導致(zhi)細胞生長緩(huan)慢(man)的(de)常(chang)見(jian)原因(yin)：
 

　　壹、培養(yang)基可(ke)能(neng)缺(que)乏(fa)細(xi)胞生長所(suo)需(xu)的(de)某(mou)種(zhong)因(yin)子(zi)，出(chu)現這(zhe)種(zhong)情況壹(yi)般(ban)都是(shi)小(xiao)夥(huo)伴們購(gou)買細(xi)胞後沒(mei)有按(an)照ATCC或(huo)國(guo)內(nei)細(xi)胞庫的(de)方(fang)法(fa)配制培養(yang)基，就使(shi)用實驗(yan)室師兄師姐用的(de)培(pei)養(yang)基去養(yang)細胞。處理方法(fa)壹般(ban)來說就是(shi)按(an)照方法(fa)配制培養(yang)基，或(huo)是(shi)直(zhi)接(jie)購(gou)買所(suo)養(yang)細胞專用的(de)培(pei)養(yang)基。
 

　　二(er)、細菌(jun)、支(zhi)原體(ti)、真(zhen)菌(jun)等汙(wu)染(ran)：雖然現在培養(yang)基裏(li)面壹(yi)般(ban)都會(hui)添加雙(shuang)抗(kang)(和)，但(dan)是(shi)如果(guo)無菌(jun)操作(zuo)觀念不(bu)強，依(yi)然很(hen)有可(ke)能(neng)導致(zhi)汙(wu)染(ran)。處(chu)理方法(fa)：如果(guo)有凍存(cun)的(de)細(xi)胞，就可(ke)以(yi)把(ba)汙(wu)染(ran)的(de)細(xi)胞丟棄處理(li)，當然，丟棄不是(shi)隨(sui)意扔(reng)進垃圾桶(tong)就可(ke)以(yi)了，要(yao)按(an)照實驗(yan)室生物安全規(gui)範(fan)操(cao)作(zuo)進行(xing)。然後重(zhong)新(xin)復蘇(su)培(pei)養(yang)，建議把(ba)培(pei)養(yang)箱進行(xing)全面的(de)消(xiao)毒處(chu)理。若(ruo)是(shi)沒(mei)有凍存(cun)，而這(zhe)種(zhong)細胞又是很(hen)珍貴(gui)的(de)，常(chang)見(jian)的(de)處(chu)理方法(fa)就是(shi)藥物處理：細(xi)菌(jun)汙(wu)染(ran)加5-10倍(bei)的(de)抗(kang)生素(su)；真菌(jun)汙(wu)染(ran)就(jiu)加抗(kang)真(zhen)菌(jun)藥物；支(zhi)原體(ti)汙(wu)染(ran)就(jiu)加抗(kang)支(zhi)原體(ti)藥物，具體(ti)藥物可(ke)以(yi)咨詢(xun)相關(guan)公司(si)的(de)技(ji)術支(zhi)持(chi)，他(ta)們(men)會(hui)比較專業(ye)。
 

　　三(san)、很(hen)多(duo)細(xi)胞的(de)生長存(cun)在密度依(yi)賴性，如果(guo)傳代後，細(xi)胞的(de)密(mi)度太(tai)小(xiao)，也是(shi)會(hui)影響到細胞生長的(de)。這(zhe)個(ge)時候(hou)沒(mei)什麽特(te)別(bie)好的(de)處(chu)理辦(ban)法(fa)，只得(de)勤換液(ye)。如(ru)果細(xi)胞培養(yang)瓶(ping)使(shi)用的(de)是(shi)T75倒可(ke)以(yi)消(xiao)化(hua)、離(li)心(xin)、重(zhong)懸，然後接(jie)種到T25的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中培養(yang)。
 

　　四、凍存(cun)細胞DMSO(二(er)甲基(ji)亞碸)加的(de)量不正(zheng)確(que)，沒(mei)有逐(zhu)步梯(ti)度(du)降溫。下次(ci)復蘇(su)後的(de)細(xi)胞總是長不(bu)好(hao)。處(chu)理方(fang)法(fa)：按(an)照的(de)凍存(cun)方式配制凍存(cun)液。有的(de)細(xi)胞適合10%的(de)DMSO，有(you)的(de)細(xi)胞適合5%；嚴(yan)格遵(zun)守(shou)逐(zhu)步梯(ti)度(du)降溫原則(ze)，細胞復蘇(su)時(shi)快速解(jie)凍。
 

　　五(wu)、換液(ye)間(jian)隔(ge)時(shi)間(jian)太(tai)長，有的(de)小(xiao)夥(huo)伴養(yang)細胞真的(de)很(hen)“佛系”，想起(qi)了就去換個(ge)液(ye)，信奉壹句話(hua)“妳(ni)已(yi)經是(shi)成(cheng)熟的(de)細(xi)胞了，應(ying)該(gai)學(xue)著自(zi)己(ji)覓(mi)食(shi)，成(cheng)長”。這(zhe)種(zhong)情況下細(xi)胞培養(yang)瓶(ping)中就會(hui)積累(lei)很(hen)多(duo)細(xi)胞代謝(xie)廢物(wu)，影響細(xi)胞活(huo)性。建(jian)議：勤(qin)換液(ye)
 

　　六、細(xi)胞“消(xiao)化(hua)”時(shi)間(jian)過長，對細胞造成(cheng)損傷(shang)；另外中壹般(ban)會(hui)添加EDTA，螯(ao)合(he)鈣(gai)離(li)子(zi)，影響細(xi)胞貼壁(bi)。處理方法(fa)：控(kong)制好細胞“消(xiao)化(hua)”時(shi)間(jian)，盡(jin)量去除(chu)幹(gan)凈和其(qi)中的(de)EDTA.
 

　　七(qi)、PH：細胞需(xu)要(yao)在壹定的(de)PH值(zhi)下生長，這(zhe)個(ge)道(dao)理(li)小(xiao)夥(huo)伴們都懂(dong)。但(dan)是很(hen)多(duo)時(shi)候(hou)PH都是(shi)我(wo)們忽(hu)略(lve)的(de)，也(ye)是小(xiao)編今(jin)天(tian)要(yao)強調的(de)壹(yi)點(dian)。我(wo)們(men)使(shi)用的(de)培(pei)養(yang)基可(ke)能(neng)會(hui)隨(sui)著使(shi)用時間(jian)的(de)加長(chang)而緩(huan)慢變堿哦！(當然，也有(you)可(ke)能(neng)會(hui)變(bian)酸(suan)，但常見(jian)的(de)是(shi)變堿)，壹般(ban)來說，過堿的(de)培(pei)養(yang)基會影響到細胞生長。處(chu)理(li)方法(fa)：簡單(dan)的(de)就(jiu)是換新(xin)鮮培(pei)養(yang)基唄！當然，如果(guo)有(you)時間(jian)和有(you)條(tiao)件(jian)也(ye)可(ke)以(yi)調壹(yi)調培(pei)養(yang)基的(de)PH值(zhi)。