DAOY人(ren)髓母細(xi)胞瘤(liu)細(xi)胞

公(gong)司(si)產品(pin)僅供(gong)科研研究使用、不得(de)用於(yu)臨床(chuang)診斷(duan)！

壹(yi)、商(shang)品(pin)介紹：

二、細(xi)胞培養操作(zuo)

1) 復(fu)蘇細(xi)胞：以(yi)下細(xi)胞培養凍存處理僅(jin)供(gong)參考(kao)，具體操作(zuo)步(bu)驟以隨(sui)貨(huo)產品(pin)說明(ming)書(shu)為主。將(jiang)含有(you)1 mL細(xi)胞懸(xuan)液的(de)凍存管在 37℃水浴(yu)中迅(xun)速(su)搖晃(huang)解(jie)凍，加4 mL培養基(ji)混合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心3 min，棄去上清(qing)液(ye)，加1-2 mL培養基(ji)後(hou)吹勻。然後將(jiang)所有細(xi)胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)含適(shi)量(liang)培養基(ji)的(de)培養瓶中(zhong)培養過夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養基(ji)，培養過夜）。第(di)二天(tian)換液並檢查細(xi)胞密度(du)。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代：如果(guo)細(xi)胞密度(du)達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代培養。

    a、棄去培養上清(qing)，用不含鈣(gai)、鎂(mei)離子(zi)的PBS潤(run)洗細(xi)胞1-2次(ci)。        

    b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶中(zhong)，使消(xiao)化(hua)液浸潤(run)所有細(xi)胞，將(jiang)培養瓶置(zhi)於(yu)37℃培養箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視細(xi)胞情況而(er)定），然後在(zai)顯(xian)微鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞消(xiao)化(hua)情況，若(ruo)細(xi)胞大(da)部分變圓並脫落(luo)，迅(xun)速拿(na)回(hui)操作(zuo)臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下培養瓶後(hou)加(jia)2-3ml培養基(ji)終(zhong)止消(xiao)化(hua)。輕輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去上清(qing)液(ye)，補加1-2 mL培養液後(hou)吹(chui)勻。        

     c、將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液按(an)1:2比例分(fen)到(dao)新(xin)的含8 mL培養基(ji)的(de)新(xin)皿中或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中培養。 3) 細(xi)胞凍存：待(dai)細(xi)胞生長狀態良好時，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞凍存。下(xia)面 T25 瓶為例；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及(ji)細(xi)胞培養液，裝入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心4 min，棄去上清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍，棄盡PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞計(ji)數。

     b、根(gen)據細(xi)胞數量(liang)加入(ru)無(wu)血清(qing)細(xi)胞凍存液(ye)，使細(xi)胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍存管凍存1mL細(xi)胞懸(xuan)液，註(zhu)意(yi)凍存管做好標識(shi)。將(jiang)凍存管放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄(lu)凍存管位(wei)置(zhi)以(yi)便下(xia)次(ci)拿(na)取(qu)。  

三、培養註意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)首先(xian)觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是否完好，培養液是(shi)否有漏液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象，若(ruo)有(you)上述(shu)現(xian)象 發(fa)生請(qing)及(ji)時和(he)我們聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞說(shuo)明書(shu)，了(le)解細(xi)胞相關信息，如細(xi)胞形(xing)態、所(suo)用培養基(ji)、血清(qing)比例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞因(yin)子等(deng)，確(que)保細(xi)胞培養條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由於(yu)培養條(tiao)件(jian)不壹(yi)致而(er)導(dao)致細(xi)胞出(chu)現(xian)問題，責(ze)任(ren)由 客(ke)戶(hu)自行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精擦(ca)拭細(xi)胞瓶(ping)表面，顯微(wei)鏡下(xia)觀察細(xi)胞狀(zhuang)態。因(yin)運輸(shu)問題，部分細(xi)胞由於(yu)溫度(du) 變化(hua)及劇(ju)烈碰亡(wang)破碎形(xing)成(cheng)碎片(pian)，是(shi)正常(chang)現(xian)象。觀(guan)察好細(xi)胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒精消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞可(ke)以消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮細(xi)胞直(zhi)接(jie)混勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮的(de)培養基(ji)重懸(xuan) 細(xi)胞，並接(jie)種到(dao)新(xin)的培養瓶或(huo)培養皿中，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中進(jin)行(xing)培養。

5. 請客(ke)戶(hu)用相同條(tiao)件(jian)的培養基(ji)用於(yu)細(xi)胞培養。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)前 3 天(tian)各拍幾(ji)張細(xi)胞照(zhao)片，記錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和(he)我司(si)技(ji)術(shu)部溝通(tong) 交流。由於(yu)運輸(shu)的原(yuan)因(yin)，個(ge)別敏(min)感(gan)細(xi)胞會(hui)出現(xian)不穩(wen)定的情況，請及(ji)時(shi)和(he)我們聯(lian)系(xi)，告知(zhi)細(xi)胞 的(de)具體(ti)情況，以便(bian)我們的技(ji)術(shu)人員跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪直至問題解(jie)決。

7. 該細(xi)胞僅(jin)供科(ke)研使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的(de)培養基(ji) (灌(guan)液培養基(ji)) 不能(neng)再用來(lai)培養細(xi)胞，請(qing)換用按(an)照(zhao)說明書(shu)細(xi)胞培 養條(tiao)件(jian)新(xin)配制(zhi)的培養基(ji)來(lai)培養細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代建(jian)議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。

公(gong)司(si)正(zheng)在出售(shou)的產品(pin)：

Mv.1.Lu(NBL-7)貂肺(fei)上皮(pi)細(xi)胞 Mv.1.Lu (NBL-7) mink lung epithelial cells MEM培養基(ji)(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠(shu)氧化(hua)低密度(du)脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Plg (Rabbit Plasminogen)  兔(tu)子(zi)纖(xian)溶酶原(yuan) 96T

MDR1： 多藥(yao)耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體 GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨細(xi)胞病(bing)毒(du) HCMV Glycoprotein B 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

肝(gan)動(dong)脈內皮(pi)細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次(ci)方(1ml) 大鼠(shu)氧化(hua)低密度(du)脂蛋白抗體(OLAb)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 Alb 白蛋白(夾心(xin)法(fa)壹(yi)步(bu)法(fa)) 96T

MIXL1： 同源(yuan)結構蛋白1抗體 小鼠(shu)畸胎(tai)瘤(liu)細(xi)胞;F9

IM-9(人外(wai)周(zhou)血B淋巴細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 遲緩(huan)真(zhen)桿(gan)菌/遲(chi)緩(huan)埃(ai)格特菌 大(da)鼠(shu)氧化(hua)低密度(du)脂蛋白(OxLDL)ELISA試(shi)劑(ji)盒 HAV IgM 抗-HAV IgM(夾心(xin)法 壹(yi)步(bu)法(fa))

Sars結構蛋白表達株;293 001B 人(ren)甲(jia)酰(xian)甲(jia)(fMet)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 Tubulin- Beta 微(wei)管蛋白(抗原(yuan)) 0.5mg

H9N1 Hemagglutinin： A型(xing)流感(gan)病(bing)毒(du)H9N1血凝素型(xing)抗體 人(ren)APP-PS1雙(shuang)基(ji)因(yin)轉(zhuan)染(ran)細(xi)胞株(zhu)(HEK293);APP-PS1

Hs 578T(人癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 正常(chang)細(xi)胞 Sars結(jie)構蛋白表達株;293sars181A 人(ren)甲(jia)肟(wo)前列(lie)腺2(PGD2-MOX)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 NAIF1 protein( CB12-327) 核雕(diao)亡(wang)誘(you)導(dao)因(yin)子蛋白1(多肽(tai)) 0.5mg

HPV33 E7： 人類(lei)狀(zhuang)瘤(liu)病(bing)毒(du)33抗體 人(ren)肺間充質(zhi)幹細(xi)胞cDNAHPMSC cDNA

TM4(正常(chang)小鼠(shu)Sertoli細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 人甲(jia)基(ji)化(hua)酶(Methylase)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 cath-B/CB(Cathepsin B) 組(zu)織(zhi)蛋白酶B抗原(yuan) 0.5mg

DAOY人髓母細(xi)胞瘤(liu)細(xi)胞KU812 人外(wai)周(zhou)血嗜(shi)堿性白血病(bing)細(xi)胞 大(da)鼠(shu)關聯(lian)血漿蛋白A(PAPPA)ELISA試(shi)劑(ji)盒 dsDNA(Human anti-double stranded DNA)  人(ren)抗雙(shuang)鏈(lian)DNA抗體 PC-12細(xi)胞，大(da)鼠(shu)腎上腺嗜(shi)鉻細(xi)胞瘤(liu) 人腎(shen)癌細(xi)胞,KC細(xi)胞 直(zhi)腸(chang)癌組織(zhi)源性原(yuan)代細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次(ci)方(1ml)/1ml

TFPI2 Others Mouse 小鼠(shu) TFPI2 / PP5 人細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 大鼠(shu)固(gu)酮合(he)酶(mei)(ALDOS)ELISA試(shi)劑(ji)盒 PAL  大(da)鼠(shu)L苯解酶 96T

progesterone receptor： 孕激(ji)素(su)受(shou)體抗體 CM-M064小鼠(shu)前列腺上皮(pi)細(xi)胞培養基(ji)100mL

MS751人子(zi)宮頸(jing)表皮(pi)癌細(xi)胞 MS751 human cervical epidermoid carcinoma cells MEM培養基(ji)(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠(shu)固(gu)酮(ALD)ELISA試(shi)劑(ji)盒 AnuA-IgG(Human anti-nucleosome antibody IgG)  人(ren)抗核小體抗體 PLAU Others Human 人(ren) uPA / PLAU 人細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

大鼠(shu)肺細(xi)胞;WL1 大(da)鼠(shu)固(gu)酮(ALD)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 sCD30L  大(da)鼠(shu)可溶性CD30配體(ti) 96T