ELISA檢測系(xi)統可以(yi)說(shuo)是(shi)現(xian)在使用多(duo)的(de)檢測方法(fa)，而且(qie)技術手(shou)段很(hen)多，對於(yu)花板，假(jia)陽(yang)性(xing)，全(quan)顯(xian)色，全部(bu)顯(xian)色，顯(xian)色比空缺(que)還低，這些都(dou)起到了(le)至(zhi)關(guan)重(zhong)要(yao)的(de)作(zuo)用，壹定(ding)要(yao)多註意(yi)。
應(ying)留意(yi)以(yi)下原理(li)：因為(wei)蛋(dan)白(bai)質與(yu)聚苯乙烯(xi)固(gu)相載體(ti)是通(tong)過物(wu)理(li)吸(xi)附(fu)結合(he)的(de)，靠的(de)是(shi)蛋(dan)白(bai)質分(fen)子(zi)結構(gou)上(shang)的(de)疏(shu)水(shui)基團(tuan)與(yu)固相(xiang)載體(ti)表(biao)面(mian)的(de)疏(shu)水(shui)基團(tuan)間的(de)作(zuo)用，這種(zhong)物(wu)理(li)吸(xi)附(fu)長短特(te)異(yi)性(xing)的(de)，受(shou)蛋(dan)白(bai)質的(de)分(fen)子(zi)量(liang)、等(deng)電點、濃度等(deng)的(de)影(ying)響(xiang)，大(da)分(fen)子(zi)蛋(dan)白(bai)質較(jiao)小分(fen)子(zi)蛋(dan)白(bai)質通(tong)常含有(you)更多的(de)疏(shu)水(shui)基團(tuan)，故更易(yi)吸(xi)附(fu)到固相(xiang)載體(ti)表(biao)面(mian)。小(xiao)分(fen)子(zi)必需依(yi)賴(lai)和(he)大(da)的(de)蛋(dan)白(bai)載體(ti)偶聯(lian)後(hou)才(cai)能(neng)固(gu)定(ding)在固相(xiang)載體(ti)上。

包(bao)被原(yuan)的(de)性(xing)質很(hen)重要(yao)，蛋(dan)白(bai)濃度，是否降(jiang)解，這(zhe)關(guan)系(xi)到妳做(zuo)出(chu)的(de)抗體(ti)可不可以(yi)被其(qi)識別，所(suo)以保(bao)留抗原(yuan)很(hen)重要(yao)，我做(zuo)重組(zu)蛋(dan)白(bai)時(shi)，師(shi)兄(xiong)都(dou)嚴格(ge)警(jing)告我壹定(ding)要(yao)在冰浴(yu)下緩慢融化就是(shi)這個道理。就(jiu)是(shi)讓(rang)大量(liang)不相關(guan)的(de)蛋(dan)白(bai)質充(chong)填這(zhe)些曠(kuang)地(di)空閑(xian)，從而(er)排斥ELISA後(hou)的(de)步驟中(zhong)幹(gan)擾物(wu)質的(de)再(zai)吸(xi)附(fu)。但有時因為試驗的(de)需要(yao)，包(bao)被原(yuan)的(de)特(te)殊(shu)性(xing)也可能(neng)采(cai)用(yong)中(zhong)性(xing)的(de)緩沖溶液(ye)來包(bao)。
還(hai)有有(you)的(de)包(bao)被原(yuan)可能(neng)不是蛋(dan)白(bai)，對於(yu)和(he)脂(zhi)類(lei)物(wu)質或(huo)小分(fen)子(zi)物(wu)質我們要(yao)事先對其(qi)改造(zao)再(zai)加(jia)以(yi)包(bao)被，親和素:先親和素先包(bao)被載體(ti)，加(jia)入(ru)化的(de)DNA，這(zhe)種(zhong)包(bao)被方法(fa)平(ping)均、牢固(gu)，已擴大應(ying)用於各(ge)種(zhong)抗原(yuan)物(wu)質的(de)定(ding)量(liang)測定(ding)。常(chang)用的(de)包(bao)被液(ye)除了(le)剛才(cai)提(ti)到的(de)pH9.6碳(tan)酸(suan)鹽緩沖液(ye)，還有(you)pH7.2的(de)磷(lin)酸(suan)鹽緩沖液(ye)和pH7-8的(de)Tris-HCL緩沖液(ye)等(deng)等(deng)。