實(shi)驗(yan)原(yuan)理(li)：

大(da)鼠(shu)γ氨(an)基(ji)丁(ding)酸(suan)（GABA）試劑(ji)盒采用(yong)雙抗體壹(yi)步夾(jia)心(xin)法(fa)酶聯(lian)免(mian)疫吸(xi)附(fu)試驗(yan)（ELISA）。往(wang)預先包(bao)被(bei)大(da)鼠(shu)γ氨(an)基(ji)丁(ding)酸(suan)（GABA）捕(bu)獲(huo)抗體的(de)包被(bei)微(wei)孔中，依(yi)次加(jia)入標(biao)本、標(biao)準品(pin)、HRP標(biao)記(ji)的(de)檢測抗(kang)體，經過(guo)溫(wen)育(yu)並*洗(xi)滌(di)。用(yong)底(di)物(wu)TMB顯(xian)色，TMB在(zai)過(guo)氧(yang)化(hua)物酶的(de)催(cui)化下(xia)轉化(hua)成(cheng)藍色，並在(zai)酸(suan)的(de)作用(yong)下(xia)轉化(hua)成(cheng)終(zhong)的(de)黃色。顏(yan)色的(de)深(shen)淺和樣(yang)品中的(de)大鼠(shu)γ氨(an)基(ji)丁(ding)酸(suan)（GABA）呈正相關(guan)。用(yong)酶(mei)標(biao)儀在(zai)450nm 波(bo)長下(xia)測定吸光(guang)度(du)（OD 值），計算(suan)樣(yang)品濃度(du)。

樣(yang)本處理及(ji)要求(qiu)：

1.  血(xue)清：將(jiang)收(shou)集於(yu)血(xue)清分離(li)管(guan)的(de)全(quan)血(xue)標(biao)本在(zai)室(shi)溫(wen)放置2小時(shi)或(huo)4℃過(guo)夜，然(ran)後1000×g離(li)心(xin)20 分(fen)鐘(zhong)，取上(shang)清即(ji)可(ke)，或(huo)將(jiang)上(shang)清置於(yu)-20℃或(huo)-80℃保(bao)存，但應避(bi)免(mian)反復(fu)凍融。

2.  血(xue)漿(jiang)：用(yong)EDTA或(huo)肝素(su)作(zuo)為(wei)抗凝(ning)劑(ji)采集標(biao)本，並將(jiang)標(biao)本在(zai)采(cai)集後的(de)30分鐘(zhong)內於(yu)2-8℃ 1000×g離(li)心(xin)15分(fen)鐘(zhong)，取上(shang)清即(ji)可(ke)檢測，或(huo)將(jiang)上(shang)清置於(yu)-20℃或(huo)-80℃保(bao)存，但應避(bi)免(mian)反復(fu)凍融。

3.  組(zu)織(zhi)勻漿(jiang)：用(yong)預冷(leng)的(de)PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗(xi)組織(zhi)，去除(chu)殘(can)留(liu)血(xue)液（勻(yun)漿(jiang)中(zhong)裂(lie)解的(de)紅細胞(bao)會(hui)影(ying)響(xiang)測(ce)量結(jie)果(guo)），稱(cheng)重(zhong)後(hou)將(jiang)組(zu)織(zhi)剪(jian)碎(sui)。將(jiang)剪(jian)碎(sui)的(de)組織(zhi)與對(dui)應(ying)體(ti)積(ji)的(de)PBS（壹(yi)般按(an)1:9的(de)重(zhong)量體(ti)積(ji)比，比如(ru)1g的(de)組織(zhi)樣(yang)品對(dui)應(ying)9mL的(de)PBS，具(ju)體體(ti)積(ji)可(ke)根據實(shi)驗(yan)需(xu)要(yao)適當(dang)調(tiao)整，並做好記(ji)錄(lu)。推薦在(zai)PBS中(zhong)加(jia)入蛋(dan)白酶(mei)抑制劑）加(jia)入玻(bo)璃勻(yun)漿(jiang)器(qi)中(zhong)，於(yu)冰(bing)上充(chong)分研(yan)磨(mo)。為(wei)了(le)進壹(yi)步裂(lie)解(jie)組(zu)織細胞(bao)，可(ke)以對(dui)勻(yun)漿(jiang)液(ye)進行超(chao)聲(sheng)破碎(sui)，或(huo)反復(fu)凍融。後(hou)將(jiang)勻(yun)漿(jiang)液(ye)於(yu)5000×g離(li)心(xin)5~10分(fen)鐘(zhong)，取上(shang)清檢測。

4.  細胞(bao)培養(yang)物(wu)上(shang)清或(huo)其它生物標(biao)本：請1000×g離(li)心(xin)20分(fen)鐘(zhong)，取上(shang)清即(ji)可(ke)檢測，或(huo)將(jiang)上(shang)清置於(yu)-20℃或(huo)-80℃保(bao)存，但應避(bi)免(mian)反復(fu)凍融。

註(zhu)：標(biao)本溶血(xue)會影(ying)響(xiang)後(hou)檢測結(jie)果(guo)，因此溶血(xue)標(biao)本不宜進行此(ci)項(xiang)檢測。