XL2-Blue 感(gan)受態細(xi)胞(bao)100ul*50

XL2-Blue 感(gan)受態細(xi)胞(bao)100ul*50以下是的訂購(gou)信息(xi)儲存(cun)條件(jian)：-70℃凍(dong)存
操作(zuo)方法:
1. 取-80℃保存的農桿菌(jun)感(gan)受態於室溫(wen)或(huo)手心片(pian)刻(ke)待其部分融(rong)化，處(chu)於冰(bing)水混(hun)合狀(zhuang)態時(shi)插(cha)入(ru)冰(bing)中。
2.每100 μl感(gan)受態加(jia)入(ru)0.01-1 μg質(zhi)粒DNA（轉化效(xiao)率較高，*次使(shi)用(yong)前(qian)做預實驗確定所加(jia)質(zhi)粒的量），用(yong)手(shou)管底混(hun)勻，依(yi)次於冰(bing)上靜(jing)置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰(bing)浴5分鐘。
XL2-Blue 感(gan)受態細(xi)胞(bao)100ul*503. 加(jia)入(ru)700 μl無抗生素的LB或(huo)YEB液體培養基(ji)，於28℃振蕩(dang)培養2~3小(xiao)時(shi)。
4. 6000 rpm離心壹(yi)分鐘收(shou)菌(jun)，留(liu)取(qu)100 μl左右(you)上清(qing)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打重懸(xuan)菌(jun)塊(kuai)塗(tu)布(bu)於含相應(ying)抗生素的LB或(huo)YEB平(ping)板(ban)上，倒(dao)置放(fang)於28℃培養箱培養2-3天
註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)
1. 加(jia)入(ru)質(zhi)粒時體積不(bu)應(ying)大於感(gan)受態體積的1/10；質(zhi)粒不(bu)純(chun)或(huo)存在(zai)乙(yi)醇(chun)等有(you)機(ji)物(wu)汙染(ran)，轉(zhuan)化效(xiao)率急劇下降；質(zhi)粒增(zeng)大壹(yi)倍，轉化效(xiao)率下降壹(yi)個數量級(ji)。
2. 混(hun)入(ru)質(zhi)粒時應(ying)輕(qing)柔(rou)操作(zuo)。轉化高濃度(du)的質(zhi)粒可(ke)相應(ying)減少終(zhong)用於塗板(ban)的菌(jun)量。
3. 平(ping)板(ban)上陽(yang)性克(ke)隆(long)密(mi)度(du)過(guo)大時，由(you)於營(ying)養(yang)不(bu)足(zu)，陽性克(ke)隆(long)生長(chang)變慢(man)，菌(jun)落(luo)變小(xiao)，為了(le)獲得(de)大(da)的菌(jun)落(luo)，應(ying)減少質(zhi)粒用量。
XL2-Blue 感(gan)受態細(xi)胞(bao)100ul*504. 濃度(du)不(bu)應(ying)高於25 μg/ml，過(guo)高的濃度(du)不(bu)利於農桿菌(jun)生長(chang)，會(hui)降(jiang)低其生長(chang)速(su)度(du)和轉(zhuan)化效(xiao)率。本(ben)公司感(gan)受態計算(suan)轉化效(xiao)率時所(suo)用平(ping)板(ban)只(zhi)含有50 μg/ml kan，若所用(yong)平(ping)板(ban)含有20 μg/ml rif則轉化效(xiao)率降低到(dao)1/2。
5. 培養基(ji)中加(jia)入(ru)的目的是防(fang)止雜(za)菌(jun)生長(chang)、篩(shai)選農(nong)桿菌(jun)；根(gen)據(ju)所(suo)用(yong)菌(jun)株(zhu)抗性加(jia)入(ru)Ti質(zhi)粒篩選抗生素可(ke)防止(zhi)Ti質(zhi)粒丟(diu)失(shi)，但Ti質(zhi)粒篩選抗生素不(bu)利於農桿菌(jun)的轉基(ji)因操作(zuo)，所以壹(yi)般培養農(nong)桿菌(jun)時(shi)不(bu)考慮這(zhe)些抗生素，Ti質(zhi)粒丟(diu)失(shi)的概率(lv)極低(可(ke)以忽(hu)略)。

進(jin)行全(quan)線跟蹤(zong)。 :規格; 96T/48T 雞(ji)白血(xue)病抑制因子(LIF)ELISA試劑(ji)盒(he)廠(chang)家 雞(ji)白血(xue)病抑制因子(LIF)ELISA試劑(ji)盒(he)報價 

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