COLO668細(xi)胞

公(gong)司(si)產品僅(jin)供科研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用、不(bu)得(de)用於臨床診(zhen)斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：

1）細(xi)胞生長至覆蓋(gai)培(pei)養瓶的 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中的培(pei)養液，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中，倒置顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養

液終止消化，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將懸液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱細(xi)胞用 1-2ml 培(pei)養基重懸，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例進行分(fen)瓶傳(chuan)代，最(zui)後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養箱中培(pei)養；

壹、商品介(jie)紹(shao)：

2、細胞凍(dong)存：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆蓋(gai)培(pei)養瓶的 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中的培(pei)養液，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中，倒置顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養液終

止消化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將懸液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞(bao)，並放置於凍(dong)存管(guan)中(zhong)；

4）先將細(xi)胞凍(dong)存管(guan)放置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其(qi)移入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液氮(dan)中(zhong)進行長期保(bao)存。使用程序

降溫盒(he)可(ke)直接(jie)放入(ru)-80℃。

二、細胞培(pei)養操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞：以(yi)下細(xi)胞培(pei)養凍(dong)存處(chu)理(li)僅(jin)供參(can)考，具(ju)體操作(zuo)步驟以(yi)隨(sui)貨產品說(shuo)明(ming)書為(wei)主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液的凍(dong)存管(guan)在 37℃水浴中(zhong)迅速搖(yao)晃解凍(dong)，加4 mL培(pei)養基混(hun)合均(jun)勻。在1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，加1-2 mL培(pei)養基後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入(ru)含適(shi)量培(pei)養基的培(pei)養瓶中培(pei)養過夜(ye)（或(huo)將細(xi)胞懸液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約8 mL培(pei)養基，培(pei)養過夜(ye)）。第二天換液(ye)並檢查細胞密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果細胞密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進行傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養上清，用不(bu)含鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的PBS潤(run)洗細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中，使消化液浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將培(pei)養瓶置於37℃培(pei)養箱中消化1-2 min（視細(xi)胞情況(kuang)而(er)定），然(ran)後(hou)在顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞(bao)消化情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變圓(yuan)並脫(tuo)落，迅速拿回操作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲幾下(xia)培(pei)養瓶後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養基終止消化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養液後(hou)吹(chui)勻。

c、將細(xi)胞懸液按(an)1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培(pei)養基的新(xin)皿(min)中(zhong)或者(zhe)瓶中，置(zhi)於培(pei)養箱中培(pei)養。 3) 細胞凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可(ke)進行細(xi)胞凍(dong)存。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集細胞及細胞(bao)培(pei)養液，裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進行細(xi)胞計數。

b、根(gen)據(ju)細胞(bao)數量加(jia)入(ru)無血(xue)清細胞凍(dong)存液(ye)，使(shi)細(xi)胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞(bao)懸液，註(zhu)意凍(dong)存管(guan)做(zuo)好標識。將凍(dong)存管(guan)放入(ru)-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入(ru)液氮(dan)灌儲(chu)存。記錄凍(dong)存管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便(bian)下次(ci)拿取(qu)。

公(gong)司(si)正(zheng)在出售的產品：

植(zhi)物過(guo)氧化氫(qing)（HYDROGEN PEROXIDE）活(huo)性(xing)比(bi)色法定量檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)

[γ32P]ATP激酶標記法PCR產物處(chu)理(li)試(shi)劑盒(he)

標準(zhun)曲線定量PCR擴增(zeng)檢測(ce)試(shi)劑盒(he)

石蠟(la)切片(pian)組(zu)織(zhi)TNF BETA蛋白表(biao)達熒光顯微(wei)鏡(jing)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)

通(tong)用型氮(dan)含(han)量克(ke)爾道(dao)（Kjeldahl）法定量檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)

活(huo)體細胞(bao)半-9（CASPASE-9）活(huo)性(xing)原(yuan)位(wei)熒光染(ran)色(se)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)

組織(zhi)RCT激酶活(huo)性(xing)定量檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)（A/B/C）

冰凍(dong)切片(pian)細(xi)胞(bao)有(you)絲(si)分(fen)裂(lie)熒光顯微(wei)鏡(jing)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)

細胞(bao)蘇(su)木(mu)素伊紅(hong)染(ran)色(se)試(shi)劑盒(he)

細胞(bao)短鏈脂酰氧化酶（acyl-CoA oxidase）

細胞(bao)銅(tong)熒光（CSI）染(ran)色(se)試(shi)劑盒(he)

水源(yuan)樣品微(wei)囊藻(zao)毒(du)素(su)（Microcystin）熒光定量檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)

冰凍(dong)切片(pian)組(zu)織(zhi)RyR受體蛋白表(biao)達NBT顯色光學(xue)顯微(wei)鏡(jing)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)

無脊(ji)椎(zhui)動(dong)物和(he)昆蟲(chong)體液基(ji)質(zhi)金(jin)屬（MMP）總活(huo)性(xing)比(bi)色法定量檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)

動(dong)物骨(gu)組織(zhi)細(xi)胞(bao)分離(li)培(pei)養試(shi)劑盒(he)

早期B淋巴細(xi)胞因(yin)子(zi)1抗體

鈣粘(zhan)蛋白6抗體

驅動(dong)蛋白家族成(cheng)員21B抗體

JNK相互(hu)作(zuo)用蛋白4抗體

細胞(bao)骨(gu)架(jia)銜接(jie)蛋白BIN3抗體

ZC3H14蛋白抗體

跨膜(mo)蛋白87A抗體

COLO668細胞APC標記小鼠CD117單克(ke)隆(long)抗體

鋅指(zhi)蛋白784抗體

三(san)、培(pei)養註意事項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)首先觀察(cha)細胞(bao)瓶是否(fou)完(wan)好，培(pei)養液是否(fou)有(you)漏(lou)液、渾濁等現(xian)象，若(ruo)有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象 發生(sheng)請及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系。

2. 仔細(xi)閱讀細胞說(shuo)明(ming)書，了(le)解細胞(bao)相關信息(xi)，如(ru)細胞形(xing)態(tai)、所(suo)用培(pei)養基、血清比例、所(suo)需 細(xi)胞因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保細胞(bao)培(pei)養條(tiao)件壹(yi)致，若(ruo)由(you)於培(pei)養條(tiao)件不(bu)壹致而(er)導(dao)致細胞出現(xian)問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由 客戶自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭細(xi)胞瓶表(biao)面，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分細(xi)胞(bao)由於溫度(du) 變化及劇烈碰(peng)亡(wang)破(po)碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常現(xian)象。觀察(cha)好細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可(ke)以(yi)消化，懸浮細胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻(yun)收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的培(pei)養基重懸 細胞(bao)，並接種到(dao)新(xin)的培(pei)養瓶或培(pei)養皿(min)中(zhong)，置於培(pei)養箱中進行培(pei)養。

5. 請客戶用相同(tong)條(tiao)件的培(pei)養基用於細胞培(pei)養。

6. 建(jian)議客戶收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)前(qian) 3 天各拍(pai)幾張(zhang)細(xi)胞照片(pian)，記錄細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和(he)我司(si)技(ji)術部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流(liu)。由於運輸(shu)的原(yuan)因(yin)，個別(bie)敏感細(xi)胞會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩定的情況(kuang)，請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的具(ju)體情況(kuang)，以(yi)便(bian)我們(men)的技(ji)術人(ren)員跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至問(wen)題(ti)解決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供科研(yan)使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸(shu)用的培(pei)養基 (灌液(ye)培(pei)養基) 不(bu)能再用來(lai)培(pei)養細胞，請換用按(an)照(zhao)說明(ming)書細(xi)胞培(pei) 養條(tiao)件新(xin)配制的培(pei)養基來培(pei)養細胞。     收到(dao)細(xi)胞後(hou)第壹次(ci)傳(chuan)代建(jian)議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代就是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。