SKG-M細(xi)胞

公(gong)司產品(pin)僅供科研研究使用(yong)、不得(de)用(yong)於(yu)臨床診(zhen)斷(duan)！

壹、商品(pin)介(jie)紹：

1、細胞傳(chuan)代：

1）細(xi)胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的培養液，用(yong) PBS 清洗(xi)細(xi)胞壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加入(ru) 5ml 培養

液終止消(xiao)化(hua)，再(zai)輕輕吹打(da)細胞使之(zhi)脫落，然(ran)後將懸液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上清，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培養基重(zhong)懸，然後按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行(xing)分瓶(ping)傳(chuan)代，最(zui)後放入(ru) 37℃，5%CO2細胞培(pei)養箱中(zhong)培養；

2、細胞凍(dong)存：

1）細(xi)胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的培養液，用(yong) PBS 清洗(xi)細(xi)胞壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加入(ru)培養液終

止消(xiao)化(hua)，輕輕吹打(da)細胞使之(zhi)脫落，然(ran)後將懸液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，並(bing)放(fang)置(zhi)於(yu)凍存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細(xi)胞凍(dong)存管(guan)放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜，24h 後轉入(ru)液氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長期(qi)保(bao)存。使用(yong)程(cheng)序降(jiang)溫(wen)盒可直接放入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞培(pei)養操作

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以下細(xi)胞培(pei)養凍存(cun)處(chu)理(li)僅供參考，具體(ti)操(cao)作步(bu)驟以隨貨(huo)產品(pin)說(shuo)明書為(wei)主(zhu)。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞懸液的(de)凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水浴(yu)中(zhong)迅(xun)速搖(yao)晃(huang)解凍，加(jia)4 mL培養基混合(he)均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件(jian)下離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基後吹勻(yun)。然後將所(suo)有(you)細(xi)胞懸液加(jia)入(ru)含適(shi)量培養基的(de)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)培養過(guo)夜（或(huo)將細胞懸液加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培養基，培(pei)養過(guo)夜）。第二(er)天換液並(bing)檢(jian)查細(xi)胞密(mi)度。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代：如果(guo)細胞密(mi)度達 80%-90%，即可進(jin)行(xing)傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄去(qu)培養上清，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中(zhong)，使消(xiao)化(hua)液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細(xi)胞，將(jiang)培養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然後在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞消(xiao)化(hua)情(qing)況(kuang)，若細胞大(da)部分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速拿回操(cao)作臺，輕敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶(ping)後加2-3ml培(pei)養基終止消(xiao)化(hua)。輕輕打(da)勻(yun)後裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液後吹勻(yun)。

c、將細胞懸液按(an)1:2比例(li)分到(dao)新的含8 mL培養基的(de)新皿中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱中(zhong)培養。 3) 細胞凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態良好(hao)時，可(ke)進(jin)行(xing)細胞凍(dong)存。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞及細胞培(pei)養液，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上清液(ye)，用(yong)PBS清洗(xi)壹遍，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞計(ji)數(shu)。

b、根據(ju)細(xi)胞數(shu)量加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清細(xi)胞凍(dong)存液(ye)，使細(xi)胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每支凍存管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞懸液，註(zhu)意(yi)凍存管(guan)做(zuo)好(hao)標(biao)識。將凍存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱，24 h後轉入(ru)液氮(dan)灌儲(chu)存(cun)。記錄凍存(cun)管(guan)位置(zhi)以便下次拿取。

三、培(pei)養註(zhu)意(yi)事項(xiang) 

1. 收(shou)到細胞後首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養液是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象，若有(you)上述現(xian)象 發生(sheng)請(qing)及時和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)。

2. 仔細閱(yue)讀細(xi)胞說(shuo)明書，了解(jie)細(xi)胞相(xiang)關信(xin)息(xi)，如細(xi)胞形(xing)態、所(suo)用(yong)培(pei)養基、血(xue)清比(bi)例(li)、所(suo)需 細胞因(yin)子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞培(pei)養條件(jian)壹致，若由於(yu)培養條件(jian)不壹致而導(dao)致(zhi)細(xi)胞出(chu)現(xian)問題，責(ze)任(ren)由 客戶(hu)自(zi)行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦拭(shi)細(xi)胞瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞狀(zhuang)態。因(yin)運(yun)輸(shu)問題，部分細(xi)胞由於(yu)溫(wen)度 變(bian)化(hua)及劇烈碰(peng)亡破(po)碎形成碎片，是(shi)正常(chang)現(xian)象。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態後，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞可(ke)以消(xiao)化(hua)，懸浮細(xi)胞直接混勻(yun)收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的(de)培養基重(zhong)懸 細胞，並(bing)接種(zhong)到(dao)新的培養瓶(ping)或(huo)培養皿中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱中(zhong)進(jin)行(xing)培養。

5. 請客戶(hu)用相(xiang)同(tong)條件(jian)的培(pei)養基用(yong)於(yu)細胞培(pei)養。

6. 建(jian)議客戶(hu)收到(dao)細(xi)胞後前(qian) 3 天各(ge)拍幾(ji)張細胞照(zhao)片，記錄細胞狀(zhuang)態，便於(yu)和我(wo)司技(ji)術(shu)部(bu)溝通 交流(liu)。由於(yu)運輸(shu)的原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏感細(xi)胞會(hui)出(chu)現(xian)不穩(wen)定(ding)的情況(kuang)，請(qing)及時和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)，告知(zhi)細胞 的(de)具體(ti)情(qing)況(kuang)，以便我(wo)們的技(ji)術(shu)人(ren)員跟(gen)蹤(zong)回訪直至(zhi)問題解決。

7. 該(gai)細(xi)胞僅供科研使用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸(shu)用的(de)培養基 (灌液(ye)培養基) 不能(neng)再(zai)用(yong)來培養細胞，請(qing)換用按(an)照說(shuo)明書細胞培(pei) 養條件(jian)新配(pei)制的(de)培養基來培養細胞。     收(shou)到細(xi)胞後第壹次傳(chuan)代建(jian)議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公(gong)司正在(zai)出(chu)售(shou)的產品(pin)：

細(xi)胞樣(yang)品氧(yang)化(hua)酶(mei)表(biao)達流(liu)式(shi)細胞儀(yi)檢測(ce)試劑(ji)盒10/20次(ci)

CLIAKitforCpn-Ab(HumanChlamydiapneumoniaeaibody)ELISAKit人(ren)肺炎衣(yi)原(yuan)體(ti)抗(kang)體(ti)規(gui)格(ge)：48T/96T

RatCXC-chemokineligand16,CXCL16ELISAKit大(da)鼠CXC趨化(hua)因(yin)子(zi)配(pei)體(ti)16(CXCL16)ELISA試劑(ji)盒規格(ge)：96T/48T

大(da)鼠腸堿性0酸(suan)酶(mei)(ALPI)ELISA試劑(ji)盒 ，英(ying)文(wen)名(ming)： ALPI ELISA Kit

Rat compleme fragme 3A (C3a) ELISA Kit 大(da)鼠補體(ti)片斷(duan)3a(C3a)ELISA試劑(ji)盒

HumanSc1-70Aibody,Sc1-70-AbELISA試劑(ji)盒人(ren)抗(kang)Sc1-70抗(kang)體(ti)(Sc1-70-Ab)ELISA試劑(ji)盒規格(ge)：96T/48T

ELISAKitANG-1小(xiao)鼠血管(guan)生(sheng)成(cheng)素(su)1規(gui)格(ge)：48T/96T

Humancaspaseactivateddeoxyribonuclease,CADELISAKit人(ren)胱天激活(huo)的(de)脫氧核糖酶(mei)(CAD)ELISA試劑(ji)盒規格(ge)：96T/48T

人(ren)龍(Prednisolone)ELISA 試劑(ji)盒 96T/48T 試劑(ji)盒 組(zu)裝/原(yuan)裝(zhuang)

小(xiao)鼠線粒體(ti)呼吸(xi)鏈復合(he)物(wu)I免(mian)疫(yi)試劑(ji)盒 Mouse mitochondrial respiratory chain complex I ELISA kit

大(da)鼠N-乙(yi)酰(xian)基(ji)-絲(si)氨(an)酰(xian)-天門冬(dong)酰-賴(lai)氨(an)酰(xian)-脯(pu)(AcSDKP)免(mian)疫(yi)試劑(ji)盒 Rat N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit

CLIAKitforSophorajaponicaagglinin,SJAELISAKit槐(huai)凝集素(su)規格(ge)：48T/96T

乳(ru)品(pin)類食(shi)物(wu)DNA分離(li)試劑(ji)盒10次(ci)

ELISAKitCTAPⅢ人(ren)結締(di)組(zu)織活化(hua)肽Ⅲ規格(ge)：48T/96T

大(da)鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA 試劑(ji)盒 96T/48T 試劑(ji)盒 組(zu)裝/原(yuan)裝(zhuang)

腫瘤(liu)壞(huai)死(si)因(yin)子(zi)誘(you)導蛋白8樣(yang)蛋白1/TNFα-IP 8L1抗(kang)體(ti)

光導蛋白樣蛋白PDCL抗(kang)體(ti)

肉毒(du)堿棕(zong)櫚酰基(ji)轉移(yi)酶(mei)2重(zhong)組(zu)兔(tu)單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體(ti)

MSTO1蛋白抗(kang)體(ti)

線(xian)粒(li)體(ti)輔(fu)酶(mei)還原酶(mei)核心(xin)蛋白2抗(kang)體(ti)

白細胞介(jie)素(su)27β抗(kang)體(ti)

磷(lin)酸(suan)化(hua)p-IκB-α抗(kang)體(ti)

SKG-M細胞CD90重組(zu)兔(tu)單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體(ti)

血型(xing)Lewis A抗(kang)原(yuan)抗(kang)體(ti)