人(ren)elisa試劑盒註意(yi)事(shi)項：

1.試劑(ji)盒(he)從冷(leng)藏環(huan)境中取出(chu)應(ying)在室溫平(ping)衡(heng) 15-30 分(fen)鐘(zhong)後方可(ke)使(shi)用，酶標(biao)包被(bei)板(ban)開封(feng)後(hou)如未(wei)用完(wan)，板(ban)條應(ying)裝入密封(feng)袋(dai)中(zhong)保(bao)存。

2.濃(nong)洗(xi)滌(di)液可(ke)能會(hui)有(you)結(jie)晶(jing)析出(chu)，稀釋時可(ke)在(zai)水(shui)浴中(zhong)加(jia)溫助溶(rong)，洗(xi)滌(di)時不影響結(jie)果(guo)。

3.各(ge)步加(jia)樣(yang)均(jun)應(ying)使用加(jia)樣(yang)器(qi)，並經常(chang)校(xiao)對其準(zhun)確(que)性(xing)，以避免試驗誤(wu)差。壹次(ci)加(jia)樣(yang)時間(jian)控制在(zai) 5 分(fen)鐘(zhong)內，如標本(ben)數(shu)量(liang)多，使(shi)用排槍加(jia)樣(yang)。

4.請(qing)每次(ci)測(ce)定的(de)同時做標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)，做復(fu)孔。如標本中(zhong)待(dai)測(ce)物(wu)質(zhi)含(han)量(liang)過高(gao)（樣(yang)本(ben)OD 值大於標準(zhun)品(pin)孔*孔的OD 值），請(qing)先用樣(yang)品(pin)稀釋液稀釋壹定(ding)倍(bei)數(shu)（n 倍(bei)）後(hou)再(zai)測(ce)定(ding)，計算時請(qing)後乘以總稀釋倍(bei)數(shu)（×n×5）。

5.封(feng)板(ban)膜(mo)只限壹次(ci)性(xing)使(shi)用，以避免交叉(cha)汙染。

6.底(di)物(wu)請(qing)避光(guang)保(bao)存。

7.嚴(yan)格(ge)按照說(shuo)明(ming)書(shu)的(de)操(cao)作進(jin)行(xing)，試驗結(jie)果(guo)判(pan)定(ding)必(bi)須(xu)以酶標(biao)儀讀(du)數為(wei)準(zhun).

8.所有樣(yang)品(pin)，洗(xi)滌(di)液和(he)各(ge)種(zhong)廢棄(qi)物(wu)都應(ying)按傳染物(wu)處(chu)理(li)。

人(ren)elisa試劑盒(he)操(cao)作步(bu)驟(zhou)

1.標準(zhun)品(pin)的稀釋：本試(shi)劑(ji)盒提(ti)供原倍(bei)標(biao)準(zhun)品(pin)壹支(zhi)，用戶可(ke)按照下列(lie)圖表在(zai)小試管(guan)中進(jin)行(xing)稀釋。

2.加(jia)樣(yang)：分(fen)別(bie)設(she)空白孔（空白對照孔不加(jia)樣(yang)品(pin)及酶標(biao)試劑(ji)，其余(yu)各(ge)步操(cao)作相(xiang)同）、標(biao)準孔、待測樣(yang)品(pin)孔。在酶標(biao)包被(bei)板(ban)上標準(zhun)品(pin)準確(que)加(jia)樣(yang) 50µl，待(dai)測樣(yang)品(pin)孔中先加(jia)樣(yang)品(pin)稀釋液 40µl，然(ran)後再加(jia)待測(ce)樣(yang)品(pin) 10µl（樣(yang)品(pin)終(zhong)稀釋度為(wei) 5 倍(bei)）。加(jia)樣(yang)將(jiang)樣(yang)品(pin)加(jia)於酶標(biao)板(ban)孔底部(bu)，盡(jin)量(liang)不觸(chu)及孔壁，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動(dong)混勻(yun)。

3.溫(wen)育：用封(feng)板(ban)膜(mo)封(feng)板(ban)後置(zhi) 37℃溫(wen)育 30 分(fen)鐘(zhong)。

4.配液：將(jiang) 30 倍(bei)濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌(di)液用蒸(zheng)餾(liu)水(shui) 30 倍(bei)稀釋後備(bei)用

5.洗(xi)滌(di)：小心(xin)揭(jie)掉(diao)封(feng)板(ban)膜(mo)，棄(qi)去(qu)液體(ti)，甩幹，每孔加(jia)滿洗(xi)滌(di)液，靜(jing)置 30 秒後(hou)棄去，如(ru)此(ci)重復 5 次，拍幹。

6.加(jia)酶：每孔加(jia)入酶標(biao)試劑(ji) 50µl，空白孔除(chu)外。

7.溫育：操(cao)作同(tong) 3。

8.洗(xi)滌(di)：操(cao)作同(tong) 5。

9.顯(xian)色(se)：每孔先加(jia)入顯(xian)色(se)劑(ji) A50µl，再加(jia)入顯(xian)色(se)劑(ji) B50µl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃避光(guang)顯色(se)
15 分(fen)鐘(zhong).

10.終(zhong)止：每孔加(jia)終(zhong)止液 50µl，終(zhong)止反(fan)應(ying)（此(ci)時藍(lan)色(se)立(li)轉黃色(se)）。

11.測(ce)定：以空白空調(tiao)零(ling)，450nm 波長依(yi)序(xu)測(ce)量(liang)各(ge)孔的吸(xi)光(guang)度（OD 值）。 測定應(ying)在加(jia)終(zhong)止液後(hou) 15 分(fen)鐘(zhong)以內進(jin)行(xing)。