CTX-TNA2大(da)鼠腦(nao)I型星(xing)形(xing)膠(jiao)質(zhi)細胞(bao)

公(gong)司產品(pin)僅(jin)供科(ke)研(yan)研(yan)究使(shi)用、不(bu)得(de)用於臨床(chuang)診斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳代：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後加入 5ml 培(pei)養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕輕(qing)吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然後(hou)將懸液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養基重(zhong)懸，然後按 1:2 比例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶(ping)傳代，最後放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養箱(xiang)中(zhong)培養；

2、細(xi)胞(bao)凍存(cun)：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後加入培(pei)養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕輕(qing)吹打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然後(hou)將懸液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞(bao)，並(bing)放置(zhi)於(yu)凍(dong)存管中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍存(cun)管放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移(yi)入-80℃過夜，24h 後轉入液氮中(zhong)進(jin)行(xing)長(chang)期保存(cun)。使(shi)用程(cheng)序

降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直(zhi)接(jie)放入-80℃。

二(er)、細胞(bao)培養操(cao)作

1) 復蘇細胞(bao)：以下(xia)細胞(bao)培養凍(dong)存(cun)處(chu)理(li)僅(jin)供參考，具(ju)體(ti)操(cao)作步(bu)驟以隨(sui)貨(huo)產(chan)品(pin)說明(ming)書為主。將含有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培養基混合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培養基後吹勻。然後將(jiang)所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸液加入含適(shi)量(liang)培養基的(de)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)培養過夜（或將細胞(bao)懸液加入10 cm皿(min)中(zhong)，加入約8 mL培養基，培養過夜）。第二(er)天換液並(bing)檢(jian)查細(xi)胞(bao)密(mi)度。

2) 細胞(bao)傳代：如果(guo)細胞(bao)密(mi)度達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代培養。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養上(shang)清(qing)，用不(bu)含鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸(jin)潤所有(you)細(xi)胞(bao)，將培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況(kuang)而(er)定），然後在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情況(kuang)，若(ruo)細胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫落(luo)，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作臺(tai)，輕(qing)敲幾下(xia)培養瓶(ping)後加2-3ml培養基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕輕(qing)打勻後裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，補(bu)加1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹(chui)勻。

c、將細胞(bao)懸液按1:2比例(li)分(fen)到新(xin)的(de)含8 mL培養基的(de)新(xin)皿中(zhong)或者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)態(tai)良好(hao)時，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集細胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍，棄盡PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計數(shu)。

b、根據細(xi)胞(bao)數量(liang)加入無(wu)血(xue)清(qing)細胞(bao)凍存(cun)液，使(shi)細(xi)胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每(mei)支凍存管凍(dong)存1mL細胞(bao)懸液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存(cun)管做好標(biao)識(shi)。將(jiang)凍存管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲存。記錄凍存管(guan)位(wei)置(zhi)以便下(xia)次(ci)拿取(qu)。

公司正在(zai)出售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

A-431人表(biao)皮癌(ai)細(xi)胞(bao) Human epidermoid carcinoma A-431 cells DMEM+10%FBS 大(da)鼠破(po)骨(gu)細胞(bao)分化(hua)因子(zi)(ODF)ELISA 試劑盒(he) VIP(Mouse Vasoactive Intestinal Peptide)  小(xiao)鼠血(xue)管(guan)活性腸肽 96T

N acetylglucosamine kinase： N-乙酰(xian)基葡(pu)萄(tao)糖激(ji)酶(mei)抗體 CD274 Others Human 人 B7-H1 / CD274 / PD-L1 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

CM-H052人胎盤(pan)絨毛膜(mo)細(xi)胞(bao)培養基100mL 大(da)鼠蘋果(guo)酸脫(tuo)氫(qing)酶(mei)1(MDH1)ELISA試(shi)劑盒(he) ET  大(da)鼠內(nei)毒素(su) 96T

NFIB： 核因子(zi)1B抗體 黑化(hua)大(da)家鼠肺(fei)成(cheng)纖維(wei)細胞(bao);NRm

人海馬(ma)星(xing)形(xing)膠(jiao)質(zhi)細胞(bao)(HA-h)(1×106) 人腦血(xue)管(guan)平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao) Human 大(da)鼠平(ping)足(zu)蛋白(bai)(PDPN)ELISA試劑盒(he) PPAR- Gamma  大(da)鼠過氧(yang)化(hua)物酶(mei)體(ti)增(zeng)殖(zhi)因(yin)子(zi)活化(hua)受體(ti)γ 96T

IDH3B： 異檸檬酸脫氫酶(mei)3 beta亞(ya)基抗體 MSC, 小(xiao)鼠雪(xue)旺(wang)細(xi)胞(bao) 小鼠逆(ni)轉(zhuan)錄病(bing)毒包(bao)裝(zhuang)細(xi)胞(bao)，PT67細胞(bao) P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1](骨髓(sui)瘤細胞(bao))

EDA2R Others Rat 大(da)鼠 XEDAR / EDA2R 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 犬促卵(luan)泡素(su)(FSH)ELISA 試劑盒(he) NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細(xi)胞(bao)核因(yin)子(zi)或稱k基因結(jie)合(he)核(he)因(yin)子(zi)(多肽抗原) 0.5mg

IFIT1： 幹擾素(su)誘導(dao)的(de)三角(jiao)形(xing)四肽重(zhong)復蛋白(bai)1抗體 小(xiao)鼠黑色素(su)瘤瘤株(zhu);B16

CFSC-3H & 5H細胞(bao)，大(da)鼠肝(gan)星(xing)形(xing)細(xi)胞(bao) SK-N-SH(神經(jing)母(mu)細胞(bao)瘤) 大(da)鼠垂(chui)體瘤細胞(bao);GH3 犬促黃(huang)體(ti)生成激(ji)素(su)(LH)ELISA 試劑盒(he) NR2A (Glutamate receptor2A) 谷(gu)酸(suan)受體(ti)(N端(duan)抗原) 0.5mg

IDH3G： 異檸檬酸脫氫酶(mei)gamma亞(ya)基抗體 CD200R1 Others Cynomolgus 食(shi)蟹(xie)猴(hou) CD200R / OX2-R 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

CTX-TNA2大(da)鼠腦(nao)I型星(xing)形(xing)膠(jiao)質(zhi)細胞(bao)LX-2, 人肝星(xing)形(xing)細(xi)胞(bao)株(zhu) 大(da)鼠αS轉(zhuan)移(yi)酶(mei)(α-GST)ELISA試(shi)劑盒(he) MYO/MB(Human Myoglobin)  人肌紅(hong)蛋(dan)白 96T

Phospho-RSK2 (Ser227)： 0酸化(hua)核糖體(ti)S6激(ji)酶(mei)RSK2抗體 HA Others H7N9 甲(jia)型流(liu)感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血(xue)凝(ning)素(su)HA1 (Hemagglutinin) 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

GHS1 金黃(huang)地鼠皮(pi)膚(fu)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao) 大(da)鼠αS轉(zhuan)移(yi)酶(mei)(α-GST)ELISA 試(shi)劑盒(he) cTn- I (Human cardiac troponin I )  人心肌肌鈣(gai)蛋白(bai)Ⅰ 96T

Phospho-RSK2(Tyr529)： 0酸化(hua)核糖體(ti)S6激(ji)酶(mei)RSK2抗體 HCC細(xi)胞(bao)，子(zi)宮高分(fen)化(hua)鱗癌(ai)細(xi)胞(bao) 人T淋巴瘤細胞(bao)Jurkat亞系,Jurkat77細胞(bao) 人癌(ai)細(xi)胞(bao);MDA-MB-157

FCAR Others Rat 大(da)鼠 FCAR / CD89 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠α幹(gan)擾素(su)-2b(IFN-α2b)ELISA 試劑盒(he) Tie1(Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 1)  人血(xue)管(guan)生成素(su)受體(ti)/含免疫球(qiu)蛋(dan)白(bai)樣環和上(shang)皮生長(chang)因(yin)子(zi)樣域酪(lao)酸(suan)激(ji)酶(mei)1 96T

三、培養註(zhu)意(yi)事項(xiang) 

1. 收(shou)到細胞(bao)後首(shou)先觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完好，培(pei)養液(ye)是(shi)否有(you)漏液、渾濁等現象，若(ruo)有(you)上(shang)述(shu)現象 發生請(qing)及時(shi)和我(wo)們聯(lian)系。

2. 仔細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說明(ming)書，了(le)解細(xi)胞(bao)相關(guan)信息，如細胞(bao)形態(tai)、所用培養基、血(xue)清(qing)比例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因子(zi)等，確保細(xi)胞(bao)培養條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由於培(pei)養條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致而(er)導致細胞(bao)出現問(wen)題，責任由(you) 客戶自(zi)行承擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸問(wen)題，部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)由於(yu)溫度(du) 變化(hua)及劇(ju)烈碰(peng)亡破(po)碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現象。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞(bao)可(ke)以消(xiao)化(hua)，懸浮細胞(bao)直(zhi)接(jie)混勻收集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的(de)培(pei)養基重(zhong)懸 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種到新(xin)的(de)培(pei)養瓶(ping)或培養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養。

5. 請(qing)客戶用相同條件(jian)的(de)培(pei)養基用於細胞(bao)培養。

6. 建議(yi)客戶收(shou)到細胞(bao)後前 3 天各拍幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便於(yu)和我(wo)司(si)技術部(bu)溝通 交(jiao)流(liu)。由於運(yun)輸的(de)原(yuan)因(yin)，個別(bie)敏(min)感細(xi)胞(bao)會出現不(bu)穩(wen)定的(de)情(qing)況(kuang)，請(qing)及時(shi)和我(wo)們聯(lian)系，告(gao)知細胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以便我(wo)們的(de)技術人員跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至問(wen)題解決。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供科(ke)研(yan)使(shi)用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用的(de)培(pei)養基 (灌(guan)液培養基) 不(bu)能(neng)再(zai)用來培養細(xi)胞(bao)，請(qing)換用按照說(shuo)明書細(xi)胞(bao)培 養條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制的(de)培(pei)養基來培養細(xi)胞(bao)。     收到(dao)細胞(bao)後第(di)壹(yi)次(ci)傳代建議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或者 2 個 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿。