轉(zhuan)基因(yin)植物(wu)NOS終止(zhi)子核(he)酸檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

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 產(chan)品名(ming)稱(cheng)：轉(zhuan)基(ji)因(yin)植物(wu)NOS終止(zhi)子核(he)酸檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒
規格：50T
編(bian)號(hao)：BH-P96961
分(fen)類：熒(ying)光(guang)PCR法(fa)
儲(chu)存(cun)條(tiao)件：-20℃避(bi)光(guang)保(bao)存，避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。
運(yun)輸(shu)：低溫(wen)、避(bi)光(guang)，快(kuai)遞(di)免(mian)費(fei)送貨上(shang)門(men)。
產(chan)品特(te)點：
◇高特(te)異性：與(yu)其(qi)他病(bing)毒(du)無交(jiao)叉(cha)反(fan)應(ying)，無非(fei)特(te)異性擴增；
◇高靈敏度(du)：檢(jian)測(ce)靈敏度(du)可(ke)達(da)10~100拷(kao)貝；
◇操(cao)作(zuo)簡(jian)便：該系(xi)列(lie)所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)均(jun)采(cai)用(yong)相同(tong)的(de)體(ti)系(xi)和(he)條(tiao)件，可(ke)同(tong)時(shi)進行多(duo)個檢(jian)測(ce)；
◇高通量：多(duo)種(zhong)雙重(zhong)PCR檢(jian)測(ce)以及(ji)三重PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒。

準(zhun)備物(wu)品：
清理液（A）                                   毫(hao)升(sheng)
染(ran)色(se)液（t B）                                   微升(sheng)
稀釋(shi)液（C）                                   毫(hao)升(sheng)
溶(rong)解液（tD）                                   毫(hao)升(sheng)
產(chan)品說明書(shu)                                   1份
使(shi)用(yong)及(ji)效果：
PCR反(fan)應(ying)特(te)點
(1) 特(te)異性強(qiang)
PCR反(fan)應(ying)的(de)特(te)異性決(jue)定(ding)因(yin)素為：
①引(yin)物(wu)與模(mo)板DNA特(te)異正(zheng)確(que)的結合；
②堿(jian)基(ji)配(pei)對(dui)原則(ze)；
③Taq DNA聚(ju)合酶(mei)合成反(fan)應(ying)的(de)忠(zhong)實性；
④靶(ba)基(ji)因(yin)的特(te)異性與(yu)保(bao)守(shou)性(xing)。
其(qi)中(zhong)引(yin)物(wu)與模(mo)板的(de)正(zheng)確(que)結合是(shi)關(guan)鍵(jian)。引(yin)物(wu)與模(mo)板的(de)結合及(ji)引物(wu)鏈(lian)的延(yan)伸(shen)是(shi)遵循堿基配(pei)對(dui)原則(ze)的(de)。聚合酶(mei)合成反(fan)應(ying)的(de)忠(zhong)實性及(ji)Taq DNA聚(ju)合酶(mei)耐(nai)高溫(wen)性，使(shi)反(fan)應(ying)中(zhong)模(mo)板與(yu)引物(wu)的結合(復(fu)性(xing))可(ke)以在(zai)較高的溫(wen)度(du)下(xia)進(jin)行，結合的特(te)異性大(da)大(da)增加(jia)，被(bei)擴增的(de)靶基(ji)因(yin)片段也就能保(bao)持(chi)很高的正(zheng)確(que)度(du)。再(zai)通過(guo)選擇(ze)特(te)異性和(he)保(bao)守(shou)性(xing)高的靶基因(yin)區，其特(te)異性程(cheng)度(du)就(jiu)更(geng)高。
(2) 靈敏度(du)高
PCR產(chan)物(wu)的生(sheng)成(cheng)量是(shi)以指數方(fang)式增加(jia)的，能將皮克(pg=10-12g)量(liang)級的(de)起始(shi)待(dai)測(ce)模(mo)板擴增到(dao)微克(ug=10-6g)水(shui)平(ping)。能從100萬(wan)個(ge)細胞中檢出(chu)壹(yi)個(ge)靶細胞；在(zai)病(bing)毒(du)的(de)檢(jian)測(ce)中，PCR的(de)靈敏度(du)可(ke)達(da)3個(ge)RFU(空斑形成單位(wei))；在(zai)細菌(jun)學(xue)中zui小檢出率為(wei)3個(ge)細菌(jun)。
(3) 簡(jian)便、快(kuai)速
PCR反(fan)應(ying)用(yong)耐(nai)高溫(wen)的Taq DNA聚(ju)合酶(mei)，壹(yi)次(ci)性(xing)地(di)將反(fan)應(ying)液加好後(hou)，即(ji)在(zai)DNA擴增液和水(shui)浴鍋上進行變(bian)性-退火(huo)-延(yan)伸(shen)反(fan)應(ying)，壹(yi)般在(zai)2～4 小時完成擴增反(fan)應(ying)。擴增產(chan)物(wu)壹般用(yong)電(dian)泳(yong)分(fen)析，不壹(yi)定要(yao)用同(tong)位(wei)素，無放(fang)射性(xing)汙染(ran)、易(yi)推(tui)廣(guang)。
(4) 對(dui)標(biao)本的純(chun)度(du)要(yao)求(qiu)低
不需(xu)要(yao)分(fen)離(li)病(bing)毒(du)或(huo)細菌(jun)及(ji)培養細胞，DNA 粗(cu)制(zhi)品及(ji)總RNA均(jun)可作(zuo)為(wei)擴增模(mo)板。可(ke)直(zhi)接用臨(lin)床標本如血液、體(ti)腔(qiang)液、洗嗽(sou)液、毛發(fa)、細胞、活(huo)PCR技(ji)術概(gai)論(lun)。
FZD10 Others Mouse 小鼠 FZD10 / Frizzled-10 / CD350 細胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 利(li)福(fu)布(bu)丁（）Rifabutin HPLC>95%,

生(sheng)發(fa)基(ji)質細胞總RNAHHGMC NARifapentine>97%

EFNA5 Others Canine 狗(gou) Ephrin-A5 / EFNA5 細胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) ()Rifapentine含量測(ce)定

二(er)氫(qing)還(hai)原酶(mei)缺(que)陷(xian)型(xing)中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-Riluzole>99%,BR

SW1990細胞，胰腺(xian)癌(ai)細胞 胸膜(mo)瘤(liu)細胞,SMC-1細胞 雜(za)交(jiao)瘤(liu)(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7（）RiluzoleHPLC>98%,
FST Others Human  FST / Follistatin 細胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 四(si)酸鈉(na)亮綠(lv)增菌(jun)液25克

NCI-H524 小細胞肺癌(ai)1-亞肖基(ji);N-亞肖基(ji) 1-nitnosopyrrolidinq 930-22-

mCF, 小鼠心臟成(cheng)纖(xian)維細胞YM11瓊脂(zhi)25毫(hao)升(sheng)2～8℃

骨(gu)髓(sui)間充(chong)質幹細胞(hMSCs)DODECYLTRImetxYLAMMONIUMCHLORIDE十(shi)二烷基(ji)基(ji)錄(lu)化(hua)高級淡黃色(se)稍有(you)粘性液體(ti)RTsigma

肺(fei)成(cheng)纖(xian)維細胞;HFL1 成(cheng)纖(xian)維細胞*培養基 100mL27246-81-73-溴(xiu)本鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)3-Bromopxenylhydr xy7nochloride
轉(zhuan)基(ji)因(yin)植物(wu)NOS終止(zhi)子核(he)酸檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒CD244 Others Human  2B4 / SLAMF / CD244 細胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) TWEEN20,10%SOLUTION,PEROXIDE-FREE吐(tu)溫(wen)20溶(rong)液蛋白組(zu)學(xue)級透(tou)明液體(ti)RTsigma

膀(pang)胱成(cheng)纖(xian)維細胞Many types of cells　5 × 105方(fang)(1ml)間安基(ji)本加醋(cu) 3-cminobqnzoic ccid 1999-2-8

NEK7 Others Human  NEK7 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) HEMATOXYLIN蘇(su)高級淺(qian)棕(zong)色(se)粉(fen)末RTsigma

EB病(bing)毒(du)轉(zhuan)化(hua)的B細胞;KMY1022橙(cheng)黃G61公斤(jin)

ZR-75-1細胞，癌(ai)細胞 轉(zhuan)基(ji)因(yin)鼻(bi)咽(yan)癌(ai)細胞系(xi),CNE1-lmp\l細胞 CL-0309TG-905(腦膠(jiao)質母(mu)細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2(錄(lu)化(hua)鉀(jia))
檢(jian)測(ce)步驟(zhou)：
壹(yi)、 試(shi)劑(ji)的準(zhun)備
從試(shi)劑(ji)盒中(zhong)取出熒(ying)光(guang)PCR反(fan)應(ying)液(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混(hun)合物(wu)(Enzymes MIX)，冰上融(rong)化(hua)並振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻後，10000rpm離(li)心(xin)10s。
設所(suo)需(xu)要(yao)的PCR反(fan)應(ying)管(guan)管(guan)數(shu)為(wei)N(N=樣本數+1管(guan)陰性(xing)對(dui)照(zhao)+1管(guan)陽(yang)性對(dui)照(zhao))，每(mei)個(ge)測(ce)試(shi)反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)配(pei)制(zhi)如下(xia)表：
試(shi)劑(ji) 每(mei)個(ge)反(fan)應(ying)加(jia)入(ru)的(de)量(liang) N個(ge)反(fan)應(ying)加(jia)入(ru)的(de)量(liang)
熒(ying)光(guang)PCR反(fan)應(ying)液 14µL N×14µL
酶(mei)混(hun)合物(wu) 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算(suan)好各(ge)試(shi)劑(ji)的使(shi)用(yong)量(liang)，加入(ru)壹適當體(ti)積(ji)潔凈(jing)離心(xin)管中，充(chong)分(fen)混(hun)勻，10000rpm離(li)心(xin)10s，向(xiang)設定(ding)的N個(ge)PCR反(fan)應(ying)管(guan)中(zhong)分(fen)別(bie)加入15μL熒(ying)光(guang)PCR反(fan)應(ying)液，向每(mei)管中(zhong)加(jia)入(ru)處理後(hou)樣品或(huo)陰性(xing)對(dui)照(zhao)(NTC)和(he)陽(yang)性對(dui)照(zhao)(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時離(li)心10秒(miao)。
7.2 qPCR反(fan)應(ying)條(tiao)件
將(jiang)各(ge)反(fan)應(ying)管(guan)放(fang)入(ru)定(ding)量PCR儀(yi)器(qi)的反(fan)應(ying)槽(cao)內(nei)。
循(xun)環(huan)條(tiao)件:
1循(xun)環(huan) 50℃ for 2 min
預變性 1循(xun)環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循(xun)環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延(yan)伸(shen)時收集熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)。報(bao)告(gao)基團：設置(zhi)為FAM。淬(cui)滅(mie)基團：NONE，請(qing)勿選擇(ze)ROX參比熒光。