JIMT-1人乳(ru)腺(xian)癌細胞(bao)

公(gong)司產品僅供(gong)科研研究(jiu)使(shi)用、不(bu)得用(yong)於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷(duan)！

1、細胞(bao)傳(chuan)代：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶的 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養瓶中的培養液，用 PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡下(xia)觀察(cha)，待(dai)細胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入 5ml 培養

液終止消(xiao)化(hua)，再輕輕吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之脫落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上清(qing)，沈(chen)澱細胞(bao)用 1-2ml 培養基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按 1:2 比(bi)例進(jin)行分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培養箱中培養；

2、細胞(bao)凍存：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶的 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養瓶中的培養液，用 PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡下(xia)觀察(cha)，待(dai)細胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入培養液終

止消(xiao)化(hua)，輕輕吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之脫落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，並放(fang)置(zhi)於(yu)凍存管中；

4）先將(jiang)細胞(bao)凍存管放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其移入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液氮(dan)中進(jin)行長(chang)期(qi)保(bao)存(cun)。使(shi)用程(cheng)序

降溫盒可直接(jie)放入-80℃。

二(er)、細胞(bao)培養操作

1) 復蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞(bao)培養凍存(cun)處(chu)理(li)僅供(gong)參考(kao)，具體(ti)操作步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產品說(shuo)明(ming)書(shu)為(wei)主。將(jiang)含有1 mL細胞(bao)懸液的凍存管在(zai) 37℃水浴中迅速(su)搖晃解(jie)凍(dong)，加4 mL培養基(ji)混合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液，加1-2 mL培養基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然後(hou)將(jiang)所有細胞(bao)懸液加入含(han)適(shi)量培養基(ji)的培養瓶中培養過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞(bao)懸液加入10 cm皿(min)中，加入約8 mL培養基(ji)，培養過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天換液並檢查細胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代：如果(guo)細胞(bao)密(mi)度(du)達 80%-90%，即可進(jin)行傳(chuan)代培養。

a、棄去(qu)培養上清(qing)，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的PBS潤洗細胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸(jin)潤所(suo)有細胞(bao)，將(jiang)培養瓶置(zhi)於(yu)37℃培養箱中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞(bao)情況(kuang)而(er)定），然後(hou)在(zai)顯(xian)微鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)消(xiao)化(hua)情況(kuang)，若(ruo)細胞(bao)大部分變(bian)圓(yuan)並脫落(luo)，迅速(su)拿(na)回操作臺(tai)，輕敲幾下(xia)培養瓶後(hou)加2-3ml培養基(ji)終止消(xiao)化(hua)。輕輕打(da)勻(yun)後(hou)裝入(ru)無菌(jun)離心(xin)管中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液，補(bu)加1-2 mL培養液後(hou)吹勻(yun)。

c、將(jiang)細胞(bao)懸液按1:2比(bi)例分到(dao)新的含8 mL培養基(ji)的新皿中或者(zhe)瓶中，置(zhi)於(yu)培養箱中培養。 3) 細胞(bao)凍存：待細胞(bao)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時(shi)，可進(jin)行細胞(bao)凍存。下面 T25 瓶為(wei)例；a、收集細胞(bao)及細胞(bao)培養液，裝入(ru)無菌(jun)離心(xin)管中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細胞(bao)計數。

b、根(gen)據(ju)細胞(bao)數量加入無血(xue)清(qing)細胞(bao)凍存液，使(shi)細胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每(mei)支凍存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸液，註意凍(dong)存(cun)管做(zuo)好標識。將(jiang)凍存管放入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入(ru)液氮(dan)灌儲存(cun)。記錄(lu)凍存管位置(zhi)以(yi)便(bian)下次拿(na)取。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出售的產品：

MTLC： 致(zhi)癌基(ji)因抗(kang)體(ti) Dami細胞(bao)，巨(ju)核(he)細胞(bao)白(bai)血(xue)病(bing)細胞(bao) 黑色(se)素瘤,MM96L細胞(bao) 人卵巢(chao)畸胎瘤細胞(bao);PA-1

ERBB4 Others Human 人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 人細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao)) 大鼠血(xue)管舒(shu)緩(huan)激肽(BK)ELISA 試(shi)劑盒 sIL-6R  大鼠可溶(rong)性白(bai)介素6受(shou)體(ti) 96T

MAP4K5： 原(yuan)活化(hua)蛋白(bai)激酶MAP4K5抗(kang)體(ti) 人上皮(pi)細胞(bao);MCF-10A

RF/6A猴脈絡膜(mo)-視(shi)網膜(內皮(pi))細胞(bao) RF/6A monkey chorioretinal cells (endothelial) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠血(xue)管生(sheng)長(chang)素(ANG)ELISA試(shi)劑盒 sFAS/Apo-1 (Rabbit soluble Factor-related Apoptosis)  兔(tu)可溶(rong)性雕(diao)亡(wang)相(xiang)關因子(zi) 96T

MKLN1： MKLN1抗(kang)體(ti) CD40 Others Human 人 CD40 / TNFRSF5 人細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao))

Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴(ba)細胞(bao)白(bai)血(xue)病(bing)細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 食蟹(xie)猴 / 恒(heng)河猴 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao)) 人過(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)酶體(ti)增(zeng)殖激活物(wu)受體(ti)γ輔(fu)激活因子(zi)1α(PPARGC1)ELISA試劑盒 CK7(Cytokeratin 7)human 細胞(bao)角(jiao)蛋白(bai)7抗(kang)原(yuan) 0.5mg

ORF K14(HHV8)： 人類皰(pao)疹病(bing)毒(du)8 ORF14抗(kang)體(ti) 人虹膜(mo)色素上皮(pi)細胞(bao)裂解(jie)物(wu)HIPEpiCL

ANGPTL7 Protein Cynomolgus 重(zhong)組食蟹(xie)猴 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白(bai) (His 標簽(qian)) 人過(guo)敏毒(du)素/補(bu)體(ti)片斷(duan)4(C4a)ELISA 試劑盒 CK8(Cytokeratin 8) 細胞(bao)角(jiao)蛋白(bai)8(多肽) 0.5mg

Hyaluronidase3： 透(tou)明(ming)質酸(suan)酶2/2抗(kang)體(ti) RSPO1 Others Mouse 小鼠(shu) R-Spondin 1 / RSPO1 CHO細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao))

人肺大動脈內皮(pi)細胞(bao)培養基(ji) 100mL 人果(guo)糖1,6二(er)0酸縮(suo)酶(FDA)ELISA 試(shi)劑盒 CKIP-1(casein kinase 2 interaction protein 1) 酪蛋白(bai)激酶2相(xiang)互(hu)作用(yong)蛋白(bai)1抗(kang)原(yuan) 0.5mg

JIMT-1人乳(ru)腺(xian)癌細胞(bao)VSTM1 Protein Human 重(zhong)組人 VSTM1 蛋白(bai) (Fc 標簽(qian)) 大鼠高密(mi)度(du)脂(zhi)蛋白(bai)(HDL)ELISA試(shi)劑盒 ANG-1  大鼠血(xue)管生(sheng)成素1 96T

PKD1L3： 多囊腎(shen)蛋白(bai)1樣(yang)3抗(kang)體(ti) HA Others H7N9 甲型(xing)流感(gan) H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血(xue)凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao))

MA-891 小鼠(shu)癌(ai)高轉(zhuan)移細胞(bao) 大鼠高密(mi)度(du)脂(zhi)蛋白(bai)(HDL)ELISA試(shi)劑盒 LTB(Human heat-labile enterotoxin B subunit)  人不(bu)耐熱腸(chang)毒(du)素B亞(ya)單位 96T

PIRT： 0酸(suan)肌醇相(xiang)互(hu)作用(yong)蛋白(bai)抗(kang)體(ti) NCI-H226[H226]細胞(bao)，人肺癌(ai)細胞(bao) 人膀胱(guang)移行細胞(bao)癌細胞(bao),T24細胞(bao) 人絨毛(mao)膜毛(mao)細血(xue)管內(nei)皮(pi)細胞(bao)HVCEC

IGFBP7 Others Human 人 IGFBP7 / IBP-7 人細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對照(zhao)) 大鼠高靈(ling)敏度(du)促甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)激素(U-TSH)ELISA試(shi)劑盒 CT(Human Chlamydia trachomatis)  人沙眼衣原(yuan)體(ti)抗(kang)體(ti) CM-R045大鼠小腸(chang)粘膜上皮(pi)細胞(bao)培養基(ji)100mL

三(san)、培養註意事(shi)項(xiang) 

1. 收到(dao)細胞(bao)後(hou)首(shou)先觀察(cha)細胞(bao)瓶是否(fou)完(wan)好，培養液是否(fou)有漏液、渾濁等(deng)現象(xiang)，若(ruo)有上述現(xian)象(xiang) 發(fa)生(sheng)請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯系。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞(bao)說明書(shu)，了解(jie)細胞(bao)相(xiang)關信息(xi)，如細胞(bao)形態、所(suo)用培養基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例、所需 細胞(bao)因子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞(bao)培養條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由於(yu)培養條(tiao)件(jian)不(bu)壹致(zhi)而導致(zhi)細胞(bao)出現問(wen)題(ti)，責任(ren)由 客(ke)戶(hu)自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦拭(shi)細胞(bao)瓶表(biao)面，顯(xian)微鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細胞(bao)由於(yu)溫度(du) 變(bian)化(hua)及劇烈碰亡(wang)破(po)碎(sui)形成碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現象(xiang)。觀察(cha)好細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒精消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培養箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞(bao)可以(yi)消(xiao)化(hua)，懸浮(fu)細胞(bao)直接(jie)混勻(yun)收集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的培養基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞(bao)，並接(jie)種(zhong)到(dao)新的培養瓶或(huo)培養皿中，置(zhi)於(yu)培養箱中進(jin)行培養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的培養基(ji)用於(yu)細胞(bao)培養。

6. 建議(yi)客戶(hu)收到(dao)細胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾張(zhang)細胞(bao)照片，記錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和(he)我(wo)司(si)技(ji)術(shu)部(bu)溝通 交(jiao)流。由於(yu)運(yun)輸(shu)的原(yuan)因，個(ge)別(bie)敏感(gan)細胞(bao)會出現不(bu)穩定的情況(kuang)，請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯系，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的具體(ti)情況(kuang)，以(yi)便(bian)我們(men)的技術人員(yuan)跟(gen)蹤回訪直至(zhi)問(wen)題(ti)解(jie)決。

7. 該細胞(bao)僅供(gong)科研使(shi)用。

8. 備(bei)註：運(yun)輸(shu)用的培養基(ji) (灌液培養基(ji)) 不(bu)能再(zai)用(yong)來(lai)培養細胞(bao)，請(qing)換用按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)細胞(bao)培 養條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制的培養基(ji)來培養細胞(bao)。     收到(dao)細胞(bao)後(hou)第(di)壹次傳(chuan)代建議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。