HS578T人(ren)乳腺癌細(xi)胞

公(gong)司產品(pin)僅供(gong)科(ke)研研(yan)究(jiu)使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

二、細胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞培(pei)養(yang)凍存(cun)處(chu)理僅供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體操(cao)作步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨產品(pin)說明書(shu)為主(zhu)。將(jiang)含有1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的凍存(cun)管(guan)在 37℃水浴(yu)中迅速搖晃(huang)解(jie)凍，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混合均勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上清液，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然後(hou)將所(suo)有(you)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的培(pei)養(yang)瓶中培(pei)養(yang)過夜(ye)（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)10 cm皿(min)中，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜(ye)）。第(di)二天換(huan)液(ye)並(bing)檢查細胞密度。

2) 細(xi)胞傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞密度達(da) 80%-90%，即可(ke)進行傳代(dai)培(pei)養(yang)。

    a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上清，用不(bu)含(han)鈣、鎂離(li)子的PBS潤(run)洗細胞(bao)1-2次(ci)。        

    b、加1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中，使消化(hua)液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中消化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞情況(kuang)而定），然後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細胞消化(hua)情況(kuang)，若細胞大(da)部分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫落，迅速拿回操(cao)作臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)瓶後加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後裝入(ru)無(wu)菌離心(xin)管中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上清液，補(bu)加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹勻(yun)。        

     c、將細(xi)胞懸(xuan)液按1:2比例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的含8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的新皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶中，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細胞生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良好時(shi)，可(ke)進行細胞(bao)凍存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶為例(li)；a、收集(ji)細胞(bao)及細(xi)胞培(pei)養(yang)液(ye)，裝入(ru)無(wu)菌離心(xin)管中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上清液，用(yong)PBS清洗壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細胞(bao)計(ji)數(shu)。

     b、根據細胞(bao)數(shu)量(liang)加入(ru)無(wu)血清細胞(bao)凍存(cun)液(ye)，使細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混勻(yun)，每支(zhi)凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細(xi)胞懸液(ye)，註意凍存(cun)管(guan)做好標識。將凍存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄凍存(cun)管(guan)位置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次(ci)拿取。  

三(san)、培(pei)養(yang)註(zhu)意事項(xiang) 

1. 收到細(xi)胞(bao)後首先(xian)觀察細胞瓶是否完好，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有漏(lou)液、渾(hun)濁等現(xian)象(xiang)，若(ruo)有上述現(xian)象(xiang) 發(fa)生請及(ji)時(shi)和我們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細胞(bao)說明書(shu)，了(le)解(jie)細胞相關信息(xi)，如(ru)細(xi)胞形(xing)態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血清比例(li)、所(suo)需 細(xi)胞(bao)因子等，確保(bao)細胞培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致(zhi)而導致細(xi)胞出(chu)現(xian)問題，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶自(zi)行承擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細胞狀態(tai)。因運輸(shu)問題，部分(fen)細(xi)胞由(you)於溫(wen)度 變化(hua)及劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象(xiang)。觀察好細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態後，75%酒(jiu)精(jing)消毒(du)瓶壁(bi)將 T25 瓶置於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞(bao)可(ke)以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)直接(jie)混勻(yun)收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新鮮的培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接種到(dao)新(xin)的培(pei)養(yang)瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中進行培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用相同條(tiao)件(jian)的培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於細胞培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶收到細(xi)胞(bao)後前(qian) 3 天各拍幾(ji)張細(xi)胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便(bian)於和我司技(ji)術部溝通(tong) 交流(liu)。由(you)於運輸的原因，個別敏(min)感細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不穩(wen)定的情況(kuang)，請及時(shi)和我們聯(lian)系，告(gao)知細(xi)胞 的具體情況(kuang)，以(yi)便(bian)我們的技(ji)術人(ren)員跟(gen)蹤回(hui)訪直至(zhi)問題解決(jue)。

7. 該細胞(bao)僅供(gong)科(ke)研使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸用(yong)的培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再用來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換用按照(zhao)說明書(shu)細胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配制的培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到細(xi)胞(bao)後第(di)壹次(ci)傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出(chu)售的產品(pin)：

MCK10： 神(shen)經上皮酪酸激(ji)酶/癌激(ji)酶10抗(kang)體 人(ren)肝內(nei)膽(dan)管(guan)上皮細胞(bao)總RNAHIBEpiC NA

HL-7702人(ren)正常(chang)肝細(xi)胞 HL-7702 human normal liver cell 1640+10% FBS 大(da)鼠(shu)腺苷受(shou)體A1(ADORA1)ELISA試(shi)劑(ji)盒 CDl4(Human cluster Of differentiation)  人(ren)CD14分子 96T

MICA： MHC I類(lei)鏈(lian)相關蛋(dan)白(bai)A/組織(zhi)相容(rong)性(xing)復(fu)合物MHCIa抗(kang)體 CD200 Others Mouse 小鼠(shu) CD200 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

CL-0435SF126(人(ren)腦瘤細(xi)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠(shu)腺苷三(san)0酸結(jie)合(he)盒轉運(yun)體A1(ABCA1)ELISA試(shi)劑(ji)盒 AIF(Human apoptosis inducing factor)  人(ren)雕亡(wang)誘(you)導(dao)因子 96T

Midnolin： 中腦核仁蛋(dan)白(bai)抗(kang)體 小鼠(shu)樹(shu)突(tu)狀(zhuang)細(xi)胞肉(rou)瘤低轉移細(xi)胞(bao)(VAP33-GFP融合蛋(dan)白(bai)穩(wen)定過表達(da));DG6-VAP33-GFP

MAG Others Human 人(ren) MAG / GMA / Siglec-4 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 人(ren)氧(yang)化(hua)酶(DAO)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 GABRA1(gamma-aminobutyric acid (GABA) A receptor, alpha 1) γ1基A型(xing)受(shou)體α1抗(kang)原 0.5mg

HSP1： P1抗(kang)體 CL-00025637(人(ren)膀胱(guang)癌細(xi)胞)5×106cells/瓶×2

Malmc細(xi)胞(bao)，人(ren)皮膚(fu)纖(xian)維微(wei)細胞(bao)系 光(guang)滑(hua)念(nian)珠菌 雜交瘤(B類(lei));IB3C10H12A12G2H8F3 人(ren)兒茶酚胺(an)(CA)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 GABAB1(GABAb Receptor 1) g-基B1受(shou)體(多(duo)肽(tai)) 0.5mg

HGF： 肝細(xi)胞生(sheng)長因子抗(kang)體 FZD5 Others Human 人(ren) Frizzled-5 / FZD5 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

倉(cang)鼠(shu)腎細胞;HL-1 人(ren)多(duo)藥耐(nai)藥(yao)相關蛋(dan)白(bai)(MRP)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 GABABR2/GB2(GABA B Receptor 2) γ1基A型(xing)受(shou)體B2抗(kang)原 0.5mg

HS578T人(ren)乳腺癌細(xi)胞Phospho-PRAS40 (Thr246)： 0酸化(hua)蛋(dan)白(bai)激酶AKT底(di)物1抗(kang)體 CM-H020人(ren)胰島β細胞培(pei)養(yang)基(ji)100mL

RD人(ren)惡性(xing)胚胎(tai)橫(heng)紋(wen)肌(ji)瘤細(xi)胞 RD human maligna embryonal rhabdomyoma cells DMEM培(pei)養(yang)基(ji)+10%FBS 大(da)鼠(shu)二氫轉(zhuan)乙酰(xian)基(ji)酶(DLAT)ELISA試(shi)劑(ji)盒 PDGF-AB  大鼠(shu)血小板(ban)衍(yan)生生長因子AB 96T

Phospho-PRK1(Thr774) + PRK2 (Thr816)： 0酸化(hua)內(nei)分泌腺衍生血管(guan)內(nei)皮生長因子抗(kang)體 IL2RB Others Human 人(ren) IL2Rβ 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

EB病(bing)毒(du)轉化(hua)的人(ren)B淋巴(ba)細(xi)胞(bao);KMY1002 大鼠(shu)二0酸腺苷(ADP)ELISA試(shi)劑(ji)盒 ADRA1A(Human adrenergic alpha-1A receptor)  人(ren)能(neng)a1A受(shou)體 96T

PYK2： 富(fu)含(han)脯(pu)酸的酪酸激(ji)酶2抗(kang)體 婆(po)羅門牛皮膚(fu)成纖(xian)維樣細胞(bao);BOS-3