R5421 感受(shou)態(tai)細胞100ul*10操作(zuo)方法(fa)說(shuo)明(ming)
R5421 感受(shou)態(tai)細胞100ul*10 是(shi)采用大(da)腸桿菌(jun)經特(te)殊工藝(yi)處(chu)理(li)得到(dao)的(de)感受(shou)態(tai)細胞,
操作(zuo)方法(fa):
1 取(qu)感受(shou)態(tai)細胞置於冰(bing)浴中(zhong),如(ru)需(xu)分裝(zhuang)可(ke)將(jiang)剛(gang)融化細(xi)胞懸液分(fen)裝(zhuang)到無菌(jun)預(yu)冷的(de)離(li)心(xin)管(guan)中,置於冰(bing)浴中(zhong)。
● 壹(yi)次(ci)轉(zhuan)化(hua)感受(shou)態(tai)細胞的(de)建(jian)議(yi)用量(liang)為(wei)50-100 μl,可(ke)以(yi)根(gen)據實際(ji)情況(kuang)分裝(zhuang)使用。應註意(yi)所(suo)用DNA 體(ti)積(ji)不(bu)要超過感受(shou)態(tai)細胞懸液體(ti)積(ji)的(de)十(shi)分之(zhi)壹。
註意(yi)事項(xiang)
1. 感受(shou)態(tai)細胞應保(bao)存(cun)在 -70℃,不(bu)可(ke)多次(ci)凍(dong)融和(he)放置時(shi)間過長(chang),以(yi)避免(mian)降低(di)感受(shou)態(tai)細胞的(de)轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率(lv)。
2. 進(jin)行(xing)轉(zhuan)化操作時(shi),應根(gen)據相(xiang)應溫度及(ji)無菌(jun)條件(jian)的(de)要(yao)求(qiu)進行(xing)。
3 為防(fang)止轉化實(shi)驗(yan)不(bu)成功(gong),可(ke)以(yi)保(bao)留部(bu)分(fen)連接(jie)反(fan)應液(ye),以(yi)重(zhong)新轉化(hua),將(jiang)損失(shi)降(jiang)到低。