豬勞(lao)森(sen)氏(shi)胞(bao)內(nei)菌（LI）核(he)酸檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

訂購(gou)信息：
 產品(pin)名(ming)稱(cheng)：豬勞森(sen)氏(shi)胞(bao)內(nei)菌(LI)核(he)酸檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒
規格：50T
編號：BH-P96767
分類(lei)：熒光PCR法
儲存條(tiao)件：-20℃避光(guang)保存，避免(mian)反(fan)復凍融。
運(yun)輸：低溫(wen)、避光(guang)，快遞(di)免(mian)費(fei)送貨上門(men)。
產品(pin)特點：
◇高特異(yi)性(xing)：與其(qi)他病(bing)毒(du)無(wu)交叉反(fan)應(ying)，無非特異(yi)性(xing)擴增；
◇高靈敏度：檢測(ce)靈(ling)敏度可達(da)10~100拷貝(bei)；
◇操作簡便：該(gai)系(xi)列所(suo)有試劑(ji)均(jun)采(cai)用相(xiang)同(tong)的(de)體(ti)系(xi)和條(tiao)件，可同時進行(xing)多個(ge)檢測(ce)；
◇高通(tong)量(liang)：多種雙(shuang)重PCR檢測(ce)以(yi)及(ji)三(san)重PCR檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒。

準備(bei)物(wu)品(pin)：
清理(li)液(ye)（A）                                   毫(hao)升(sheng)
染色液(ye)（t B）                                   微升(sheng)
稀釋(shi)液(ye)（C）                                   毫(hao)升(sheng)
溶解(jie)液(ye)（tD）                                   毫(hao)升(sheng)
產品(pin)說明書(shu)                                   1份(fen)
使用(yong)及(ji)效果(guo)：
PCR反(fan)應(ying)特點
(1) 特異(yi)性(xing)強
PCR反(fan)應(ying)的(de)特異(yi)性(xing)決(jue)定(ding)因素(su)為(wei)：
①引物(wu)與(yu)模板(ban)DNA特異(yi)正確(que)的(de)結合(he)；
②堿基配(pei)對(dui)原則；
③Taq DNA聚合(he)酶(mei)合(he)成反(fan)應(ying)的(de)忠(zhong)實(shi)性；
④靶基因(yin)的(de)特異(yi)性(xing)與保守性(xing)。
其(qi)中(zhong)引(yin)物(wu)與(yu)模板(ban)的(de)正確(que)結合(he)是關鍵(jian)。引物(wu)與(yu)模板(ban)的(de)結合(he)及(ji)引(yin)物(wu)鏈(lian)的(de)延(yan)伸(shen)是遵循堿基配(pei)對(dui)原則的(de)。聚(ju)合(he)酶(mei)合(he)成反(fan)應(ying)的(de)忠(zhong)實(shi)性及(ji)Taq DNA聚合(he)酶(mei)耐(nai)高溫(wen)性，使反(fan)應(ying)中(zhong)模板(ban)與(yu)引(yin)物(wu)的(de)結合(he)(復性)可以在較(jiao)高(gao)的(de)溫(wen)度下(xia)進行(xing)，結合(he)的(de)特異(yi)性(xing)大(da)大(da)增加(jia)，被擴(kuo)增的(de)靶(ba)基因(yin)片段(duan)也(ye)就(jiu)能保持很高(gao)的(de)正確(que)度。再通(tong)過選擇(ze)特異(yi)性(xing)和保守性(xing)高(gao)的(de)靶(ba)基因(yin)區(qu)，其(qi)特異(yi)性(xing)程度(du)就(jiu)更(geng)高(gao)。
(2) 靈敏度高(gao)
PCR產物(wu)的(de)生成量(liang)是以(yi)指數方(fang)式增加(jia)的(de)，能將(jiang)皮克(pg=10-12g)量(liang)級(ji)的(de)起(qi)始待(dai)測(ce)模板(ban)擴(kuo)增到微(wei)克(ug=10-6g)水平。能從(cong)100萬個(ge)細(xi)胞(bao)中(zhong)檢出(chu)壹個(ge)靶(ba)細(xi)胞(bao)；在(zai)病(bing)毒(du)的(de)檢測(ce)中(zhong)，PCR的(de)靈(ling)敏度可達(da)3個(ge)RFU(空(kong)斑形(xing)成單(dan)位)；在細(xi)菌學中(zhong)zui小檢出(chu)率為(wei)3個(ge)細(xi)菌。
(3) 簡便、快速(su)
PCR反(fan)應(ying)用耐(nai)高溫(wen)的(de)Taq DNA聚合(he)酶(mei)，壹次(ci)性地將(jiang)反(fan)應(ying)液(ye)加(jia)好後，即在DNA擴增液(ye)和(he)水浴鍋(guo)上進(jin)行(xing)變(bian)性-退(tui)火(huo)-延(yan)伸(shen)反(fan)應(ying)，壹般在2～4 小時完成擴增反(fan)應(ying)。擴增產(chan)物(wu)壹(yi)般(ban)用(yong)電(dian)泳(yong)分(fen)析(xi)，不壹(yi)定(ding)要用(yong)同(tong)位素(su)，無放射性汙(wu)染、易(yi)推(tui)廣(guang)。
(4) 對(dui)標(biao)本的(de)純(chun)度要求(qiu)低
不需(xu)要分(fen)離(li)病(bing)毒(du)或細(xi)菌及(ji)培(pei)養細(xi)胞(bao)，DNA 粗制(zhi)品(pin)及(ji)總(zong)RNA均(jun)可作為(wei)擴增模板(ban)。可直(zhi)接(jie)用臨(lin)床標本(ben)如(ru)血(xue)液(ye)、體(ti)腔液(ye)、洗(xi)嗽(sou)液(ye)、毛(mao)發、細(xi)胞(bao)、活(huo)PCR技術概論(lun)。
PC-12細(xi)胞(bao)，大(da)鼠腎上腺(xian)嗜(shi)鉻(ge)細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)(高分化) HT-29(結腸癌(ai)細(xi)胞(bao)) 內(nei)膜腺(xian)癌細(xi)胞(bao);HEC-1-B洛(luo)匹那(na)韋(wei)（）LopinavirHPLC>98%,

CXCL12 Protein Human 重組 CXCL12 / SDF1b 蛋白 (Fc 標簽)Loratadine>99%

SVEC4-10(小鼠結內(nei)皮細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照(zhao)) ()Loratadine>99%,

心(xin)肌(ji)細(xi)胞(bao)HCM褪(tui)素(su),果(guo)體(ti)素(su)Melatonine>99%,BR

A2M Others Human  A2M / CPAMD5 / Alpha-2-macroglobulin 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照(zhao)) 褪(tui)素(su),果(guo)體(ti)素(su)（）MelatonineHPLC>98%,
hPC-PL-c 類(lei)胎盤(pan)周(zhou)細(xi)胞(bao)(hPC-PL) 500,000cells 小鼠巨噬細(xi)胞(bao)MMa度> 98.5%,BR,二水合(he)物(wu)Balofloxacin Dihydrate

CL-0454TE-11(食(shi)管(guan)癌(ai)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2鹽酸苯達(da)莫司(si)汀度> 98%Bendamustine HCl

HA Others H7N9 甲型流(liu)感(gan) H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血(xue)凝(ning)素(su) (Hemagglutinin / HA) 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照(zhao)) 鹽酸苯達(da)莫司(si)汀（）HPLC>98%,Bendamustine HCl

膀(pang)胱(guang)平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao)RNAHBdSMC miRNA5 μg澳洲茄邊堿（）HPLC≥95%,Solamargine

兔眼Tenon's囊成纖維(wei)細(xi)胞(bao);RYTF 肝(gan)癌(ai)細(xi)胞(bao)，Hep 3B2.1-7細(xi)胞(bao) IR983F細(xi)胞(bao)，大(da)鼠骨髓瘤細(xi)胞(bao)澳(ao)洲茄(qie)堿（）HPLC≥94.50%,Solasonine
豬勞森(sen)氏(shi)胞(bao)內(nei)菌(LI)核(he)酸檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒永生化表皮細(xi)胞(bao);HaCaT1-氨(an)基-2-萘酚(fen)-4-磺酸AR1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic Acid

ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照(zhao)) 利卡西(xi)平；10,11-二氫(qing)-10-羥基>98%,美(mei)國(guo)進口(kou)原裝(zhuang)10,11-Dihydro-10-hydroxy Carbamazepine

非洲(zhou)綠(lv)猴(hou)腎細(xi)胞(bao)系(xi)/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B三七(qi)皂(zao)苷R2(S型)()HPLC≥90%，S-Notoginsenoside R2

LS174T細(xi)胞(bao)，結腸癌(ai)細(xi)胞(bao) 色素(su)瘤細(xi)胞(bao),SK37細(xi)胞(bao) 成骨肉(rou)瘤細(xi)胞(bao);Saos-2無水醋(cu)酸鋅ARZinc acetate

HCT 116(結腸癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×25-氟吲哚(duo)-2-羧(suo)酸>98%,*5-Fluoroindole-2-carboxylic acid
檢測(ce)步(bu)驟(zhou)：
壹、 試劑(ji)的(de)準(zhun)備(bei)
從試劑(ji)盒中(zhong)取出(chu)熒光(guang)PCR反(fan)應(ying)液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混(hun)合(he)物(wu)(Enzymes MIX)，冰上融化並(bing)振(zhen)蕩混(hun)勻後，10000rpm離心(xin)10s。
設所(suo)需(xu)要的(de)PCR反(fan)應(ying)管管數為(wei)N(N=樣本數+1管陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)+1管陽性對(dui)照(zhao))，每個(ge)測(ce)試(shi)反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)配(pei)制(zhi)如(ru)下表：
試劑(ji) 每個(ge)反(fan)應(ying)加(jia)入(ru)的(de)量(liang) N個(ge)反(fan)應(ying)加(jia)入(ru)的(de)量(liang)
熒光PCR反(fan)應(ying)液(ye) 14µL N×14µL
酶(mei)混(hun)合(he)物(wu) 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計算好各(ge)試劑(ji)的(de)使用(yong)量(liang)，加(jia)入(ru)壹(yi)適(shi)當體(ti)積潔(jie)凈(jing)離心(xin)管中(zhong)，充(chong)分(fen)混(hun)勻，10000rpm離心(xin)10s，向(xiang)設定(ding)的(de)N個(ge)PCR反(fan)應(ying)管中(zhong)分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)15μL熒光PCR反(fan)應(ying)液(ye)，向(xiang)每管中(zhong)加(jia)入(ru)處理(li)後樣品(pin)或陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)(NTC)和陽性對(dui)照(zhao)(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心(xin)10秒(miao)。
7.2 qPCR反(fan)應(ying)條(tiao)件
將(jiang)各反(fan)應(ying)管放入(ru)定(ding)量(liang)PCR儀器(qi)的(de)反(fan)應(ying)槽內(nei)。
循環條(tiao)件:
1循環 50℃ for 2 min
預(yu)變(bian)性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延(yan)伸(shen)時收集(ji)熒(ying)光信號。報(bao)告基團(tuan)：設置為(wei)FAM。淬(cui)滅(mie)基團(tuan)：NONE，請勿選擇ROX參比熒(ying)光(guang)。