人(ren)可溶(rong)性血(xue)管(guan)內皮細胞蛋(dan)白(bai)受體(ti)

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     動物血(xue)清(qing)：內皮細胞血(xue)清(qing)、GIBCO胎(tai)牛(niu)清(qing)、HyClone。動物血(xue)清(qing)：內皮細胞血(xue)清(qing)、GIBCO胎(tai)牛(niu)清(qing)、HyClone。
     細胞：*細(xi)胞、正(zheng)常(chang)細(xi)胞、腫瘤(liu)細(xi)胞、腫瘤(liu)耐(nai)藥細(xi)胞。細(xi)胞：*細胞(bao)、正(zheng)常細(xi)胞(bao)、腫瘤(liu)細(xi)胞、腫瘤(liu)耐(nai)藥細(xi)胞。
人(ren)可溶(rong)性血(xue)管(guan)內皮細胞蛋(dan)白(bai)受體(ti)註(zhu)意事(shi)項(xiang)
1.試劑盒從冷藏環(huan)境中(zhong)取出應在室溫(wen)平(ping)衡 15-30 分(fen)鐘(zhong)後方(fang)可使用(yong)，酶(mei)標包(bao)被(bei)板(ban)開(kai)封後如(ru)未(wei)用完(wan)，板條應裝入(ru)密封袋中(zhong)保存。
2.濃洗滌液可能(neng)會(hui)有結(jie)晶(jing)析出，稀釋(shi)時可在水浴中(zhong)加溫助溶(rong)，洗滌時不(bu)影(ying)響(xiang)結(jie)果(guo)。
3.各步(bu)加樣(yang)均應使用(yong)加(jia)樣器(qi)，並經常校對其(qi)準確性，以避免試驗誤(wu)差。壹次(ci)加(jia)樣(yang)時間(jian)控(kong)制在 5 分(fen)鐘(zhong)內，如標本(ben)數(shu)量(liang)多，使用(yong)排槍加(jia)樣(yang)。
4.請每次(ci)測定(ding)的同(tong)時做(zuo)標(biao)準曲(qu)線，做(zuo)復孔。如(ru)標本(ben)中(zhong)待測物質含量(liang)過高（樣本(ben)OD 值(zhi)大(da)於標準(zhun)品(pin)孔*孔的OD 值(zhi)），請先用(yong)樣品(pin)稀釋(shi)液稀(xi)釋(shi)壹定(ding)倍(bei)數(shu)（n 倍(bei)）後再(zai)測(ce)定，計(ji)算時請後乘(cheng)以總(zong)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)（×n×5）。
5.封板膜只(zhi)限(xian)壹次(ci)性(xing)使用(yong)，以避免交(jiao)叉汙(wu)染(ran)。
6.底(di)物請避光(guang)保存(cun)。
7.嚴(yan)格(ge)按照(zhao)說(shuo)明(ming)書的操(cao)作(zuo)進(jin)行，試驗結(jie)果(guo)判(pan)定(ding)必(bi)須以酶標(biao)儀(yi)讀數(shu)為(wei)準.
8.所(suo)有樣品(pin)，洗滌液和(he)各種(zhong)廢(fei)棄物都應按傳染(ran)物處(chu)理(li)。
操(cao)作(zuo)步(bu)驟
1.標(biao)準(zhun)品(pin)的稀(xi)釋(shi)：本(ben)試劑盒提(ti)供原(yuan)倍(bei)標準(zhun)品(pin)壹支(zhi)，用(yong)戶(hu)可按(an)照(zhao)下(xia)列圖(tu)表(biao)在小試管(guan)中(zhong)進(jin)行稀(xi)釋(shi)。
2.加樣(yang)：分(fen)別設空(kong)白(bai)孔（空(kong)白(bai)對照(zhao)孔不(bu)加(jia)樣(yang)品(pin)及(ji)酶(mei)標試劑，其(qi)余(yu)各步(bu)操作(zuo)相同）、標準孔、待(dai)測樣(yang)品(pin)孔。在酶標(biao)包被(bei)板(ban)上標準(zhun)品(pin)準確加樣(yang) 50µl，待(dai)測樣品(pin)孔中(zhong)先加樣品(pin)稀釋(shi)液 40µl，然(ran)後再(zai)加(jia)待測(ce)樣品(pin) 10µl（樣品(pin)終稀(xi)釋(shi)度為(wei) 5 倍(bei)）。加樣(yang)將(jiang)樣(yang)品(pin)加於酶標(biao)板(ban)孔底(di)部，盡量(liang)不(bu)觸(chu)及(ji)孔壁(bi)，輕輕晃(huang)動(dong)混(hun)勻(yun)。
3.溫(wen)育：用封板膜封板後置 37℃溫育 30 分(fen)鐘(zhong)。
4.配(pei)液：將(jiang) 30 倍(bei)濃縮洗(xi)滌液用蒸(zheng)餾水 30 倍(bei)稀釋(shi)後備(bei)用(yong)
5.洗(xi)滌：小心揭掉封板膜，棄去(qu)液(ye)體(ti)，甩(shuai)幹(gan)，每(mei)孔加(jia)滿洗(xi)滌液，靜置 30 秒(miao)後棄去(qu)，如(ru)此(ci)重(zhong)復 5 次(ci)，拍(pai)幹。
6.加(jia)酶：每(mei)孔加(jia)入酶(mei)標試劑 50µl，空(kong)白(bai)孔除(chu)外。
7.溫育：操作(zuo)同 3。
8.洗滌：操作(zuo)同 5。
9.顯色：每孔先(xian)加入(ru)顯色劑 A50µl，再加入顯(xian)色(se)劑 B50µl，輕輕震(zhen)蕩混(hun)勻(yun)，37℃避(bi)光(guang)顯色(se)
15 分(fen)鐘(zhong).
10.終(zhong)止：每孔加(jia)終止(zhi)液 50µl，終止反(fan)應（此(ci)時藍色立(li)轉黃(huang)色）。
11.測(ce)定(ding)：以空(kong)白(bai)空(kong)調零(ling)，450nm 波(bo)長依(yi)序(xu)測量(liang)各孔的吸(xi)光(guang)度（OD 值(zhi)）。 測(ce)定應在加終(zhong)止液後 15 分(fen)鐘(zhong)以內進(jin)行。
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