COLO320人(ren)結直腸(chang)腺癌(ai)細(xi)胞

公司產品僅(jin)供(gong)科研(yan)研(yan)究使(shi)用、不(bu)得(de)用於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

壹(yi)、商(shang)品介(jie)紹(shao)：

二(er)、細(xi)胞培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇細胞：以(yi)下(xia)細胞培養(yang)凍存處理僅(jin)供(gong)參(can)考，具(ju)體(ti)操(cao)作步驟(zhou)以隨(sui)貨(huo)產品說(shuo)明(ming)書為主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細胞懸(xuan)液的(de)凍存管在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速(su)搖晃解(jie)凍，加4 mL培養(yang)基(ji)混合均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心3 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培養(yang)基(ji)後(hou)吹勻。然後(hou)將所(suo)有(you)細胞懸(xuan)液加入(ru)含(han)適(shi)量培養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培養(yang)過(guo)夜（或(huo)將細(xi)胞懸(xuan)液加入(ru)10 cm皿中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜）。第二天(tian)換(huan)液並檢(jian)查細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細胞傳(chuan)代：如(ru)果細胞密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳代培養(yang)。

    a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上(shang)清(qing)，用不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離子(zi)的PBS潤(run)洗細胞1-2次(ci)。        

    b、加1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸(jin)潤(run)所有(you)細胞，將培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視細胞情(qing)況(kuang)而定），然後(hou)在(zai)顯微鏡下觀(guan)察細胞消(xiao)化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞大部(bu)分(fen)變圓並脫落，迅速(su)拿回操(cao)作臺，輕(qing)敲幾(ji)下(xia)培養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化(hua)。輕輕打勻(yun)後(hou)裝入(ru)無(wu)菌(jun)離心管中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，補(bu)加1-2 mL培養(yang)液後(hou)吹勻。        

     c、將細(xi)胞懸(xuan)液按(an)1:2比例(li)分(fen)到新的(de)含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的新皿中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍存：待細胞生(sheng)長(chang)狀態良(liang)好時，可進行(xing)細胞凍存。下面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞及細胞培養(yang)液，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離心管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心4 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，用PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄盡PBS，進行(xing)細胞計(ji)數。

     b、根(gen)據細胞數量加入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細(xi)胞凍存液，使(shi)細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻，每(mei)支(zhi)凍存管凍存1mL細胞懸(xuan)液，註意凍存管做(zuo)好標(biao)識。將凍存管放(fang)入(ru)-80℃冰箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮灌(guan)儲(chu)存。記錄凍存管位置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次拿(na)取。  

三、培養(yang)註意事項 

1. 收到細(xi)胞後(hou)首先(xian)觀察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好，培養(yang)液是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象，若(ruo)有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象 發生(sheng)請(qing)及時和(he)我(wo)們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細胞說(shuo)明(ming)書，了解細(xi)胞相(xiang)關信息，如(ru)細胞形(xing)態(tai)、所用培養(yang)基(ji)、血清(qing)比例(li)、所(suo)需 細胞因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保(bao)細胞培養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由於(yu)培養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致(zhi)而導致細(xi)胞出(chu)現(xian)問(wen)題，責(ze)任(ren)由 客(ke)戶(hu)自(zi)行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒精擦(ca)拭(shi)細(xi)胞瓶(ping)表面，顯微鏡下觀(guan)察細胞狀態。因(yin)運(yun)輸問題，部(bu)分(fen)細胞由(you)於(yu)溫度(du) 變化(hua)及劇(ju)烈碰亡(wang)破碎(sui)形(xing)成碎(sui)片，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀察(cha)好細(xi)胞狀態後(hou)，75%酒精消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可以消(xiao)化(hua)，懸浮細胞直接(jie)混勻收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮(xian)的(de)培養(yang)基(ji)重懸(xuan) 細胞，並接(jie)種到新的(de)培養(yang)瓶(ping)或培養(yang)皿中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進行(xing)培養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培養(yang)基(ji)用於(yu)細(xi)胞培養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到細(xi)胞後(hou)前 3 天(tian)各(ge)拍幾張細(xi)胞照(zhao)片，記錄細(xi)胞狀態，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司技術(shu)部(bu)溝通 交流(liu)。由於(yu)運(yun)輸的原(yuan)因，個(ge)別敏(min)感(gan)細(xi)胞會出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定的(de)情(qing)況(kuang)，請(qing)及時和(he)我(wo)們聯(lian)系，告(gao)知細胞 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以便(bian)我(wo)們的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤回(hui)訪(fang)直至問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該細胞僅(jin)供(gong)科研(yan)使(shi)用。

8. 備(bei)註：運(yun)輸用的(de)培養(yang)基(ji) (灌(guan)液培養(yang)基(ji)) 不能(neng)再(zai)用來(lai)培養(yang)細(xi)胞，請(qing)換(huan)用按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書細胞培 養(yang)條(tiao)件(jian)新配(pei)制(zhi)的(de)培養(yang)基(ji)來培養(yang)細(xi)胞。     收(shou)到細(xi)胞後(hou)第壹(yi)次(ci)傳代建(jian)議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註意：  1:2 傳代就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或者 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿。

公司正在(zai)出售(shou)的產品：

MSX1： MSH同(tong)源蛋(dan)白(bai)1樣(yang)蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti) 綠(lv)色熒(ying)光(guang)蛋(dan)白(bai)標(biao)記(ji)小(xiao)鼠子(zi)細胞;U14-GFP

HPAC(人(ren)胰(yi)腺腺泡上(shang)皮癌(ai)) 5×106cells/瓶(ping)×2 短(duan)小芽(ya)孢桿(gan)菌 大鼠(shu)1受體(ti)(IGF-1R)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Rotavirus IgG 輪(lun)狀病毒(du) IgG(間(jian)接(jie)法二(er)步(bu)法)

6-Mar： 膜(mo)相(xiang)關環指(zhi)蛋(dan)白(bai)6抗(kang)體(ti) CM-H118人(ren)腦(nao)靜脈血管平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞培養(yang)基(ji)100mL

IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠(shu) IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋(dan)白(bai) (His 標(biao)簽(qian)) 大鼠(shu)1受體(ti)(IGF1R)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Rotavirus IgM 輪(lun)狀病毒(du) IgM(間(jian)接(jie)法二(er)步(bu)法)

MMP19： 基(ji)質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)18/19 0.2ml

HSP70： 熱(re)休(xiu)克蛋(dan)白(bai)70抗(kang)體(ti) 人(ren)腸(chang)平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞總(zong)RNAHISMC NA

SW 982(人(ren)滑(hua)膜(mo)肉瘤(liu)細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 人(ren)角化(hua)細胞生(sheng)長(chang)因子(zi)(KGF)ELISA 試劑(ji)盒 CaMK2b(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II beita) 鈣(gai)/鈣(gai)調素(su)依(yi)賴(lai)蛋(dan)白(bai)激(ji)酶2b抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HSD17B8： 羥類固醇脫(tuo)氫(qing)酶(mei)17β抗體(ti) CS Others Human 人(ren) Ciate syhase / CS 桿(gan)狀病毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂(lie)解(jie)液 (陽性對照(zhao))

SD大鼠(shu)神(shen)經(jing)幹細(xi)胞 Neural stem cells in SD rat 人(ren)角化(hua)細胞內(nei)分(fen)泌(mi)因子(zi)(KAF)/雙調蛋(dan)白(bai)(AR)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 CAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HABP4： 透明(ming)質酸結合蛋(dan)白(bai)4抗(kang)體(ti) 山羊(yang)皮膚細胞;WGS1 大鼠(shu)心肌(ji)細(xi)胞，H9c2細(xi)胞 Ca759細(xi)胞，615小(xiao)鼠(shu)癌瘤(liu)株

COLO320人(ren)結直腸(chang)腺癌(ai)細(xi)胞phospho-P53(Ser46)： 0酸化抑制基(ji)因P53抗(kang)體(ti) CADM3 Others Rat 大鼠(shu) CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽性對照(zhao))

JM 人(ren)急(ji)性T淋巴細(xi)胞白(bai)血(xue)病細(xi)胞 大鼠(shu)含(han)免(mian)疫球(qiu)蛋(dan)白(bai)樣(yang)環和(he)上(shang)皮生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)樣域酪酸(suan)激(ji)酶2(Tie-2)ELISA試(shi)劑(ji)盒 SDA(Human salivary duct autoantibody)  人(ren)抗(kang)唾(tuo)液腺導管組織(zhi)抗體(ti) Hs 578T細(xi)胞，人(ren)成纖維細胞 人(ren)原(yuan)胚(pei)腎轉(zhuan)化(hua)細胞系,293 Ad5+細(xi)胞 胰(yi)島(dao)β細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(1ml)

HA Others Influenza B 乙(yi)型(xing)流感(gan) (B/Brisbane/60/2008) 血(xue)凝(ning)素HA1 (Hemagglutinin) 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽性對照(zhao)) 大鼠(shu)含(han)免(mian)疫球(qiu)蛋(dan)白(bai)樣(yang)環和(he)上(shang)皮生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)樣域酪酸(suan)激(ji)酶1(Tie-1)ELISA試(shi)劑(ji)盒 IL-1 Beta(Mouse Interleukin 1 Beta)  小(xiao)鼠(shu)白(bai)介素1β 96T

phospho-P53 (Ser9)： 0酸化抑制基(ji)因P53抗(kang)體(ti) T-112B(含(han)100mL酶(mei)解緩沖液)10mL

LNCaP clone FGC人(ren)前(qian)列腺癌(ai)細(xi)胞 LNCaP clone human prostate cancer cell FGC RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠(shu)過(guo)氧化(hua)脂(zhi)質/乳(ru)過(guo)氧化(hua)物酶(mei)(LPO)ELISA試劑(ji)盒 MSA(Human mitotic spindle apparatus antibody)  人(ren)抗(kang)紡錘(chui)體(ti)抗(kang)體(ti) S100A4 Others Human 人(ren) S100A4 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽性對照(zhao))