J82人膀(pang)胱移(yi)行(xing)細胞(bao)癌

公(gong)司產品(pin)僅供科(ke)研研究使用、不得(de)用於臨(lin)床診斷！

二、細(xi)胞(bao)培養(yang)操作

1) 復蘇細胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞(bao)培養(yang)凍存處(chu)理(li)僅供參考(kao)，具(ju)體(ti)操作步驟以(yi)隨(sui)貨(huo)產品(pin)說明(ming)書為(wei)主。將(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的(de)凍存管在(zai) 37℃水浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培養(yang)基混(hun)合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄去上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基後(hou)吹(chui)勻。然後(hou)將(jiang)所有(you)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入含(han)適量(liang)培養(yang)基的(de)培養(yang)瓶中培養(yang)過夜（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培養(yang)基，培養(yang)過夜）。第(di)二天(tian)換液(ye)並檢查細胞密度。

2) 細胞傳(chuan)代(dai)：如果細(xi)胞密度達 80%-90%，即可進(jin)行傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

    a、棄去培養(yang)上清(qing)，用不含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子的(de)PBS潤洗(xi)細胞(bao)1-2次(ci)。        

    b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶中，使消(xiao)化(hua)液浸潤所有(you)細胞(bao)，將(jiang)培養(yang)瓶置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱中消(xiao)化(hua)1-2 min（視細胞情況而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在(zai)顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞消(xiao)化(hua)情況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部分變圓並脫落(luo)，迅(xun)速(su)拿回(hui)操作臺，輕敲幾下(xia)培養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培養(yang)基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕輕打勻後裝入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去上清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液後吹(chui)勻(yun)。        

     c、將(jiang)細胞懸(xuan)液按1:2比(bi)例分到新的(de)含(han)8 mL培養(yang)基的(de)新皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱中培養(yang)。 3) 細胞凍(dong)存(cun)：待細(xi)胞生(sheng)長(chang)狀態良(liang)好時，可進(jin)行細(xi)胞凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶為(wei)例(li)；a、收集細胞(bao)及細胞(bao)培養(yang)液，裝入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄去上清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行細胞(bao)計數(shu)。

     b、根(gen)據細胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入無(wu)血(xue)清(qing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存液，使細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支(zhi)凍存(cun)管凍存(cun)1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註意凍(dong)存(cun)管做(zuo)好(hao)標識。將(jiang)凍存管放(fang)入-80℃冰(bing)箱，24 h後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲存。記錄(lu)凍存管位置(zhi)以(yi)便下(xia)次拿(na)取(qu)。  

三(san)、培養(yang)註意事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細胞(bao)後首(shou)先觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶是(shi)否完好，培養(yang)液是(shi)否有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現象，若有上述現象 發生(sheng)請(qing)及時和我(wo)們聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明書，了(le)解(jie)細(xi)胞相關(guan)信(xin)息，如細胞(bao)形態、所用培養(yang)基、血(xue)清(qing)比(bi)例、所需(xu) 細胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞(bao)培養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由(you)於培養(yang)條(tiao)件(jian)不壹(yi)致而(er)導致細(xi)胞(bao)出現問題，責(ze)任(ren)由(you) 客戶(hu)自行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表面，顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞狀態。因(yin)運(yun)輸問題，部分細胞(bao)由(you)於溫度 變化(hua)及劇烈碰(peng)亡(wang)破碎形成碎片(pian)，是(shi)正常(chang)現象。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞狀態後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞可以(yi)消(xiao)化(hua)，懸浮細胞直接混勻(yun)收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新鮮的(de)培養(yang)基重(zhong)懸(xuan) 細胞，並接種(zhong)到新的(de)培養(yang)瓶或(huo)培養(yang)皿中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱中進(jin)行培養(yang)。

5. 請客戶(hu)用相同條(tiao)件(jian)的(de)培養(yang)基用於細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收到(dao)細胞(bao)後前 3 天(tian)各拍(pai)幾張細(xi)胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細胞狀態，便於和我司技術(shu)部溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於運輸的(de)原因(yin)，個(ge)別敏(min)感(gan)細胞(bao)會出現不穩(wen)定(ding)的(de)情況，請(qing)及時和我(wo)們聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞 的(de)具體情況，以(yi)便我們的(de)技術(shu)人員(yuan)跟(gen)蹤回(hui)訪直至(zhi)問題解(jie)決。

7. 該細胞(bao)僅供科(ke)研使用。

8. 備註：運(yun)輸(shu)用的(de)培養(yang)基 (灌(guan)液培養(yang)基) 不能(neng)再(zai)用來培養(yang)細胞，請(qing)換(huan)用按照說(shuo)明書細(xi)胞(bao)培 養(yang)條(tiao)件(jian)新配制的(de)培養(yang)基來(lai)培養(yang)細胞。     收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)第壹(yi)次傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公(gong)司正在(zai)出售的(de)產品(pin)：

MCT1： 單羧(suo)酸轉(zhuan)運(yun)蛋(dan)白-1抗體 雜交(jiao)瘤(liu)(B類(lei));C3110D2B2

IL1B Protein Rat 重(zhong)組大(da)鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (mature form) 大(da)鼠細胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)ELISA試劑(ji)盒(he) MIS/AMH) 大(da)鼠繆勒管抑(yi)制物(wu)質(zhi)/抗繆勒管激(ji)素 96T

Mitochondrial ribosomal protein L11： 線(xian)粒(li)體(ti)核(he)糖(tang)體蛋白L11抗體 EED Others Human 人 EED / Embryonic Ectoderm Developme 桿狀病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照)

小(xiao)鼠(shu)肺大(da)動脈內(nei)皮(pi)細(xi)胞培養(yang)基 100mL 大(da)鼠細胞間(jian)粘附分子5(ICAM5)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) 8-OHdG(Mouse 8-Hydroxy-desoxyguanosine)  小鼠(shu)8羥(qiang)基脫氧鳥(niao)苷(gan) 96T

Myocardin： 促(cu)血(xue)管平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞分化(hua)因(yin)子(zi)抗體 BT549細胞(bao)，管癌細胞(bao) 人喉癌細胞(bao),M4e細(xi)胞 大(da)鼠胚胎心(xin)肌(ji)細(xi)胞;H9c2(2-1)

大(da)鼠肝細胞;IAR20 人單皰(pao)疹(zhen)病(bing)毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA 試劑(ji)盒(he) HPV16-E7/E7 protein(Human papillomavirus type 16) 人類(lei)狀瘤(liu)病(bing)毒16抗原 0.5mg

HLTF： 解(jie)旋(xuan)酶樣轉(zhuan)錄(lu)因(yin)子(zi)抗體 EB病(bing)毒轉(zhuan)化(hua)的(de)人B淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao);KMY0907

NAMALWA(人Butt's淋(lin)巴(ba)瘤(liu)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 甲型流(liu)感(gan) H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血(xue)凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照) 人單皰(pao)疹(zhen)病(bing)毒Ⅰ型抗體(HSVⅠ-Ab)ELISA 試劑(ji)盒(he) Hpt/HP(haptoglobin) 結合(he)珠(zhu)蛋白/觸珠(zhu)蛋白抗原 0.5mg

HMGCS2： 三(san)羥(qiang)基基合(he)成酶2抗體 腎系(xi)膜細胞培養(yang)基MCM

CXCL12 Protein Canine 重(zhong)組狗(gou) CXCL12 / SDF-1 蛋白 人單皰(pao)疹(zhen)病(bing)毒(HSV)ELISA試(shi)劑盒(he) H-ras/Ras/Ras p21 peptide 原癌基因(yin)H-ras抗原 0.5mg

J82人膀(pang)胱移(yi)行(xing)細胞(bao)癌Pantophysin： 突(tu)觸(chu)素樣(yang)蛋(dan)白1抗體 腎小(xiao)球(qiu)內(nei)皮(pi)細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次(ci)方(fang)(1ml)

人臍(qi)動脈平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞 大(da)鼠蛋白酶激(ji)活受(shou)體(ti)3(PAR3)ELISA試劑盒(he) SS(Human Somatostatin)  人 96T

PSMD6： 蛋(dan)白酶調解(jie)因(yin)子(zi)6抗體 IL18R1 Others Cynomolgus 食蟹(xie)猴(hou) IL18R1 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照)

NCI-H446 人小(xiao)細(xi)胞(bao)肺(fei)癌細胞(bao) 大(da)鼠蛋白酶激(ji)活受(shou)體(ti)2(PAR2)ELISA試劑盒(he) GHRP(Human Growth Hormone Releasing Peptide)  人生(sheng)長(chang)激(ji)素釋(shi)放(fang)多肽(tai) 96T

Plexin B3： 神(shen)經叢(cong)蛋白B3抗體 3T3L1細胞(bao)，小(xiao)鼠(shu)胚胎成纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)(前脂(zhi)肪(fang)) 人癌細胞(bao),ER-30細(xi)胞 體(ti)外(wai)管腔形(xing)成分析試(shi)劑(ji)盒(he)IVTFA