抗(kang)體的(de)保(bao)存(cun):
1、酶(mei)聯抗(kang)體(ti):保(bao)存(cun)在(zai)4℃,避(bi)免凍存(cun)以(yi)降低或喪失酶(mei)活(huo)性;
2、偶(ou)聯抗(kang)體(ti):需保(bao)存(cun)在(zai)棕(zong)色管或是用(yong)錫(xi)箔紙避(bi)光於4℃保(bao)存(cun),熒(ying)光抗體(ti)對(dui)光敏感(gan),操(cao)作(zuo)時(shi)應嚴格避(bi)光;
3、IgG3的(de)同(tong)型(xing)對(dui)照(zhao):保(bao)存(cun)於(yu)4℃避(bi)免凍存(cun),反復(fu)凍融(rong)會導(dao)致抗(kang)體(ti)變性(xing),形成多聚體;
抗體(ti)保(bao)存(cun)其他(ta)信(xin)息(xi):
1、加(jia)入甘(gan)油(you):對(dui)於大多(duo)數抗(kang)體,可(ke)加入50%的(de)甘(gan)油(you)來(lai)避(bi)免反復(fu)凍融(rong)。甘(gan)油(you)在(zai)-20℃可降低冰(bing)點,但(dan)不建議(yi)加(jia)入甘(gan)油(you)的(de)抗體(ti)保(bao)存(cun)於(yu)-80℃,該溫度已(yi)經(jing)超過(guo)了甘(gan)油(you)的(de)冰(bing)點;
2、加蛋白(bai)保(bao)護劑:蛋白(bai)在高濃(nong)度(du)時不易降解(jie),正如有些抗體(ti)會(hui)加入BSA作為穩(wen)定(ding)劑的(de)原因(yin),同(tong)時加(jia)入蛋白(bai)也可減(jian)少(shao)抗體(ti)由(you)於管壁(bi)吸(xi)附(fu)所造(zao)成的(de)損(sun)失。但(dan)是如果抗(kang)體要用(yong)來(lai)標記的(de)話(hua),則(ze)不能(neng)加(jia)入蛋白(bai)穩定(ding)劑,因為這(zhe)些穩定(ding)劑(ji)會和抗(kang)體壹起競爭結合標(biao)記物。
3、加入疊氮化Na:為了防止微(wei)生(sheng)物汙染(ran),經(jing)常選(xuan)擇加入疊氮化Na到(dao)抗(kang)體(ti)中(終濃(nong)度(du) 0.02% (w/v))。但(dan)在下(xia)述(shu)情(qing)況中不(bu)能(neng)使(shi)用(yong)疊氮化Na:
1)、抗(kang)體(ti)用(yong)於染色(se)或處(chu)理(li)活(huo)細胞(bao),用(yong)於體(ti)內(nei)研(yan)究(jiu)。疊氮化Na在(zai)抵(di)抗(kang)微生(sheng)物的(de)同(tong)時,對(dui)其它大部分有機(ji)物也是有毒的(de),因為它阻(zu)斷(duan)了線(xian)粒體(ti)的(de) 細胞(bao)色素電子(zi)傳(chuan)遞(di)系統(tong)cytochrome electron transportsystem。
2)、要偶(ou)聯帶(dai)有氨(an)基(ji)的(de)抗體(ti)。疊氮化Na會(hui)幹擾任(ren)何(he)含有氨(an)基(ji)的(de)偶聯,因(yin)此(ci)在進(jin)行(xing)偶(ou)聯之(zhi)前(qian),應將(jiang)疊氮化Na去除(chu)。偶聯後(hou)的(de)抗體(ti)可以加入疊氮化Na保(bao)存(cun),但(dan)是濃度只(zhi)能(neng)是(shi)0.01%。對(dui)於需(xu)要偶(ou)聯的(de)抗體(ti),硫(liu)柳(liu)汞(gong) (merthiolate)可以(yi)替(ti)代(dai)疊氮化Na作(zuo)為保(bao)護劑。
此(ci)外,如果需(xu)要去除(chu)疊氮化Na,可(ke)以(yi)通(tong)過(guo)凝(ning)膠電(dian)泳(yong)或過(guo)濾的(de)方式(IgG 的(de)分子(zi)量(liang)是 150kDa,疊氮化Na的(de)分子(zi)量(liang)只(zhi)有65Da),使(shi)用(yong)cut off 14kDa的(de)濾膜(mo)即(ji)可(ke)將(jiang)疊氮化Na從(cong)抗(kang)體(ti)中去除(chu)。