D283 Med人腦髓(sui)母(mu)細胞瘤(liu)細(xi)胞

公司(si)產品僅(jin)供科研(yan)研(yan)究使(shi)用、不(bu)得用於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷！

壹(yi)、商(shang)品介(jie)紹：

二、細胞培(pei)養操(cao)作

1) 復蘇(su)細胞：以(yi)下細(xi)胞培(pei)養凍(dong)存處理僅供參考(kao)，具(ju)體操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產(chan)品說明書(shu)為(wei)主。將含有(you)1 mL細(xi)胞懸液的凍存管(guan)在(zai) 37℃水浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解凍(dong)，加4 mL培(pei)養基(ji)混合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心3 min，棄(qi)去上(shang)清液，加1-2 mL培養基(ji)後吹勻(yun)。然後(hou)將所(suo)有(you)細(xi)胞懸液加入含適(shi)量培養基(ji)的培養瓶(ping)中(zhong)培(pei)養過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞懸液加入10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養基(ji)，培養過(guo)夜(ye)）。第二天換(huan)液並檢(jian)查細(xi)胞密(mi)度。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：如(ru)果細(xi)胞密(mi)度達(da) 80%-90%，即可進行傳(chuan)代(dai)培(pei)養。

    a、棄(qi)去培養上(shang)清，用不(bu)含鈣、鎂(mei)離子的(de)PBS潤洗細胞1-2次。        

    b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸潤所(suo)有(you)細(xi)胞，將(jiang)培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱(xiang)中(zhong)消化1-2 min（視細胞情(qing)況而定(ding)），然後(hou)在顯(xian)微鏡下觀(guan)察細(xi)胞消(xiao)化(hua)情(qing)況，若(ruo)細胞大部(bu)分(fen)變圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿回(hui)操作(zuo)臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下培(pei)養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養基(ji)終止消(xiao)化。輕輕打勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌離心管(guan)中，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去上(shang)清液，補加1-2 mL培養液後吹勻(yun)。        

     c、將(jiang)細(xi)胞懸液按1:2比例(li)分到(dao)新(xin)的含8 mL培養基(ji)的新(xin)皿中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞凍(dong)存(cun)：待(dai)細胞生(sheng)長狀態良(liang)好(hao)時(shi)，可進行細(xi)胞凍(dong)存(cun)。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集(ji)細胞及(ji)細胞培(pei)養液，裝入無菌離心管(guan)中，1000 rpm條件(jian)下離心4 min，棄(qi)去上(shang)清液，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進行細(xi)胞計(ji)數。

     b、根(gen)據細(xi)胞數(shu)量(liang)加入無血(xue)清細胞凍(dong)存(cun)液，使(shi)細(xi)胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管凍存1mL細(xi)胞懸液，註意凍(dong)存(cun)管(guan)做好(hao)標(biao)識。將凍存管(guan)放(fang)入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮灌(guan)儲存。記錄凍存管(guan)位(wei)置以(yi)便(bian)下次拿取(qu)。  

三、培(pei)養註(zhu)意事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細胞後(hou)首(shou)先觀(guan)察細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養液是否有(you)漏液、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述現(xian)象(xiang) 發生請(qing)及(ji)時和我(wo)們聯系。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞說明書(shu)，了解細(xi)胞相(xiang)關(guan)信息(xi)，如(ru)細(xi)胞形(xing)態、所(suo)用培(pei)養基(ji)、血(xue)清比例(li)、所(suo)需(xu) 細胞因(yin)子等(deng)，確(que)保細胞培(pei)養條(tiao)件(jian)壹致，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養條(tiao)件(jian)不(bu)壹致而導致細(xi)胞出(chu)現(xian)問(wen)題，責(ze)任由(you) 客(ke)戶(hu)自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細(xi)胞瓶(ping)表面，顯(xian)微鏡下觀(guan)察細(xi)胞狀態。因(yin)運輸(shu)問(wen)題，部(bu)分細(xi)胞由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變化及(ji)劇烈碰(peng)亡破碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細(xi)胞狀態後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞可以(yi)消(xiao)化(hua)，懸浮細(xi)胞直(zhi)接(jie)混勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮的(de)培(pei)養基(ji)重懸 細胞，並(bing)接(jie)種到新(xin)的培養瓶(ping)或(huo)培(pei)養皿(min)中，置於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)進行培(pei)養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用相(xiang)同條件(jian)的培養基(ji)用於(yu)細(xi)胞培(pei)養。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收到(dao)細(xi)胞後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾張(zhang)細(xi)胞照(zhao)片(pian)，記錄細胞狀態，便(bian)於和我(wo)司技術部溝(gou)通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運(yun)輸(shu)的原(yuan)因(yin)，個別(bie)敏(min)感細胞會出(chu)現(xian)不(bu)穩定的(de)情(qing)況，請(qing)及(ji)時和我(wo)們聯系，告知細(xi)胞 的(de)具(ju)體情(qing)況，以(yi)便(bian)我(wo)們的技術人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直至(zhi)問(wen)題解(jie)決。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供(gong)科研(yan)使(shi)用。

8. 備註：運(yun)輸用的(de)培(pei)養基(ji) (灌(guan)液培養基(ji)) 不(bu)能再用來(lai)培養細(xi)胞，請(qing)換(huan)用按(an)照(zhao)說明書(shu)細(xi)胞培(pei) 養條(tiao)件(jian)新(xin)配制的培養基(ji)來(lai)培養細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第壹次傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿。

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肝(gan)竇(dou)內皮細胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(1ml) 大鼠(shu)氧鯊(sha)烯(xi)環(huan)化酶(mei)(OSC)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Beta-HCG 人絨(rong)毛(mao)膜(mo)(夾(jia)心法(fa)壹(yi)/二步法(fa)) 96T

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TE671 subline No.2(人橫紋(wen)肌(ji)肉(rou)瘤(liu)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 人甲(jia)狀腺刺(ci)激免(mian)疫球(qiu)蛋白(bai)(TSI)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 Tubulin-Alpha 微管蛋白(bai)(抗(kang)原) 0.5mg

Hsc70： 熱(re)休(xiu)克(ke)蛋白(bai)71抗(kang)體 CD40LG Others Canine 狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細胞裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao))

人臍帶(dai)間質(zhi)幹(gan)細(xi)胞 Human umbilical cord mesenchymal stem cells 人甲(jia)狀旁腺激素相(xiang)關(guan)蛋白(bai)(PTHrP)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 Cav-1/ETM1 peptide 細胞質(zhi)膜(mo)微(wei)囊(nang)蛋(dan)白(bai)-1抗(kang)原 0.5mg

D283 Med人腦髓(sui)母(mu)細胞瘤(liu)細(xi)胞PMP22： 外(wai)周髓(sui)鞘蛋白(bai)-22抗(kang)體 IL2RB Others Mouse 小鼠(shu) CD122 / IL2RB / IL2 Receptor beta 人細胞裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao))

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SiHa人子宮(gong)頸鱗(lin)癌細胞 SiHa human uterine cervical squamous cell carcinoma MEM培(pei)養基(ji)(GIBCO)+10%FBS 大鼠(shu)胱硫醚γ裂(lie)解(jie)酶(mei)(CSE)ELISA試(shi)劑(ji)盒 ssDNA(human single stranded DNA Antibody)  人抗(kang)單鏈(lian)DNA抗(kang)體 PRSS8 Others Human 人 Prostasin / Prss8 人細胞裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao))