玄參PCR鑒定(ding)試劑盒說(shuo)明(ming)書

實時熒光(guang)定量(liang)PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是(shi)指在(zai)PCR反應體系(xi)中加(jia)入(ru)熒光(guang)基團(tuan)，利(li)用熒光(guang)信號(hao)積(ji)累實時監(jian)測整(zheng)個PCR進(jin)程，通過(guo)標準(zhun)曲(qu)線(xian)對(dui)未(wei)知(zhi)模(mo)板進(jin)行定量分析(xi)的(de)方(fang)法。實時熒光(guang)定量(liang)PCR的(de)化(hua)學原理包(bao)括探(tan)針(zhen)類和非(fei)探(tan)針(zhen)類兩類，探(tan)針(zhen)類是(shi)利(li)用與(yu)靶(ba)細胞序(xu)列特(te)異性(xing)雜(za)交(jiao)的(de)探(tan)針(zhen)來(lai)指(zhi)示(shi)擴增產(chan)物的(de)增(zeng)加(jia)，非(fei)探(tan)針(zhen)類是(shi)利(li)用熒光(guang)染料(liao)或(huo)者特(te)異性(xing)設(she)計的(de)引物來(lai)指(zhi)示(shi)擴增的(de)增(zeng)加(jia)。運用該技術(shu)可以對DNA、RNA樣(yang)品進(jin)行定量（包(bao)括定量和相對定(ding)量(liang)）和定性(xing)分析(xi)。
主(zhu)要服務(wu)：DNA或(huo)RNA的(de)定(ding)量(liang)分析(xi)、基因(yin)表(biao)達(da)差(cha)異(yi)分析(xi)、基因(yin)分型(xing)。
主(zhu)要技(ji)術(shu)：引物設(she)計、RNA提(ti)取、cDNA合(he)成(cheng)、qPCR

產(chan)品(pin)及(ji)特(te)點：
本(ben)產(chan)品(pin)包(bao)含(han)Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)、dNTPs、MgCl2、反應緩沖(chong)液，濃度(du)為(wei)2×。具(ju)有(you)快速(su)簡(jian)便(bian)、靈敏度(du)高(gao)、特(te)異性(xing)強(qiang)、穩(wen)定(ding)性(xing)好(hao)等優點，可大(da)限度的(de)減少(shao)人為(wei)誤差(cha)。使(shi)用時只(zhi)需加(jia)入(ru)DNA模(mo)板和(he)引物既可。使用方(fang)便快捷，能(neng)避(bi)免(mian)PCR操作過(guo)程中的(de)汙(wu)染(ran)，使(shi)用時只(zhi)需取適(shi)量2×TaqPCR MasterMix溶(rong)液(ye)，加(jia)入(ru)模(mo)板和(he)引物，並加(jia)入(ru)去(qu)離子水補(bu)足體(ti)積(ji)，使(shi)MasterMix溶(rong)液(ye)濃度為(wei)1×即可進(jin)行反應。使用前(qian)請保(bao)證(zheng)充分溶(rong)解(jie)並混(hun)勻，操作需(xu)在(zai)冰(bing)上進(jin)行。本(ben)產(chan)品(pin)就(jiu)是(shi)為(wei)此目(mu)的(de)根(gen)據(ju) PCR 原理開(kai)發的(de)試劑盒。
具(ju)有(you)高(gao)靈敏度(du)、高(gao)特(te)異性(xing)、高(gao)穩定(ding)性
可在(zai)同(tong)壹個管子中高(gao)特(te)異性(xing)的(de)執(zhi)行(xing)cDNA合(he)成(cheng)與(yu)基(ji)於(yu)探(tan)針(zhen)的(de)qPCR反應。更多優點如1.的(de)特(te)異性(xing)；2.多重反應（高(gao)通量(liang)）；3.反應體系(xi)配置(zhi)，無(wu)需(xu)冰(bing)塊(kuai)；4.無(wu)懼(ju)高(gao)GC含(han)量PCR；5.預(yu)防(fang)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)；6.廣泛的(de)設(she)備兼(jian)容性。
PCR反應的(de)特(te)異性(xing)決(jue)定因(yin)素為(wei)：
①引物與(yu)模(mo)板DNA特(te)異正確的(de)結(jie)合(he)；
②堿(jian)基配(pei)對(dui)原則；
③Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)合(he)成(cheng)反(fan)應的(de)忠(zhong)實(shi)性(xing)；
④靶(ba)基因的(de)特(te)異性(xing)與(yu)保(bao)守性。
其中引物與(yu)模(mo)板的(de)正確結(jie)合(he)是(shi)關鍵(jian)。引物與(yu)模(mo)板的(de)結(jie)合(he)及(ji)引物鏈(lian)的(de)延(yan)伸是(shi)遵循(xun)堿(jian)基配(pei)對(dui)原則的(de)。聚(ju)合(he)酶(mei)合(he)成(cheng)反(fan)應的(de)忠(zhong)實(shi)性(xing)及(ji)Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)耐(nai)高(gao)溫(wen)性(xing)，使(shi)反(fan)應中模(mo)板與(yu)引物的(de)結(jie)合(he)(復性)可以在(zai)較高(gao)的(de)溫(wen)度(du)下(xia)進(jin)行，結(jie)合(he)的(de)特(te)異性(xing)大(da)大(da)增(zeng)加(jia)，被擴增的(de)靶(ba)基因片段也就(jiu)能(neng)保(bao)持很(hen)高(gao)的(de)正確度(du)。再通過(guo)選擇特(te)異性(xing)和保(bao)守性高(gao)的(de)靶(ba)基因區(qu)，其(qi)特(te)異性(xing)程度(du)就更高(gao)。
(2) 靈敏度(du)高(gao)
PCR產(chan)物的(de)生(sheng)成(cheng)量(liang)是(shi)以指數方(fang)式增加(jia)的(de)，能(neng)將(jiang)皮(pi)克(ke)(pg=10-12g)量級(ji)的(de)起(qi)始待測(ce)模(mo)板擴增到(dao)微(wei)克(ke)(ug=10-6g)水平(ping)。能(neng)從(cong)100萬個細胞中檢(jian)出壹個靶(ba)細胞；在(zai)病毒的(de)檢(jian)測中，PCR的(de)靈敏度(du)可達(da)3個RFU(空斑形(xing)成單(dan)位(wei))；在(zai)細菌(jun)學中zui小檢(jian)出率為(wei)3個細菌(jun)。
(3) 簡便、快速(su)
PCR反應用耐(nai)高(gao)溫(wen)的(de)Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)，壹次性地將反(fan)應液加(jia)好(hao)後，即在(zai)DNA擴增液(ye)和(he)水浴(yu)鍋上進(jin)行變性-退火(huo)-延(yan)伸反應，壹般在(zai)2～4 小時完(wan)成擴增反(fan)應。擴增產(chan)物壹般用電泳(yong)分析(xi)，不(bu)壹定要用同(tong)位(wei)素，無(wu)放射性(xing)汙(wu)染(ran)、易(yi)推(tui)廣。
(4) 對標本(ben)的(de)純(chun)度(du)要求(qiu)低
不(bu)需(xu)要分離病毒或(huo)細菌(jun)及(ji)培養(yang)細胞，DNA 粗制(zhi)品(pin)及(ji)總(zong)RNA均(jun)可作為(wei)擴增模(mo)板。可直接(jie)用臨床(chuang)標(biao)本(ben)如血液(ye)、體(ti)腔液、洗(xi)嗽(sou)液(ye)、毛(mao)發、細胞、活(huo)PCR技術(shu)概(gai)論(lun)。
實驗(yan)註意(yi)事項：
1）RT-PCR可以檢(jian)測組織(zhi)、細胞、血液(ye)、細菌(jun)等很(hen)多材(cai)料，不(bu)同(tong)的(de)樣(yang)本(ben)有(you)不(bu)同(tong)要求(qiu)，實驗(yan)前(qian)請充分溝(gou)通(tong)確認實驗(yan)方(fang)案(an)和(he)樣(yang)本(ben)情況；
2）客(ke)戶盡可能(neng)提(ti)供實(shi)驗(yan)的(de)背(bei)景(jing)信息(xi)、物種、基(ji)因(yin)準(zhun)確的(de)名稱和(he)ID號(hao)；
3）客(ke)戶盡量(liang)不(bu)要提(ti)供DNA或(huo)RNA樣(yang)品。
4）樣(yang)本(ben)保(bao)存(cun)於(yu)液(ye)氮或(huo)幹冰(bing)，也(ye)可以保存(cun)於(yu)Trizol液中。
GFRA3 Others Mouse 小鼠 GFRA3 / GFR-alpha-3 人細胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 釕標準溶(rong)液(ye)(1000μg/ml,介質(zhi)：2.0mol/L HCl)Ruthenium solution質(zhi)量規(gui)格(ge)：1000μg/ml,介質(zhi)：2.0mol/L HCl

293A，人胚(pei)腎上皮(pi)細胞系(xi)(腺(xian)病毒包(bao)裝級(ji)別(bie))銠標(biao)準(zhun)溶(rong)液(ye)(1000μg/ml,溶(rong)劑:2.0Mol/L HCl)Rhodium solution質(zhi)量規(gui)格(ge)：1000μg/ml,溶(rong)劑:2.0Mol/L HCl

LAN-5細胞，神(shen)經母細胞瘤(liu)細胞 人胎(tai)盤絨毛(mao)癌細胞,JAR細胞 人表(biao)皮(pi)角質(zhi)細胞RNAHEK miRNA5 μg錸標準溶(rong)液(ye)(1000μg/ml;溶(rong)劑：1.5mol/L硝酸)Rhenium standard質(zhi)量規(gui)格(ge)：1000μg/ml;溶(rong)劑：1.5mol/L硝酸

SV40轉(zhuan)化(hua)的(de)非(fei)洲綠(lv)猴腎(shen)細胞;COS-7二(er)氧化(hua)矽(gui)標(biao)準(zhun)溶(rong)液(ye)(1000μg/ml,介質(zhi)：0.05mol/L NaOH)Silicon dioxide solution質(zhi)量規(gui)格(ge)：1000μg/ml,介質(zhi)：0.05mol/L NaOH

EFNA5 Others Human 人 EphrinA5 人細胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 銀標(biao)準(zhun)溶(rong)液(ye)(1000μg/ml)Silver standard質(zhi)量規(gui)格(ge)：1000μg/ml
CDK1 Others Mouse 小鼠 CDC2 Kinase / CDK1 桿(gan)狀(zhuang)病毒-昆蟲細胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 醋(cu)酸加(jia)壓素(su)質(zhi)量規(gui)格(ge)：度98%Argipressin Acetate

食(shi)管(guan)上皮(pi)細胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(fang)(1ml)質(zhi)量規(gui)格(ge)：度大(da)於(yu)98%,USPgradeAtelol

草魚腎細胞;GIK 人肝(gan)癌(ai)細胞，PLC/PRF/5細胞 NIH:OVCAR-3(卵巢(chao)癌(ai)細胞)巖(yan)藻(zao)糖(tang)；L-巖(yan)藻(zao)糖(tang)質(zhi)量規(gui)格(ge)：≥99%,BRL-(-)-Fucose

人腦瘤細胞;SF763果膠酶質(zhi)量規(gui)格(ge)：3萬U/gPectinase

CTHRC1 Others Human 人 CTHRC1 人細胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) β-(70萬u/ml液體)質(zhi)量規(gui)格(ge)：BR,70萬u/ml液體beta-Amylase
GRN Others Mouse 小鼠 GRN / Granulin 人細胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 枸櫞(yuan)酸莫(mo)沙比利(li)(標準品)質(zhi)量規(gui)格(ge)：≥98%,標準品用於(yu)含(han)量測(ce)定(ding)Mosapride

CM-R053大(da)鼠卵巢(chao)上皮(pi)細胞*培養(yang)基100mL枸櫞(yuan)酸莫(mo)沙比利(li)質(zhi)量規(gui)格(ge)：≥98.5%,BR,二(er)水合(he)物Mosapride

HA Others H7N9 甲型流感(gan) H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) G鈉(na)鹽質(zhi)量規(gui)格(ge)：>1500U/mg,USP,BRPenicillin G,  salt

大(da)鼠顆粒(li)細胞RGCG鈉(na)(標準品)質(zhi)量規(gui)格(ge)：效價(jia)測定Penicillin G,  salt

NCI-H1703[H1703]細胞，人肺(fei)癌細胞 人膀胱癌(ai)細胞,5637(HTB-9)細胞 人視(shi)網膜色(se)素上皮(pi)細胞HRPEpiC米格(ge)列奈(nai)鈣質(zhi)量規(gui)格(ge)：>99%,BRMitiglinide calcium Hydrate
玄參PCR鑒定試劑盒說(shuo)明(ming)書豚鼠皮膚(fu)細胞;GP-S1N-去(qu)甲(jia)酰(xian)-N-芐氧羰基(ji)質(zhi)量規(gui)格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)N-Deformyl-N-benzyloxycarbonyl Orlistat

IFNA14 Others Mouse 小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 人細胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) (2S,3R,5S)-5-[(N-甲酰(xian)-L-亮氨酰(xian))氧]-2-己基-3-羥基十六(liu)烷酸(suan)(雜(za)質(zhi))質(zhi)量規(gui)格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)(2S,3R,5S)-5-[(N-Formyl-L-leucyl)oxy]-2-hexyl-3-hydroxy