HPAF-II 人胰腺癌(ai)細胞(bao)

公司(si)產(chan)品(pin)僅(jin)供科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用、不得用於臨床診(zhen)斷！

二(er)、細(xi)胞(bao)培(pei)養操作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞(bao)培(pei)養凍(dong)存處理僅(jin)供參考，具(ju)體操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨貨產品說(shuo)明書為(wei)主(zhu)。將(jiang)含(han)有1 mL細胞(bao)懸液(ye)的(de)凍(dong)存管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速(su)搖晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基混(hun)合(he)均勻。在1000 rpm條件下(xia)離心3 min，棄去(qu)上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基後吹勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所有細胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適量培養基的(de)培養瓶(ping)中(zhong)培(pei)養過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基，培養過夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果細(xi)胞(bao)密度(du)達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行(xing)傳代培養(yang)。

    a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上清，用不含(han)鈣、鎂離(li)子的(de)PBS潤洗細胞(bao)1-2次。        

    b、加1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶(ping)中，使消(xiao)化液(ye)浸(jin)潤所有細胞(bao)，將(jiang)培(pei)養瓶置(zhi)於37℃培養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞(bao)情(qing)況而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細胞(bao)消(xiao)化情(qing)況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變圓並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿回操作(zuo)臺，輕敲幾(ji)下(xia)培養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基終止消化(hua)。輕輕打勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻。        

     c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)按(an)1:2比例(li)分到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培養基的(de)新皿(min)中(zhong)或者瓶中，置(zhi)於培養(yang)箱(xiang)中培(pei)養。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待細胞(bao)生(sheng)長(chang)狀態(tai)良(liang)好時，可進(jin)行(xing)細胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面(mian) T25 瓶為(wei)例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm條件下(xia)離心4 min，棄去(qu)上清液(ye)，用PBS清洗壹遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞(bao)計(ji)數(shu)。

     b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血清細胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞(bao)懸液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管(guan)做好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍(dong)存管(guan)放入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉入液(ye)氮(dan)灌儲存。記錄(lu)凍(dong)存管(guan)位置(zhi)以(yi)便下(xia)次拿取。  

三(san)、培(pei)養(yang)註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首先(xian)觀(guan)察細胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完(wan)好，培養(yang)液(ye)是(shi)否有漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現象(xiang)，若有上述(shu)現象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及(ji)時和我們聯(lian)系(xi)。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說(shuo)明書，了(le)解(jie)細胞(bao)相(xiang)關(guan)信息，如(ru)細(xi)胞(bao)形態、所用培(pei)養(yang)基、血清比例(li)、所需(xu) 細胞(bao)因(yin)子等(deng)，確保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養條件壹(yi)致，若由於培養(yang)條件不壹致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)出(chu)現問(wen)題，責任由(you) 客(ke)戶(hu)自(zi)行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)由(you)於溫度(du) 變化(hua)及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破碎形成碎(sui)片(pian)，是(shi)正常(chang)現象(xiang)。觀察好細(xi)胞(bao)狀態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消化(hua)，懸浮細(xi)胞(bao)直接(jie)混(hun)勻(yun)收集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培養基重懸 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到新(xin)的(de)培養瓶(ping)或培養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培養(yang)箱(xiang)中進(jin)行(xing)培養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用相(xiang)同(tong)條件的(de)培養基用於細胞(bao)培(pei)養。

6. 建(jian)議客(ke)戶(hu)收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前 3 天(tian)各拍幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記錄(lu)細胞(bao)狀態(tai)，便於和我司(si)技術(shu)部溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由於運(yun)輸(shu)的(de)原因(yin)，個別(bie)敏感(gan)細胞(bao)會(hui)出現(xian)不穩定(ding)的(de)情況，請(qing)及(ji)時和我們聯(lian)系(xi)，告知細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體情(qing)況，以(yi)便我們的(de)技術(shu)人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直至問(wen)題解(jie)決。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供科(ke)研(yan)使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的(de)培養基 (灌液(ye)培(pei)養(yang)基) 不能再(zai)用來(lai)培(pei)養細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用按(an)照(zhao)說(shuo)明書細(xi)胞(bao)培(pei) 養條件新(xin)配制(zhi)的(de)培養基來培養細(xi)胞(bao)。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第壹(yi)次傳代建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或者 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。

公(gong)司(si)正在出(chu)售(shou)的(de)產品：

MAD1： 有絲(si)分裂抑(yi)制缺陷(xian)蛋(dan)白1抗(kang)體 HAVCR1 Others Human 人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性對照(zhao))

CL-0443SK-N-MC(人神經上(shang)皮瘤細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠(shu)硝(xiao)基酪酸()ELISA試劑盒 NE (Rabbit neutrophil elastase)  兔(tu)子(zi)中性(xing)粒細胞(bao)彈性(xing)蛋白(bai)酶(mei) 96T

10-Mar： 膜(mo)相(xiang)關(guan)環指(zhi)蛋白(bai)10抗(kang)體 小(xiao)鼠(shu)樹(shu)突狀細(xi)胞(bao)肉瘤低轉移細胞(bao)(綠(lv)色(se)熒(ying)光蛋(dan)白(bai)標記(ji));DG6-GFP

NCI-H524(人非小細胞(bao)肺癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 MCF7(癌(ai)細胞(bao)) 大(da)鼠(shu)相(xiang)關(guan)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 Bacillus thuringiensis,BT  蘇雲(yun)金(jin)芽孢(bao)桿菌(jun)蛋白 96T

MALT1： 粘(zhan)膜相(xiang)關(guan)淋巴組(zu)織淋(lin)巴瘤轉運(yun)蛋(dan)白1抗(kang)體 中(zhong)國倉鼠(shu)卵(luan)巢細胞(bao);TPO-CHO-I

HaCaT細(xi)胞(bao)，人正常(chang)皮膚(fu)細胞(bao) 淋(lin)病(bing)柰(nai)瑟(se)氏菌(jun) 小(xiao)鼠(shu)樹(shu)突狀細(xi)胞(bao)肉瘤低轉移細胞(bao)(VAP33-GFP融合(he)蛋(dan)白穩(wen)定(ding)過(guo)表(biao)達);DG6-VAP33-GFP 人反(fan)狀腺原酸(3)ELISA 試劑盒 FoxP1(Forkhead box P1) FoxP1(T細(xi)胞(bao)轉錄(lu)因(yin)子)抗原 0.5mg

HHV8 ORF50： 人類(lei)皰(pao)疹(zhen)病(bing)毒(du)8抗體 JAG1 Others Human 人 JAG1 / JAGL1 / CD339 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性對照(zhao))

豚(tun)鼠(shu)胚(pei)胎細胞(bao);104C1 人發動蛋(dan)白2(DNM2)ELISA 試劑盒 FOXM1/HFH 11 peptide 插(cha)頭(tou)蛋白(bai)M1抗原 0.5mg

H2N2 Hemagglutinin： 甲(jia)型流(liu)感(gan)病(bing)毒(du)血凝素抗體 EB病(bing)毒(du)轉化的(de)人B淋(lin)巴細(xi)胞(bao);KM0501

MDA-MB-231(人癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠(shu) PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性對照(zhao)) 人二(er)肽基肽酶(mei)Ⅳ(DPPⅣ)ELISA 試劑盒 Measles virus of fusion protein 麻(ma)疹(zhen)病(bing)毒(du)抗原(麻(ma)疹(zhen)病(bing)毒(du)融合(he)蛋(dan)白) 0.5mg

HPAF-II 人胰腺癌(ai)細胞(bao)PPARGC1A： 過(guo)氧(yang)化物(wu)酶(mei)體增(zeng)殖物(wu)激活(huo)受(shou)體γ輔(fu)激活(huo)子1α抗(kang)體 IL2RB Others Human 人 IL2Rβ 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性對照(zhao))

人癌(ai)細胞(bao);MDA-MB-231 大(da)鼠(shu)二(er)酰(xian)基甘油(DAG)ELISA試劑盒 Human Pentosidine  人戊(wu)糖素 96T

PLK1： 絲(si)酸/蘇酸蛋白(bai)激酶(mei)Plk1抗體 大(da)額(e)牛皮膚(fu)成纖維樣(yang)細胞(bao);BOS-2

人臍靜脈(mai)內(nei)皮細胞(bao);HUV-EC 人胰腺星狀細(xi)胞(bao)培(pei)養基 100mL 大(da)鼠(shu)二(er)酰(xian)甘油-O-酰(xian)基轉移酶(mei)同(tong)源(yuan)物(wu)1(DGAT1)ELISA試劑盒 SCF/MGF  大(da)鼠(shu)幹細(xi)胞(bao)因(yin)子/肥大(da)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)因(yin)子 96T

Phospho-PLK1 (Thr210)： 0酸化絲(si)/蘇酸蛋白(bai)激酶(mei)Plk1抗體 真(zhen)皮淋巴上皮細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(1ml)