K1(GLAG-66)人甲(jia)狀腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao)

公司(si)產(chan)品僅供科研研究(jiu)使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的 80%面積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後加(jia)入 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終止消(xiao)化，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之脫落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行分瓶(ping)傳代(dai)，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的 80%面積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後加(jia)入培(pei)養(yang)液(ye)終

止消(xiao)化，輕輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之脫落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並放置於凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其移(yi)入-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液氮中(zhong)進(jin)行長(chang)期保(bao)存(cun)。使(shi)用(yong)程序

降(jiang)溫(wen)盒(he)可直(zhi)接放入-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以下(xia)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處(chu)理僅供參考，具體操作(zuo)步(bu)驟以隨(sui)貨(huo)產(chan)品說(shuo)明書(shu)為主。將(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻(yun)。然(ran)後(hou)將(jiang)所有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入含(han)適(shi)量培養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜(ye)）。第二天換液(ye)並檢查(zha)細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進行傳代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄去(qu)培(pei)養(yang)上清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離子(zi)的PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化液浸(jin)潤所有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)置於37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視細(xi)胞(bao)情況(kuang)而定(ding)），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部分變圓(yuan)並脫落，迅速(su)拿回(hui)操作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶(ping)後加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終止消(xiao)化。輕輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例(li)分到(dao)新的含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的新皿(min)中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)，置於培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待細(xi)胞(bao)生長(chang)狀態良(liang)好時，可進行細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄盡PBS，進(jin)行細(xi)胞(bao)計數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量加(jia)入無血清(qing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做好(hao)標(biao)識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入液氮灌儲(chu)存(cun)。記(ji)錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置以便(bian)下次拿取(qu)。

公司(si)正(zheng)在(zai)出(chu)售的產(chan)品：

MS4A14： 發(fa)育(yu)相關(guan)蛋白(bai)抗體 FUT8 Others Human 人 FUT8 (aa 68-575) 桿(gan)狀病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

大鼠(shu)腦(nao)靜脈血(xue)管內皮(pi)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大鼠(shu)血(xue)管(guan)生成(cheng)素(su)樣(yang)蛋白(bai)3(ANGPTL3)ELISA試(shi)劑盒(he) PYD  大鼠(shu)酚(fen) 96T

MS4A15： MS4A15蛋白(bai)抗體 OS-RC-2細(xi)胞(bao)，腎(shen)癌(ai)細(xi)胞(bao) 小(xiao)細(xi)胞(bao)肺癌,SH-77細(xi)胞(bao) 人腎(shen)癌Wilms細(xi)胞(bao);G401

FCGRT & B2M Others Mouse 小鼠(shu) FCGRT & B2M Heterodimer 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 大鼠(shu)血(xue)管(guan)生成(cheng)素(su)樣(yang)蛋白(bai)2(ANGPTL2)ELISA試(shi)劑盒(he) Wheat germ agglutinin,WGA  麥(mai)胚凝集素(su)/凝集蛋白(bai) 96T

MS4A6A： 四(si)度(du)跨(kua)膜(mo)蛋白(bai)3抗體 人胚胎肌肉組(zu)織來源(yuan)細(xi)胞(bao);CCC-HSM-2

恒河(he)猴腎細(xi)胞(bao);MMK2 人胱(guang)天蛋白(bai)酶(mei)9(Casp-9)ELISA 試(shi)劑盒(he) c-Myc tag c-Myc tag標(biao)簽多肽(tai) 0.5mg

HGFA： 肝細(xi)胞(bao)生長(chang)因子(zi)激(ji)活(huo)蛋白(bai)抗體 腺病(bing)毒轉(zhuan)化的人胚腎(shen)細(xi)胞(bao);AAV-293

K-562(人慢性(xing)骨(gu)髓(sui)性(xing)白(bai)血(xue)病(bing)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 食蟹(xie)猴 COLEC10 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 人胱(guang)天蛋白(bai)酶(mei)8(Casp-8)ELISA 試(shi)劑盒(he) AU5 tag AU5 tag標(biao)簽抗原 0.5mg

HDGF： 肝癌(ai)衍生生長(chang)因子(zi)抗體 人心(xin)肌細(xi)胞(bao)-裂(lie)解(jie)物HCM-a L

ANGPTL7 Protein Canine 重組(zu)狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白(bai) (His 標(biao)簽) 人胱(guang)天蛋白(bai)酶(mei)3(Casp-3)ELISA 試(shi)劑盒(he) AU1 tag peptide AU1 tag標(biao)簽多肽(tai) 0.5mg

K1(GLAG-66)人甲(jia)狀腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao)PHD2： 脯酸(suan)羥化(hua)酶(mei)2抗體 人脂(zhi)肪間充質幹細(xi)胞(bao)HMSC-ad

VSTM1 Protein Human 重組(zu)人 VSTM1 蛋白(bai) (His 標(biao)簽) 大鼠(shu)幹(gan)細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)受(shou)體(SCFR)ELISA 試(shi)劑盒(he) RV Ag(Human Rotavirus antigen)  人輪(lun)狀病(bing)毒抗原 96T

PSAP： 鞘脂(zhi)激(ji)活(huo)蛋白(bai)原抗體 IGFBP5 Others Cynomolgus 食蟹(xie)猴 IGFBP5 / IGFBP-5 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

MA891瘤 癌(ai) 大鼠(shu)幹(gan)細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)/肥(fei)大細(xi)胞(bao)生長(chang)因子(zi)(SCF/MGF)ELISA試(shi)劑盒(he) KAF/AR  大鼠(shu)角(jiao)化(hua)細(xi)胞(bao)內分泌(mi)因子(zi)/雙(shuang)調(tiao)蛋白(bai) 96T

PBR： 外(wai)周(zhou)苯(ben)二氮受(shou)體抗體 SK-MES-1細(xi)胞(bao)，人肺癌細(xi)胞(bao) 人膀胱鱗癌細(xi)胞(bao),ScaBER細(xi)胞(bao) 人前(qian)脂(zhi)肪細(xi)胞(bao)-皮(pi)下(xia)HPA-s

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首先觀察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有漏液(ye)、渾濁等現(xian)象(xiang)，若(ruo)有上述(shu)現(xian)象(xiang) 發(fa)生請及時和(he)我們(men)聯(lian)系。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了解(jie)細(xi)胞(bao)相關(guan)信息，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態、所用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比例(li)、所需 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由於(yu)培養(yang)條(tiao)件不(bu)壹致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問題，責任由(you) 客(ke)戶(hu)自(zi)行承擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面(mian)，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞(bao)狀態。因(yin)運輸問(wen)題(ti)，部分細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變化及劇(ju)烈碰(peng)亡破碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象(xiang)。觀察好(hao)細(xi)胞(bao)狀態後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置於 37℃培養(yang)箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞(bao)可以消(xiao)化，懸浮(fu)細(xi)胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並接種(zhong)到(dao)新的培養(yang)瓶(ping)或培養(yang)皿(min)中(zhong)，置於培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用相同(tong)條(tiao)件的培養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態，便(bian)於和(he)我(wo)司(si)技(ji)術(shu)部溝(gou)通 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運輸的原因，個別敏(min)感(gan)細(xi)胞(bao)會出(chu)現(xian)不(bu)穩定(ding)的情況(kuang)，請及時和(he)我們(men)聯(lian)系，告知細(xi)胞(bao) 的具體情況(kuang)，以便(bian)我們(men)的技術(shu)人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪直(zhi)至問題解(jie)決。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅(jin)供科研使(shi)用(yong)。

8. 備註(zhu)：運輸用(yong)的培養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培養(yang)基(ji)) 不(bu)能再用(yong)來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明書(shu)細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件新配制的培養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第壹(yi)次傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。