Mouse 小(xiao)鼠 CDH1 / E-cad / CD324 細胞裂解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao)) 坦(tan)索羅(luo)辛(xin)tamsulosin美國進口(kou)

Ana-1 小(xiao)鼠巨(ju)噬(shi)細胞(S)-坦(tan)索羅(luo)辛(xin)鹽酸(suan)鹽(S)-Tamsulosin 美國進口(kou)

CL-0198RM-1(小(xiao)鼠前列(lie)腺癌細胞)5×106cells/瓶×2-d3Telmisartan-d3美國進口(kou)

mRTEC, 小(xiao)鼠腎小(xiao)管(guan)上(shang)皮(pi)細胞酰基-β-D-葡萄(tao)糖苷酸(suan)-d3Telmisartan-d3 Acyl-β-D-glucuronide美國進口(kou)
Hepa 1-6, 小(xiao)鼠肝癌細胞 腎癌細胞,RCC-krause細胞 SK-HEP-1(肝癌細胞)1酸氫(qing)鈣（）UV法含量測定Calcium hydrogenphosphate dihydrate

小(xiao)鼠紅(hong)白血(xue)病細胞;MEL （）含量測定Sulfamethazine

MMP9 Others Human  MMP-9 / CLG4B 細胞裂解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao)) （）HPLC法含量測定Sulfaguanidine

敘(xu)利(li)亞倉(cang)鼠腎細胞;BHK-21（）含量測定Fenbufen

HA Others Influenza B 乙型(xing)流感(gan) (B/Brisbane/60/2008) 血凝(ning)素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao)) 氯磺(huang)隆>93%,BRChlorosulfuron
偽(wei)狂犬病病毒(du)核酸(suan)檢測試劑(ji)盒（熒(ying)光(guang)PCR法）NHEK.f-c 正(zheng)常表皮(pi)角質形成細胞(NHEK)少年(nian)，單(dan)壹來(lai)源(yuan) 500,000cells 原(yuan)代(dai)神(shen)經(jing)膠質(zhi)細胞特(te)制(zhi)無(wu)血(xue)清(qing)添加(jia)劑(ji)Many types of cells　1mlDIPEAN，N-二異基10克(ke)CP

海馬趾神(shen)經(jing)細胞cDNAHN-h cDNA2′-脫氧胸苷-5′-... Thymidine 5′-triphosphate  salt... 18423-43-3 100MG 通(tong)用試劑(ji)

PRKAR1A Others Human  PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 細胞裂解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao)) 六基二矽迷(mi);六基氧二矽烷(wan);六基二矽氧烷 HqxcMqthyldisiloxcnq;HMDSO

T739小(xiao)鼠肺(fei)腺癌瘤株;LA795CITRICACID,AMMONIUMSALT,DIBASIC檸檬(meng)酸(suan)氫(qing)二超級白色精(jing)細顆粒(li)粉末(mo)RTsigma

HCCC-9810細胞，肝(gan)癌亞力山(shan)大細胞 APP-PS1(C410Y)雙(shuang)基因轉染細胞株(zhu),7WCY1.0細胞 中國倉(cang)鼠卵巢細胞(亞系克(ke)隆);CHO-HCV-E2589-18-4對甲基4-metxylbenzyl alcohol