巴(ba)戟(ji)天(tian)PCR鑒(jian)定試(shi)劑盒*

特(te)點(dian)：
1. 即開即用，用戶(hu)只需要(yao)提(ti)供病(bing)毒樣(yang)品(pin)。
2. 根(gen)據(ju)地(di)黃保(bao)守序(xu)列(lie)設計(ji)的專壹性引物，與相(xiang)關病(bing)毒無(wu)交叉反應(ying)。
3. 靈敏度(du)可(ke)以達(da)到(dao)幾(ji)百(bai)拷貝(bei)/反(fan)應(ying)。
4. 壹管式熒光(guang)定量 PCR 檢(jian)測(ce)，避(bi)免後(hou)續(xu)汙(wu)染(ran)。
5. 本試(shi)劑盒足夠(gou) 50 次(ci) 20μL 反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)的(de)熒光(guang)定量 PCR。
6. 本產(chan)品(pin)只適(shi)用(yong)於(yu)科研，不(bu)能(neng)用於(yu)臨床(chuang)診斷(duan)。

使用(yong)方(fang)法：
壹、樣(yang)品(pin)采(cai)集(ji)：
1、食(shi)品(pin)樣品(pin)：樣品(pin)的采(cai)集(ji)與預(yu)培養按照(zhao)樣品(pin)的采(cai)集(ji)與預(yu)培養按照(zhao)《食品(pin)衛生(sheng)微生(sheng)物學檢(jian)驗(yan)阪(ban)崎(qi)腸(chang)桿菌檢(jian)驗(yan)要求(qiu)進(jin)行。
2、血液樣(yang)品(pin)：用無(wu)菌(jun)註(zhu)射器(qi)抽取受(shou)檢(jian)者靜脈血2mL，註(zhu)入無(wu)菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬酸鈉)抗(kang)凝管，立(li)即混(hun)勻(yun)。
3、糞(fen)便樣(yang)品(pin)：取糞(fen)便置(zhi)於(yu)滅(mie)菌(jun)的收(shou)集(ji)管中送檢(jian)。
4、病(bing)竈部(bu)位樣(yang)品(pin)：取發病(bing)部(bu)位新(xin)鮮(xian)滲出(chu)物、粘液膿血送(song)檢(jian)。
壹、稀(xi)釋(shi) PCR 陽(yang)性對(dui)照(zhao)（以 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這(zhe) 6 個 10 倍(bei)稀(xi)釋度(du)為(wei)例）
1. 註(zhu)意(yi)：由於(yu)標準(zhun)品(pin)濃度(du)非(fei)常高，因此(ci)下(xia)列(lie)稀釋(shi)操作(zuo)壹定要(yao)在獨(du)立(li)的(de)區域(yu)進(jin)行，千萬(wan)不能(neng)汙染(ran)樣(yang)品(pin)或本試(shi)劑盒的其他(ta)成(cheng)分）。為(wei)增加(jia)產品(pin)穩定性和(he)避(bi)免擴(kuo)散(san)傳染(ran)性病(bing)原，本產(chan)品(pin)不提(ti)供活體樣品(pin)做陽(yang)性對(dui)照(zhao)，只提(ti)供可以直接(jie)使用(yong)的(de) DNA段作(zuo)為陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
2. 標(biao)記(ji) 6 個離(li)心管，分別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯槍頭(tou)分別加(jia)入 45 μL 熒光(guang) PCR 模(mo)板稀釋(shi)液（用(yong)帶(dai)芯槍頭(tou)，下同(tong)）。
4. 在 7 號(hao)管中加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待用。
5. 換槍頭(tou)，在 6 號(hao)管中加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)(上步稀釋所得)，充(chong)分(fen)震蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待用。
6. 換槍頭(tou)，在 5 號(hao)管中加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)到(dao) 5 號(hao)管中，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待用。
7. 重復上面的操(cao)作(zuo)直到(dao)得到(dao) 6 個稀(xi)釋(shi)度(du)的(de)陽性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待用。
註(zhu)：上述(shu)樣品(pin)建議經過(guo)增(zeng)菌(jun)後(hou)，收(shou)集(ji)培養物用於(yu)檢測(ce)。 
二(er)、DNA提(ti)取：
可(ke)采(cai)用(yong)PCR試(shi)劑盒配(pei)備的(de)DNA抽(chou)提(ti)液，按以下說明(ming)進(jin)行DNA核(he)酸的粗(cu)提(ti)。也(ye)可采(cai)購(gou)上海澤葉生(sheng)物科技(ji)有(you)限(xian)公(gong)司生(sheng)產的(de)DNA提(ti)取試劑盒(過(guo)柱(zhu)法(fa)-熒光(guang)配(pei)套)或(huo)其他(ta)合(he)適(shi)的商業化產(chan)品(pin)，並按照(zhao)相(xiang)應(ying)試(shi)劑盒說明(ming)進(jin)行操作(zuo)。
1、液體(ti)培養物：取液體(ti)培養物100μL加(jia)到(dao)1.5mL無(wu)菌(jun)離(li)心管中，8000rpm離(li)心3min，盡量吸(xi)棄上清，加(jia)入50μL DNA抽(chou)提(ti)液充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
2、固(gu)體(ti)培養物：挑取(qu)單克隆菌落與50μL DNA抽(chou)提(ti)液充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
3、糞(fen)便樣(yang)品(pin)：挑取(qu)米(mi)粒(li)大小糞(fen)便於(yu)滅(mie)菌(jun)離(li)心管中，加(jia)入0.5mL生(sheng)理鹽(yan)水，振(zhen)蕩混(hun)勻(yun)，13000rpm離(li)心3分(fen)鐘(zhong)，棄上清，沈澱中加(jia)入50μL DNA抽(chou)提(ti)液充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
4、其他(ta)液體(ti)標(biao)本：取(qu)標本2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄上清，沈澱中加(jia)入50μL DNA抽(chou)提(ti)液充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
註(zhu)：陽(yang)性對(dui)照(zhao)和(he)陰(yin)性對(dui)照(zhao)為已經抽提(ti)好(hao)的(de)核酸(無(wu)需提(ti)取)，直接(jie)取5μL加(jia)入到(dao)反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)中即可。由於(yu)陽性對(dui)照(zhao)濃度(du)較高，建議在樣品(pin)制備區(qu)域(yu)加(jia)入陽(yang)性對(dui)照(zhao)。 
實(shi)驗流(liu)程(cheng)：
1. 整個檢(jian)測(ce)過(guo)程(cheng)應(ying)嚴(yan)格(ge)按照(zhao)本說明(ming)書(shu)要(yao)求(qiu)分(fen)別在試劑準(zhun)備(bei)區、樣(yang)本處理區(qu)和(he)PCR擴(kuo)增(zeng)區進(jin)行操作(zuo)，各(ge)區實(shi)驗服(fu)、儀(yi)器 、耗材(cai)應(ying)獨(du)立(li)使用(yong)，不(bu)能(neng)混(hun)用(yong)；實(shi)驗用(yong)吸(xi)頭(tou)采(cai)用(yong)帶(dai)濾(lv)芯吸頭(tou)；樣本處理區(qu)應(ying)配(pei)有(you)生(sheng)物安全(quan)櫃(gui)，樣本處理在生(sheng)物安全(quan)櫃(gui)中進(jin)行操作(zuo)；三個區(qu)應(ying)該(gai)配(pei)有(you)紫(zi)外線殺(sha)菌(jun)裝置(zhi)。
2. 為(wei)避(bi)免RNA降解，樣本處理過(guo)程(cheng)應(ying)在0-4℃條(tiao)件(jian)下操(cao)作(zuo)，且完成(cheng)實(shi)驗後(hou)立(li)即上機(ji)檢測(ce)；樣(yang)本處理過(guo)程(cheng)中使用(yong)的(de)器具(ju)耗材(cai)應(ying)經過(guo)無(wu)核(he)酶(mei)處理。
3. 每次實(shi)驗應(ying)該(gai)設置(zhi)陰(yin)、陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
4. 試(shi)劑盒所有(you)試(shi)劑在使用(yong)前應(ying)該(gai)在常溫下(xia)充(chong)分融化(hua)混(hun)勻(yun)，並應(ying)瞬(shun)時(shi)離(li)心。
5. 試(shi)劑盒內所配(pei)陰(yin)性和(he)陽性對(dui)照(zhao)在壹次(ci)使用(yong)前應(ying)全(quan)部(bu)轉移至標本準(zhun)備區，並單獨(du)存(cun)放(fang)。
6. 為(wei)防(fang)止熒光(guang)幹(gan)擾，應(ying)避(bi)免裸(luo)手(shou)直接(jie)接(jie)觸PCR反(fan)應(ying)管，並應(ying)避(bi)免在PCR反(fan)應(ying)管上進(jin)行任何標記(ji)。
7. 儀(yi)器 擴(kuo)增(zeng)相(xiang)關參(can)數(shu)應(ying)按照(zhao)本說明(ming)書(shu)相(xiang)關要(yao)求(qiu)進(jin)行設置(zhi)；不同(tong)批(pi)號試(shi)劑不(bu)能(neng)混(hun)用(yong)。
8. ABI系(xi)列(lie)熒光(guang)定量PCR儀(yi)參數(shu)設置(zhi)中不選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng)，淬滅(mie)基(ji)因選(xuan)擇(ze)None。
9. 實(shi)驗過(guo)程(cheng)中產品(pin)的廢棄物應(ying)該(gai)進(jin)行無(wu)害(hai)化處理後(hou)方可(ke)丟棄。
儲存(cun)條(tiao)件(jian)：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品(pin)收(shou)集(ji)、處理及保存(cun)方法(fa)
1. 血清(qing)：使用(yong)不(bu)含(han)熱(re)原和(he)內毒素(su)的試(shi)管，操作(zuo)過(guo)程(cheng)中避(bi)免任(ren)何細(xi)胞刺激，收(shou)集(ji)血液後(hou)，3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)將血清(qing)和(he)紅(hong)細(xi)胞迅速小心地(di)分離(li)。
2. 血漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬酸鹽(yan)或肝(gan)素抗(kang)凝。3000 轉離(li)心30 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上清。
3. 細(xi)胞上清液：3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆(ke)粒(li)和(he)聚合(he)物。
4. 組織勻漿(jiang)：將組織加(jia)入適(shi)量生(sheng)理鹽(yan)水搗(dao)碎(sui)。3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上清。
5. 保(bao)存(cun)：如(ru)果樣(yang)本收(shou)集(ji)後(hou)不及時(shi)檢(jian)測(ce)，請按壹次(ci)用(yong)量分(fen)裝，凍(dong)存於(yu)-20℃，避(bi)免反(fan)復(fu)凍(dong)融，在室溫下(xia)解(jie)凍(dong)並確保(bao)樣(yang)品(pin)均(jun)勻地(di)充分解(jie)凍(dong)。
XCL1 Protein Mouse 重組小鼠 XCL1 蛋白(bai) (His 標(biao)簽(qian))羅(luo)漢(han)樹脂(zhi)酚(fen)-4'-O-β-龍(long)膽二(er)糖苷(gan)(標(biao)準(zhun)品(pin))Matairesil 4'-O-β-gentiobioside質(zhi)量規格：HPLC≥98%,標(biao)準(zhun)品(pin)

RBE(人(ren)膽管癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 小鼠 IFNA5 / IFNaG 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 石(shi)蕊Litmus質(zhi)量規格：AR

人(ren)小細(xi)胞肺癌(ai)細(xi)胞;NCI-H2097-O-甲基蘆薈新(xin)甙(dai)A(標(biao)準(zhun)品(pin))7-O-Methylaloeresin A質(zhi)量規格：HPLC≥98%,標(biao)準(zhun)品(pin)

PTGFRN Others Cymolgus 食(shi)蟹(xie)猴 EWI-F / PTGFRN 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 肉(rou)蓯(cong)蓉(rong)苷(gan)A(標(biao)準(zhun)品(pin))Cistaside A質(zhi)量規格：HPLC≥98%,標(biao)準(zhun)品(pin)

CL-0449SW 780(人(ren)膀胱移行細(xi)胞癌)5×106cells/瓶(ping)×2蘆(lu)薈(hui)新(xin)甙(dai)D(標(biao)準(zhun)品(pin))Aloeresin D質(zhi)量規格：HPLC≥98%,標(biao)準(zhun)品(pin)
C127 小鼠細(xi)胞 102(>97.0%(HPLC)(N))質(zhi)量規格：>97.0%(HPLC)(N)Coumarin 102

FCGR3A Others Human 人(ren) CD16a / FCGR3A 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao))  314(>98.0%(HPLC)(N))質(zhi)量規格：>98.0%(HPLC)(N)Coumarin 314

大鼠腎上腺嗜(shi)鉻(ge)細(xi)胞瘤細(xi)胞(高分化);PC-12(高分化)異(yi)環1酰(xian)胺質(zhi)量規格：>99%,USP,BR,可(ke)用(yong)於(yu)細(xi)胞培養Ifosfamide

IL10RB Others Mouse 小鼠 IL10RB / IL10R2 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 異(yi)環1酰(xian)胺（標(biao)準品(pin)）質量規格：HPLC>98%,標(biao)準(zhun)品(pin)Ifosfamide

KYSE450 食(shi)管癌質量規格：>99%,EP6.8Pramipexole 2HCL mohydrate
hMSC-BM Pellet 人(ren)類骨(gu)髓(sui)間(jian)質幹細(xi)胞團塊 > 1 mio.cells 人(ren)肺微(wei)血管內皮細(xi)胞總RNAHPMEC NA匹(pi)格(ge)列(lie)酮（標(biao)準品(pin)）質量規格：HPLC>98%,標(biao)準(zhun)品(pin)Pioglitazone base

CM-M118小鼠虹膜(mo)色素(su)上皮細(xi)胞*培養基(ji)100mL匹(pi)格(ge)列(lie)酮鹽(yan)酸鹽(yan)質量規格：>98.5%Pioglitazone HCl

IL3RA Others Canine 狗(gou) IL3RA 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 滅(mie)菌(jun)丹標(biao)準溶(rong)液(10μg/ml,u=6%)質(zhi)量規格：10μg/ml,u=6%N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution

間(jian)充質幹(gan)細(xi)胞培養基(ji)MSCM-sf-prf惡(e)草(cao)酮(分(fen)析(xi)標準(zhun)品(pin),97.5%)質(zhi)量規格：分析(xi)標準(zhun)品(pin),97.5%Oxadiazon

SW480[SW-480]細(xi)胞，人(ren)結腸(chang)癌細(xi)胞 人(ren)胚腎(shen)上皮包裝細(xi)胞,GP2-293Luc細(xi)胞 原(yuan)代(dai)上皮細(xi)胞培養特(te)制添加(jia)劑Many types of cells包(bao)裝：5/2.5/1ml甲基嘧(mi)啶(ding)1(10μg/ml,u=3%)質(zhi)量規格：10μg/ml,u=3%Pirimiphos-methyl solution
巴(ba)戟(ji)天(tian)PCR鑒(jian)定試(shi)劑盒*水(shui)牛(niu)皮膚(fu)成(cheng)纖維(wei)樣細(xi)胞;WB-S3白(bai)術內酯Ⅰ（標(biao)準品(pin)）質量規格：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)Atractylelide I

人(ren)腎皮(pi)質(zhi)上皮細(xi)胞(HRCEpiC)( 5×105 )白(bai)術內酯III（標(biao)準(zhun)品(pin)）質量規格：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)Atractylelide III

CL-0195RH-35(大鼠肝癌細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2白(bai)頭(tou)翁皂苷(gan)B4（標(biao)準(zhun)品(pin)）質量規格：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)Anemoside B4

人(ren)食管癌細(xi)胞;EC109 大鼠腦成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞*培養基(ji) 100mL百(bai)秋(qiu)李醇質(zhi)量規格：TLC≥98