小鼠(shu)檢(jian)測(ce)試劑盒(he)是壹(yi)種(zhong)專(zhuan)用於(yu)檢(jian)測(ce)小(xiao)鼠(shu)生(sheng)物(wu)樣(yang)本(如(ru)血清、血漿(jiang)、組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)液(ye)、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)等(deng))中(zhong)特定目標分(fen)子(zi)的(de)體外(wai)診斷(duan)工具(ju),廣泛(fan)應(ying)用於(yu)基(ji)礎醫(yi)學研(yan)究(jiu)、藥(yao)理毒(du)理評價(jia)、免(mian)疫(yi)學、腫瘤學及(ji)神經(jing)科學等(deng)領(ling)域。該(gai)類(lei)試劑盒(he)通常(chang)基(ji)於(yu)酶(mei)聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定(ELISA)、化(hua)學發(fa)光免(mian)疫(yi)分析(CLIA)、熒(ying)光定量(liang)PCR(qPCR)或(huo)流(liu)式細(xi)胞(bao)術(shu)等(deng)高靈敏(min)度(du)技術(shu)平臺(tai)開發(fa),可精(jing)準(zhun)定量(liang)或(huo)定性(xing)檢測(ce)小(xiao)鼠(shu)體(ti)內的(de)細胞(bao)因(yin)子(zi)、激素、炎癥因(yin)子(zi)、代謝(xie)標誌(zhi)物(wu)、抗體(ti)、病(bing)原(yuan)體抗原(yuan)或特定基(ji)因(yin)表達水平。
壹(yi)、試劑準備
檢(jian)查(zha)試劑盒(he)完(wan)整(zheng)性(xing):
仔(zai)細核(he)對試劑盒(he)內的(de)所有組(zu)分(fen),包括(kuo)酶(mei)標板、標(biao)準品(pin)、檢(jian)測(ce)抗體(ti)、酶(mei)結(jie)合物、底物溶液(ye)、終(zhong)止(zhi)液(ye)、洗滌液(ye)等(deng),確(que)保(bao)無缺失或(huo)損壞。
檢(jian)查(zha)試劑的(de)包裝是(shi)否完(wan)好(hao),如(ru)有破(po)損或泄漏(lou),應(ying)及(ji)時聯系(xi)廠家更(geng)換。
試劑復溫與(yu)平衡:
將試劑盒(he)從(cong)冷(leng)藏環(huan)境(jing)中(zhong)(如(ru)4℃冰箱(xiang))取(qu)出,放(fang)置在室溫下平衡15-30分(fen)鐘(zhong),使(shi)試劑溫度(du)與室溫壹(yi)致,避(bi)免(mian)因(yin)溫度(du)差異(yi)影響實(shi)驗結(jie)果(guo)。
濃(nong)洗滌液(ye)可能會有結(jie)晶(jing)析出,稀(xi)釋(shi)前可在(zai)水(shui)浴中(zhong)加溫助(zhu)溶,輕(qing)輕(qing)搖(yao)晃(huang)至完(wan)q溶解(jie)後(hou)再進行稀釋(shi)。
試劑稀釋(shi)與(yu)配(pei)制(zhi):
根(gen)據(ju)試劑盒(he)說明書(shu)的(de)要(yao)求,對標(biao)準(zhun)品(pin)、檢(jian)測(ce)抗體(ti)、酶(mei)結(jie)合物等(deng)進行稀釋(shi)。稀(xi)釋(shi)時(shi)應(ying)使(shi)用準(zhun)確的(de)移(yi)液(ye)器,並(bing)嚴格(ge)按照(zhao)說明書(shu)中(zhong)的(de)稀釋(shi)比(bi)例進行操(cao)作。
洗滌液(ye)壹(yi)般按(an)1:20或1:25的(de)比(bi)例用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)進行稀釋(shi),稀(xi)釋(shi)後(hou)應(ying)充(chong)分混勻。
試劑分裝與(yu)保(bao)存:
對(dui)於(yu)需要(yao)多(duo)次使(shi)用的(de)試劑,如(ru)標準(zhun)品(pin)、檢(jian)測(ce)抗體(ti)等,可按(an)照(zhao)實(shi)驗需求(qiu)進行分裝,避(bi)免(mian)反(fan)復凍融影響試劑活性(xing)。
分裝後(hou)的(de)試劑應(ying)標註好(hao)名稱、濃(nong)度(du)、分裝日(ri)期(qi)等信息(xi),並(bing)妥善(shan)保(bao)存。
二(er)、儀(yi)器準備
酶(mei)標儀(yi)校(xiao)準:
提前打開(kai)酶(mei)標儀(yi),進行預熱(re)和校(xiao)準,確(que)保(bao)儀(yi)器處於(yu)正(zheng)常(chang)工作(zuo)狀態(tai)。
根(gen)據(ju)試劑盒(he)的(de)要(yao)求,設(she)置好酶(mei)標儀(yi)的(de)檢測(ce)波(bo)長、讀(du)數時(shi)間等(deng)參數(shu)。
移(yi)液(ye)器檢查(zha)與校(xiao)準:
檢(jian)查移(yi)液(ye)器的(de)量(liang)程(cheng)是否準確(que),吸頭是否匹配(pei),避免(mian)因(yin)移(yi)液(ye)不準確(que)影響實(shi)驗結(jie)果(guo)。
對(dui)移(yi)液(ye)器進行校(xiao)準,確(que)保(bao)其(qi)吸液(ye)和(he)排液(ye)的(de)準確(que)性(xing)。
其(qi)他儀(yi)器準備:
根(gen)據(ju)實(shi)驗需求(qiu),準(zhun)備好(hao)其(qi)他可能用到(dao)的(de)儀(yi)器,如(ru)溫育箱、洗板機、離(li)心機等(deng),並(bing)確保(bao)其(qi)處於(yu)正(zheng)常(chang)工作(zuo)狀態(tai)。
三、樣(yang)本準備
樣(yang)本采集與保(bao)存:
根(gen)據實(shi)驗目的(de),采集小鼠(shu)的(de)血液(ye)、血清、血漿(jiang)、組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)等(deng)樣(yang)本。采集時應(ying)遵循無菌(jun)操(cao)作原(yuan)則,避(bi)免(mian)樣(yang)本汙染。
采(cai)集後(hou)的(de)樣本應(ying)立即(ji)進行處理和(he)保(bao)存。如(ru)需短(duan)期(qi)保(bao)存,可放(fang)置在4℃冰箱(xiang)中(zhong);如(ru)需長(chang)期(qi)保(bao)存,應(ying)放置在-20℃或-80℃冰箱(xiang)中(zhong),避(bi)免(mian)反(fan)復凍融。
樣(yang)本稀釋(shi)與(yu)處理:
根(gen)據(ju)試劑盒(he)的(de)要(yao)求,對樣(yang)本進行稀釋(shi)或(huo)處理。如(ru)樣本中(zhong)待(dai)測(ce)物(wu)質(zhi)含量(liang)過高,可能需要(yao)用樣本稀釋(shi)液(ye)進行稀釋(shi);如(ru)樣本中(zhong)存(cun)在幹擾(rao)物(wu)質(zhi),可能需要(yao)進行預處理或(huo)純(chun)化(hua)。
稀釋(shi)或(huo)處理後(hou)的(de)樣本應(ying)充(chong)分混勻,避(bi)免(mian)沈(chen)澱或(huo)分(fen)層。
四、環(huan)境(jing)準(zhun)備
實(shi)驗臺(tai)面(mian)清潔:
清(qing)潔實(shi)驗臺(tai)面(mian),去除灰塵、汙(wu)漬(zi)等(deng)雜質(zhi),確保(bao)實(shi)驗環(huan)境(jing)整(zheng)潔。
在(zai)實(shi)驗臺(tai)面(mian)上鋪(pu)設(she)幹(gan)凈(jing)的(de)吸水(shui)紙(zhi)或實(shi)驗墊(dian),以便放置試劑和樣(yang)本。
溫濕(shi)度(du)控制(zhi):
確(que)保(bao)實(shi)驗環(huan)境(jing)的(de)溫度(du)和濕(shi)度(du)適宜(yi),避(bi)免(mian)因(yin)溫濕(shi)度(du)波動(dong)影響實(shi)驗結(jie)果(guo)。壹(yi)般來(lai)說,實(shi)驗環(huan)境(jing)的(de)溫度(du)應(ying)控制(zhi)在(zai)20-25℃,濕(shi)度(du)應(ying)控制(zhi)在(zai)40%-60%。
五、人員(yuan)防(fang)護(hu)準備
穿(chuan)戴防(fang)護(hu)用品(pin):
操(cao)作人(ren)員應(ying)穿戴好實(shi)驗服(fu)、手(shou)套、口(kou)罩(zhao)等(deng)防(fang)護(hu)用品(pin),避(bi)免(mian)試劑與皮膚直(zhi)接(jie)接(jie)觸或(huo)吸入有害氣體(ti)。
如(ru)需進行有潛(qian)在(zai)生物(wu)危害的(de)實(shi)驗操(cao)作,如(ru)處理感(gan)染(ran)性(xing)樣本等,還應(ying)穿戴好生物(wu)安(an)全(quan)櫃、護(hu)目鏡等(deng)防(fang)護(hu)裝備。
熟悉(xi)操(cao)作流(liu)程:
操(cao)作人(ren)員應(ying)仔(zai)細閱(yue)讀試劑盒(he)的(de)說明書(shu),熟悉(xi)實(shi)驗操(cao)作流(liu)程和(he)註意事(shi)項(xiang)。
如(ru)對實(shi)驗操(cao)作不熟悉(xi)或(huo)存(cun)在疑問,應(ying)及(ji)時向有經(jing)驗的(de)同事(shi)或(huo)廠家技術人員(yuan)咨(zi)詢(xun)。