人博卡(ka)病(bing)毒(du)核酸檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)（熒(ying)光(guang)PCR法(fa)）

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 產(chan)品(pin)名稱(cheng)：人博卡(ka)病(bing)毒(du)核酸檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)（熒(ying)光(guang)PCR法(fa)）
規(gui)格(ge)：50T
編號(hao)：BH-P97211
分(fen)類(lei)：熒(ying)光(guang)PCR法(fa)
儲(chu)存(cun)條件：-20℃避光(guang)保(bao)存(cun)，避免(mian)反(fan)復凍(dong)融(rong)。
運(yun)輸(shu)：低溫、避光(guang)，快(kuai)遞免(mian)費(fei)送(song)貨(huo)上門。
產(chan)品(pin)特點：
◇高(gao)特異(yi)性：與(yu)其他(ta)病(bing)毒(du)無交(jiao)叉(cha)反(fan)應，無非(fei)特異(yi)性擴(kuo)增；
◇高(gao)靈敏(min)度(du)：檢(jian)測(ce)靈(ling)敏(min)度(du)可(ke)達10~100拷(kao)貝(bei)；
◇操作簡(jian)便：該(gai)系列(lie)所有(you)試劑(ji)均(jun)采用相(xiang)同的體系(xi)和(he)條件，可(ke)同時(shi)進(jin)行(xing)多(duo)個檢(jian)測(ce)；
◇高(gao)通量：多(duo)種(zhong)雙(shuang)重(zhong)PCR檢(jian)測(ce)以(yi)及三(san)重PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)。

準(zhun)備(bei)物(wu)品(pin)：
清(qing)理(li)液（A）                                   毫(hao)升(sheng)
染(ran)色(se)液(ye)（t B）                                   微升(sheng)
稀釋(shi)液(ye)（C）                                   毫(hao)升(sheng)
溶解(jie)液(ye)（tD）                                   毫(hao)升(sheng)
產(chan)品(pin)說明書                                   1份(fen)
使(shi)用及效(xiao)果(guo)：
PCR反(fan)應特點
(1) 特異(yi)性強
PCR反(fan)應的(de)特異(yi)性決(jue)定因(yin)素為：
①引物(wu)與(yu)模(mo)板DNA特異(yi)正確(que)的(de)結(jie)合；
②堿(jian)基(ji)配(pei)對(dui)原(yuan)則(ze)；
③Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)合成(cheng)反(fan)應的(de)忠(zhong)實(shi)性(xing)；
④靶(ba)基(ji)因(yin)的特異(yi)性與(yu)保(bao)守性(xing)。
其(qi)中引物(wu)與(yu)模(mo)板的(de)正確(que)結(jie)合是(shi)關(guan)鍵。引物(wu)與(yu)模(mo)板的(de)結(jie)合及引物(wu)鏈的(de)延(yan)伸(shen)是(shi)遵循堿(jian)基(ji)配(pei)對(dui)原(yuan)則(ze)的(de)。聚(ju)合(he)酶(mei)合成(cheng)反(fan)應的(de)忠(zhong)實(shi)性(xing)及Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)耐高(gao)溫性，使(shi)反(fan)應中模(mo)板與(yu)引物(wu)的(de)結(jie)合(復(fu)性(xing))可(ke)以(yi)在(zai)較(jiao)高(gao)的溫度(du)下(xia)進行，結(jie)合的特異(yi)性大(da)大(da)增加(jia)，被(bei)擴(kuo)增的靶(ba)基(ji)因(yin)片(pian)段也就能保(bao)持很(hen)高(gao)的正確(que)度(du)。再(zai)通過選擇特異(yi)性和(he)保(bao)守性(xing)高(gao)的靶(ba)基(ji)因(yin)區，其(qi)特異(yi)性程度(du)就更高(gao)。
(2) 靈(ling)敏(min)度(du)高(gao)
PCR產(chan)物(wu)的(de)生成(cheng)量是(shi)以(yi)指(zhi)數方式增加(jia)的(de)，能將(jiang)皮克(pg=10-12g)量級(ji)的(de)起(qi)始待測(ce)模(mo)板擴(kuo)增到微克(ug=10-6g)水(shui)平(ping)。能從(cong)100萬(wan)個細(xi)胞中檢(jian)出(chu)壹(yi)個靶(ba)細(xi)胞；在病(bing)毒(du)的檢(jian)測(ce)中，PCR的(de)靈(ling)敏(min)度(du)可(ke)達3個RFU(空(kong)斑形(xing)成(cheng)單(dan)位)；在(zai)細(xi)菌學(xue)中zui小(xiao)檢(jian)出(chu)率(lv)為3個細(xi)菌。
(3) 簡(jian)便、快(kuai)速
PCR反(fan)應用耐高(gao)溫的Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)，壹次(ci)性地將反(fan)應液(ye)加(jia)好後，即在(zai)DNA擴(kuo)增液和(he)水(shui)浴鍋(guo)上進行變性-退(tui)火(huo)-延(yan)伸(shen)反(fan)應，壹(yi)般(ban)在(zai)2～4 小(xiao)時(shi)完成(cheng)擴增反(fan)應。擴(kuo)增產(chan)物(wu)壹(yi)般(ban)用電泳分(fen)析(xi)，不(bu)壹(yi)定要用同(tong)位素，無放射性汙(wu)染(ran)、易推(tui)廣。
(4) 對(dui)標(biao)本(ben)的純度(du)要求低
不(bu)需(xu)要分(fen)離(li)病(bing)毒(du)或細(xi)菌及培養(yang)細(xi)胞，DNA 粗制品(pin)及總(zong)RNA均(jun)可作(zuo)為擴增模(mo)板。可(ke)直接(jie)用臨(lin)床標(biao)本(ben)如血(xue)液(ye)、體腔液(ye)、洗(xi)嗽液、毛(mao)發(fa)、細(xi)胞、活PCR技(ji)術(shu)概論。
上皮細(xi)胞總(zong)RNAHMEpiC NA聚(ju)酰胺(an)粉(fen)(柱(zhu)層(ceng)析(xi)用，10-30目(mu))Polyamide柱(zhu)層(ceng)析(xi)用，10-30目(mu)

CTSL1 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) CTSL / Cathepsin-L 細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 1酸(suan)氫(qing)二(er)鈉,二(er)水(shui)(for HPLC, ≥99%(T)) phosphate dibasic dihydratefor HPLC, ≥99%(T)

HCT-15 結(jie)腸(chang)癌細(xi)胞(農(nong)殘級(ji)) sulfate anhydrous農(nong)殘級(ji)

CL-0401NCI-H446(小(xiao)細(xi)胞肺癌(ai)細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2(for HPLC,≥99.0%(T)) sulfate anhydrousfor HPLC,≥99.0%(T)

MSC, 小(xiao)鼠(shu)雪(xue)旺(wang)細(xi)胞(for HPLC,≥99.0%) bicarbonatefor HPLC,≥99.0%
DPYS Others Human  DPYS / Dihydropyrimidinase 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 抑(yi)氨肽酶(mei)(進(jin)口(kou))>99%,美國進(jin)口(kou)sc-202975Bestatin,Ubenimex

軟骨細(xi)胞HC-a高(gao)藜蘆(lu)酸()HPLC≥98.0%(3,4-Dimethoxyphenyl)acetic acid

羅(luo)猴胎腎(shen)細(xi)胞;MA104 腦(nao)膠(jiao)質(zhi)瘤(liu)細(xi)胞，C6細(xi)胞 NCI-H446 [H446](小(xiao)細(xi)胞肺癌(ai)細(xi)胞)二(er)乙酰壹1(>98%，BR)>98%，BRDiacetyl monoxime

前(qian)列腺癌細(xi)胞;DU 145 [DU145;DU-145]馬(ma)來酸(suan)二(er)乙酯(zhi)(>98%，BR)>98%，BRDiethyl maleate

TNFRSF14 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) HVEM / TNFRSF14 細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 二(er)氫細(xi)胞弛素(>98%，BR)>98%，BRDihydrocytochalasin B
人博卡(ka)病(bing)毒(du)核酸檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)（熒(ying)光(guang)PCR法(fa)）KM小(xiao)鼠(shu)未分(fen)化神經(jing)膠質(zhi)瘤(liu)瘤(liu)株(zhu);B22草酸(suan)脫(tuo)氫(qing)美國進(jin)口(kou)Dehydro Amlodipine Oxalate

中國倉(cang)鼠(shu)卵巢(chao)細(xi)胞(亞(ya)系(xi)克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr 腹水(shui)瘤(liu)細(xi)胞，S-180細(xi)胞 SVEC4-10細(xi)胞，小(xiao)鼠(shu)結(jie)血管上皮樣(yang)細(xi)胞(R)-美國進(jin)口(kou)(R)-Amlodipine

永生化表皮(pi)細(xi)胞;HaCaT阿瑞(rui)匹(pi)坦(tan)-標(biao)記(ji)d4美國進(jin)口(kou)Aprepitant - Labeled d4

CTLA4 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) CTLA4 / CD152 細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 阿瑞(rui)匹(pi)坦(tan)-M3代(dai)謝物(wu)美國進(jin)口(kou)Aprepitant-M3 Metabolite

猞(she)猁皮(pi)膚(fu)成(cheng)纖(xian)維(wei)樣(yang)細(xi)胞;ELS1OSI-420，遊離堿(jian)（去甲(jia)埃(ai)羅(luo)替(ti)尼）美國進(jin)口(kou)OSI-420, Free Base (Desmethyl Erlotinib)
檢(jian)測(ce)步驟：
壹(yi)、 試(shi)劑(ji)的(de)準(zhun)備(bei)
從(cong)試劑(ji)盒(he)中取出(chu)熒(ying)光(guang)PCR反(fan)應液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混合(he)物(wu)(Enzymes MIX)，冰上融(rong)化並(bing)振(zhen)蕩混(hun)勻(yun)後，10000rpm離(li)心(xin)10s。
設(she)所(suo)需(xu)要的PCR反(fan)應管(guan)管(guan)數為N(N=樣(yang)本(ben)數+1管(guan)陰(yin)性(xing)對照+1管(guan)陽性(xing)對(dui)照)，每(mei)個測(ce)試(shi)反(fan)應體系(xi)配(pei)制如下(xia)表：
試(shi)劑(ji) 每(mei)個反(fan)應加(jia)入的量 N個反(fan)應加(jia)入的量
熒(ying)光(guang)PCR反(fan)應液(ye) 14µL N×14µL
酶(mei)混合(he)物(wu) 1 µL N×1 µL
總(zong)量 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算(suan)好各試(shi)劑(ji)的(de)使(shi)用量，加(jia)入壹適當(dang)體積潔(jie)凈離(li)心(xin)管中，充(chong)分(fen)混(hun)勻，10000rpm離(li)心(xin)10s，向設(she)定的N個PCR反(fan)應管(guan)中分(fen)別(bie)加(jia)入15μL熒(ying)光(guang)PCR反(fan)應液(ye)，向每(mei)管中加(jia)入處(chu)理(li)後樣(yang)品(pin)或陰(yin)性對(dui)照(zhao)(NTC)和(he)陽性(xing)對(dui)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shi)離(li)心(xin)10秒。
7.2 qPCR反(fan)應條件
將(jiang)各反(fan)應管(guan)放入定量PCR儀(yi)器的反(fan)應槽(cao)內(nei)。
循(xun)環條件:
1循(xun)環 50℃ for 2 min
預變(bian)性(xing) 1循(xun)環 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增 40循(xun)環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延(yan)伸(shen)時(shi)收(shou)集熒光(guang)信(xin)號(hao)。報告(gao)基(ji)團(tuan)：設(she)置為FAM。淬(cui)滅基團(tuan)：NONE，請(qing)勿選(xuan)擇ROX參(can)比(bi)熒(ying)光(guang)。