非洲豬瘟(wen)病(bing)毒（ASFV）核(he)酸檢測(ce)試劑盒(he)

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 產品(pin)名(ming)稱：非洲豬瘟(wen)病(bing)毒（ASFV）核(he)酸檢測(ce)試劑盒(he)
規格(ge)：48T
編號(hao)：BH-P97031
分類(lei)：熒(ying)光PCR法
儲存條件：-20℃避光保(bao)存，避免反(fan)復(fu)凍(dong)融。
運輸(shu)：低溫(wen)、避光，快(kuai)遞(di)免費送(song)貨上門。
產品(pin)特(te)點：
◇高特異性：與(yu)其(qi)他病(bing)毒無交叉(cha)反(fan)應，無非特(te)異(yi)性擴增；
◇高靈(ling)敏度(du)：檢測(ce)靈(ling)敏度(du)可達(da)10~100拷貝；
◇操作簡(jian)便：該(gai)系(xi)列(lie)所有(you)試劑均采(cai)用(yong)相(xiang)同(tong)的(de)體系(xi)和(he)條件，可同(tong)時(shi)進(jin)行(xing)多(duo)個(ge)檢測(ce)；
◇高通(tong)量(liang)：多(duo)種(zhong)雙(shuang)重PCR檢測(ce)以及(ji)三重(zhong)PCR檢測(ce)試劑盒(he)。

準備(bei)物品(pin)：
清理液（A）                                   毫升(sheng)
染(ran)色液（t B）                                   微升(sheng)
稀(xi)釋(shi)液（C）                                   毫升(sheng)
溶解液（tD）                                   毫升(sheng)
產品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)                                   1份
使(shi)用(yong)及(ji)效果(guo)：
PCR反(fan)應特點
(1) 特異(yi)性強
PCR反(fan)應的(de)特(te)異(yi)性(xing)決(jue)定因素(su)為：
①引物(wu)與模板(ban)DNA特異(yi)正確(que)的(de)結(jie)合；
②堿(jian)基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反(fan)應的(de)忠(zhong)實性；
④靶(ba)基因的(de)特(te)異(yi)性(xing)與(yu)保(bao)守(shou)性(xing)。
其(qi)中(zhong)引物(wu)與模板(ban)的(de)正(zheng)確(que)結(jie)合是關鍵(jian)。引(yin)物(wu)與(yu)模板(ban)的(de)結(jie)合及(ji)引物(wu)鏈的(de)延(yan)伸是遵(zun)循(xun)堿(jian)基配對原則的(de)。聚(ju)合酶合成反(fan)應的(de)忠(zhong)實性及(ji)Taq DNA聚合酶耐(nai)高溫(wen)性(xing)，使(shi)反(fan)應中(zhong)模板(ban)與引物(wu)的(de)結(jie)合(復(fu)性(xing))可以在(zai)較高的(de)溫(wen)度(du)下進(jin)行(xing)，結(jie)合的(de)特(te)異(yi)性(xing)大(da)大增加，被(bei)擴增的(de)靶(ba)基因片段也就(jiu)能保(bao)持(chi)很(hen)高的(de)正(zheng)確(que)度(du)。再(zai)通(tong)過(guo)選(xuan)擇特異(yi)性和(he)保(bao)守(shou)性(xing)高的(de)靶(ba)基因區，其(qi)特異(yi)性(xing)程(cheng)度就(jiu)更高。
(2) 靈(ling)敏度(du)高
PCR產物(wu)的(de)生成量(liang)是(shi)以指數方式(shi)增加的(de)，能(neng)將皮克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級(ji)的(de)起(qi)始待測(ce)模板(ban)擴增到微克(ke)(ug=10-6g)水平。能(neng)從(cong)100萬個細胞中(zhong)檢出(chu)壹個靶(ba)細胞；在病(bing)毒的(de)檢(jian)測(ce)中(zhong)，PCR的(de)靈(ling)敏度(du)可達(da)3個RFU(空斑(ban)形成(cheng)單位)；在細菌(jun)學中(zhong)zui小檢(jian)出(chu)率為3個細菌(jun)。
(3) 簡(jian)便、快(kuai)速(su)
PCR反(fan)應用(yong)耐(nai)高溫(wen)的(de)Taq DNA聚合酶，壹(yi)次(ci)性(xing)地(di)將反(fan)應液加好後，即在DNA擴增(zeng)液和(he)水浴鍋上進(jin)行(xing)變性-退火-延伸反(fan)應，壹般在2～4 小時(shi)完成(cheng)擴增(zeng)反(fan)應。擴增產物(wu)壹(yi)般用(yong)電(dian)泳分(fen)析，不壹(yi)定要用(yong)同(tong)位素(su)，無放射性汙染(ran)、易推廣(guang)。
(4) 對標(biao)本的(de)純(chun)度(du)要求(qiu)低
不需要分(fen)離病(bing)毒或(huo)細菌(jun)及(ji)培養(yang)細胞，DNA 粗(cu)制品(pin)及(ji)總RNA均可(ke)作為擴增模板(ban)。可直接用(yong)臨(lin)床(chuang)標(biao)本如(ru)血液、體腔液(ye)、洗(xi)嗽液、毛(mao)發、細胞、活PCR技術概(gai)論。
DCN Others Human  Decorin / DCN / SLRR1B 細胞裂解液 (陽性對照) 瑞替加濱(bin)RetigabineHPLC>95%,

腎小(xiao)管(guan)上皮(pi)細胞Many types of cells(1ml)Ribavirin>99%,BR

IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹(xie)猴(hou) Ierferon alpha-B / IFNA8 細胞裂解液 (陽性對照) （）RibavirinHPLC>98%,

小鼠(shu)誘(you)導(dao)性多(duo)潛能幹細胞;PUMC-mips-D3Ribostamycin Sulfate≥630µg/mg,BR,可用(yong)於細胞培養

GLC-82-TK細胞，肺腺(xian)癌細胞(轉染(ran)TK基因的(de)GLC-82細胞) 非洲綠猴(hou)腎細胞,COS-1細胞 CL-0066COLO 205(結(jie)腸(chang)癌細胞)5×106cells/瓶×2利(li)福(fu)布丁(ding)Rifabutin >97%,BR
PBK Others Human  PDK / PDZ binding kinase / TOPK 桿狀(zhuang)病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解液 (陽性對照) 芍藥苷(gan)（）>98%,分析(xi)Paeoniflorin

少突(tu)膠(jiao)質(zhi)前體細胞cDNAHOPC cDNA芍藥苷(gan)(40%)≥40%Paeoniflorin

MCF-7細胞，癌細胞 肺鱗(lin)癌細胞,LTEP-s細胞 滑膜細胞Many types of cells　5 × 105方(1ml)芍藥苷(gan)(50%)≥50%,BRPaeoniflorin

犬(quan)腎細胞系(xi)/野(ye)生型(xing);MDCK/wild芍藥苷(gan)(90%)≥90%Paeoniflorin

PLAT Others Human  tPAβ 細胞裂解液 (陽性對照) 5-(4-甲氧羰(tang)基苯基)-10,15,2-三苯(ben)基卟吩(fen)(>90.0%(HPLC))>90.0%(HPLC)5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin
非洲豬瘟(wen)病(bing)毒（ASFV）核(he)酸檢測(ce)試劑盒(he)tTA基因修飾(shi)的(de)小(xiao)鼠(shu)畸(ji)胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1F33,3',4,4'-聯本四，英(ying)文名(ming)或(huo)英(ying)文縮寫(xie)：DAB，級別(bie)：BR，85%，規格(ge)：100克(ke)

SGC-7901細胞，胃腺(xian)癌細胞 食管(guan)癌細胞,Eca-109細胞 大鼠(shu)腎上腺(xian)嗜鉻(ge)細胞瘤細胞;PC-12 [PC12](R)-(+)-叔丁(ding)基亞磺酰(xian)安 (R)-(+)-2-Mqthyl-2-propcnqsulfincmidq 19699-78-9

小鼠(shu)誘(you)導(dao)性多(duo)潛能幹細胞;PUMC-mips-A5L-西代胱安基醋 L-SqLqNOCYSTINq 961-88-3

VCAM1 Others Mouse 小鼠(shu) VCAM1 / CD106 細胞裂解液 (陽性對照) 失水蘋果(guo)1，英(ying)文名(ming)或(huo)英(ying)文縮寫(xie)：MA，級別(bie)：CP，規格(ge)：25克(ke)

腎皮(pi)質(zhi)近曲(qu)小管(guan)上皮(pi)細胞;HK-2150-25-4N,N-二甘(gan)酸 (BICINE)Bicine
檢測(ce)步驟(zhou)：
壹、 試劑的(de)準備(bei)
從(cong)試(shi)劑盒(he)中(zhong)取出(chu)熒(ying)光PCR反(fan)應液(BC-qPCR MIX)、酶混(hun)合物(Enzymes MIX)，冰上融化(hua)並(bing)振蕩混勻(yun)後，10000rpm離心(xin)10s。
設所需要的(de)PCR反(fan)應管(guan)管(guan)數為N(N=樣本數+1管(guan)陰(yin)性對照(zhao)+1管(guan)陽性對照)，每個測(ce)試反(fan)應體系(xi)配制如(ru)下(xia)表(biao)：
試劑 每個反(fan)應加入的(de)量(liang) N個反(fan)應加入的(de)量(liang)
熒(ying)光PCR反(fan)應液 14µL N×14µL
酶混(hun)合物 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算好各試劑的(de)使(shi)用(yong)量(liang)，加(jia)入壹(yi)適當(dang)體積(ji)潔(jie)凈(jing)離心(xin)管(guan)中(zhong)，充分(fen)混勻(yun)，10000rpm離心(xin)10s，向設定的(de)N個PCR反(fan)應管(guan)中(zhong)分別(bie)加入(ru)15μL熒(ying)光PCR反(fan)應液，向每管(guan)中(zhong)加入(ru)處(chu)理後樣品或(huo)陰(yin)性對照(zhao)(NTC)和(he)陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shi)離(li)心10秒。
7.2 qPCR反(fan)應條件
將各反(fan)應管(guan)放入(ru)定量(liang)PCR儀器(qi)的(de)反(fan)應槽內。
循(xun)環條件:
1循(xun)環 50℃ for 2 min
預變性 1循(xun)環 95℃ for 10 min
PCR擴增(zeng) 40循(xun)環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shi)收(shou)集(ji)熒(ying)光信(xin)號。報告(gao)基團：設置為FAM。淬(cui)滅基團：NONE，請(qing)勿選(xuan)擇ROX參比(bi)熒(ying)光。