牛(niu)支(zhi)原(yuan)體(ti)（MYPB）核酸(suan)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

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 產(chan)品(pin)名稱(cheng)：牛(niu)支(zhi)原(yuan)體(ti)（MYPB）核酸(suan)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)
規(gui)格(ge)：50T
編號：BH-P96793
分(fen)類(lei)：熒光PCR法
儲(chu)存條(tiao)件(jian)：-20℃避(bi)光保存，避(bi)免反復(fu)凍融。
運輸：低(di)溫、避(bi)光，快(kuai)遞免(mian)費送貨上門(men)。
產(chan)品特(te)點：
◇高特(te)異(yi)性：與其(qi)他(ta)病(bing)毒(du)無(wu)交(jiao)叉反應(ying)，無(wu)非(fei)特(te)異(yi)性擴(kuo)增(zeng)；
◇高靈(ling)敏(min)度(du)：檢(jian)測靈(ling)敏(min)度(du)可(ke)達10~100拷貝(bei)；
◇操(cao)作簡便：該系列所有試劑(ji)均采(cai)用(yong)相同(tong)的(de)體系和條(tiao)件(jian)，可(ke)同(tong)時(shi)進行多個檢(jian)測；
◇高通(tong)量(liang)：多種雙重(zhong)PCR檢(jian)測以(yi)及(ji)三(san)重(zhong)PCR檢(jian)測試劑(ji)盒(he)。

準(zhun)備(bei)物(wu)品(pin)：
清理液（A）                                   毫(hao)升
染(ran)色液（t B）                                   微升(sheng)
稀(xi)釋液（C）                                   毫(hao)升
溶解(jie)液（tD）                                   毫(hao)升
產(chan)品說明(ming)書(shu)                                   1份
使用(yong)及(ji)效(xiao)果(guo)：
PCR反應(ying)特(te)點
(1) 特(te)異(yi)性強(qiang)
PCR反應(ying)的(de)特(te)異(yi)性決定(ding)因素(su)為：
①引(yin)物(wu)與(yu)模(mo)板(ban)DNA特(te)異(yi)正確(que)的(de)結(jie)合；
②堿基配(pei)對原(yuan)則；
③Taq DNA聚合酶合成(cheng)反應(ying)的(de)忠實(shi)性；
④靶(ba)基因的(de)特(te)異(yi)性與保守(shou)性(xing)。
其(qi)中(zhong)引物(wu)與(yu)模(mo)板(ban)的(de)正確(que)結(jie)合是關(guan)鍵。引物(wu)與(yu)模(mo)板(ban)的(de)結(jie)合及(ji)引(yin)物(wu)鏈的(de)延伸(shen)是(shi)遵(zun)循(xun)堿基配(pei)對原(yuan)則的(de)。聚合酶合成(cheng)反應(ying)的(de)忠實(shi)性及(ji)Taq DNA聚合酶耐(nai)高溫性(xing)，使反應(ying)中(zhong)模(mo)板(ban)與引物(wu)的(de)結(jie)合(復(fu)性)可以在較(jiao)高的(de)溫度(du)下進行，結(jie)合的(de)特(te)異(yi)性大大增(zeng)加，被(bei)擴(kuo)增(zeng)的(de)靶(ba)基因片(pian)段也就能保持(chi)很(hen)高的(de)正確(que)度(du)。再(zai)通(tong)過選(xuan)擇(ze)特(te)異(yi)性和保(bao)守性高的(de)靶(ba)基因區(qu)，其(qi)特(te)異(yi)性程度(du)就更高。
(2) 靈(ling)敏(min)度(du)高
PCR產物(wu)的(de)生(sheng)成(cheng)量(liang)是(shi)以(yi)指(zhi)數(shu)方式(shi)增(zeng)加的(de)，能將(jiang)皮(pi)克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級的(de)起始待測模(mo)板(ban)擴(kuo)增(zeng)到(dao)微克(ke)(ug=10-6g)水(shui)平(ping)。能(neng)從100萬(wan)個細胞中(zhong)檢(jian)出壹個(ge)靶(ba)細胞(bao)；在病(bing)毒(du)的(de)檢(jian)測中(zhong)，PCR的(de)靈(ling)敏(min)度(du)可(ke)達3個RFU(空斑形成(cheng)單(dan)位(wei))；在細(xi)菌(jun)學(xue)中(zhong)zui小(xiao)檢(jian)出率(lv)為3個(ge)細菌(jun)。
(3) 簡便、快(kuai)速(su)
PCR反應(ying)用(yong)耐(nai)高溫的(de)Taq DNA聚合酶，壹次(ci)性(xing)地(di)將反應(ying)液加(jia)好(hao)後，即在DNA擴(kuo)增(zeng)液和水(shui)浴鍋(guo)上(shang)進行變(bian)性-退(tui)火-延(yan)伸(shen)反應(ying)，壹般(ban)在2～4 小時(shi)完成(cheng)擴(kuo)增(zeng)反應(ying)。擴(kuo)增(zeng)產物(wu)壹般(ban)用(yong)電(dian)泳分析，不壹定(ding)要用(yong)同(tong)位素(su)，無(wu)放(fang)射性(xing)汙(wu)染(ran)、易(yi)推(tui)廣。
(4) 對(dui)標本(ben)的(de)純(chun)度(du)要求(qiu)低
不需要分(fen)離(li)病(bing)毒(du)或(huo)細菌(jun)及(ji)培養細(xi)胞(bao)，DNA 粗(cu)制品及(ji)總(zong)RNA均可(ke)作為擴(kuo)增(zeng)模(mo)板(ban)。可直接用(yong)臨(lin)床標(biao)本(ben)如(ru)血(xue)液、體腔(qiang)液、洗(xi)嗽液、毛發(fa)、細胞(bao)、活(huo)PCR技(ji)術(shu)概(gai)論(lun)。
NCI-H596(肺腺鱗癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2抑(yi)黴(mei)唑（） Imazalil分析

CNE(鼻咽(yan)癌(ai)細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 CL-0134KU812(外(wai)周血嗜堿性(xing)白血病(bing)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 雜(za)交(jiao)瘤(liu)(B類(lei));Z1510A2G6A2C7春雷(lei)黴素(su)鹽酸(suan)鹽（）Kasugamycin 分析,≥90% (HPLC)

中(zhong)國倉(cang)鼠卵(luan)巢細胞(亞(ya)系克隆);CHO-HCV-E2標(biao)準(zhun)溶液(ye)（10μg/ml,u=4%）Kitazine solution10μg/ml,u=4%

ERN1 Others Human  ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照) 利(li)谷隆(long)（） Linuron分析

滑膜細胞(bao)Many types of cells(1ml)苯(ben)噻(sai)草(cao)胺（）Mefenacet分(fen)析,98.5%
小鼠周神(shen)經成(cheng)纖維細(xi)胞(MPNF)(5×105) HL-60, 早幼(you)粒(li)白血病(bing)細胞(bao) Human氧化(hua)偶氮(dan)苯-4,4'-二羧酸(suan)二乙酯(>97.0%(GC))>97.0%(GC)Diethyl Azoxybenzene-4,4'-dicarboxylate

中(zhong)國倉(cang)鼠肺細胞(bao);CHL4,4'-雙(己(ji)氧基)氧化(hua)偶氮(dan)苯(>96.0%(N))>96.0%(N)4,4'-Bis(hexyloxy)azoxybenzene

髓(sui)核細胞(HNPC)(5×105)4,4'-二戊氧基氧化(hua)偶氮(dan)苯(>95.0%(N))>95.0%(N)4,4'-Diamyloxyazoxybenzene

CL-0083FaDu(咽(yan)鱗(lin)癌細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×24,4'-二丁(ding)氧基氧化(hua)偶氮(dan)苯4,4'-Dibutoxyazoxybenzene

小(xiao)鼠(shu)垂體瘤(liu)細胞(bao);GT1-1 大鼠角(jiao)膜成(cheng)纖維細(xi)胞*培養基 100mL水(shui)楊酸(suan)（）含量測定(ding)Salicylic acid
牛(niu)支(zhi)原(yuan)體(ti)（MYPB）核酸(suan)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)CD93 Others Human  CD93 / C1QR1 細胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照) PEPSTATIN抑制(zhi)劑(ji)超級白色粉末(mo)COLDsigma

MS751 頸(jing)表(biao)皮(pi)癌(ai)細胞3-羌(qiang)基炳(bing)晴puriss》99.0% 3-xy7noxypropionitnilq 109-78-4

NCI-H661大細胞(bao)肺(fei)癌細胞(bao) NCI-H661 large cell lung cancer cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSpxenOLPHTHALEIN白色至米白色固體(ti)RTsigma

AIMP1 Protein Human 重(zhong)組(zu) AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 (His 標簽(qian))PROTEINMWMARKER,HIGHRANGE蛋白Marker生(sheng)物(wu)技(ji)術(shu)級(ji)液(ye)體(ti)FROZENsigma

胚(pei)肺(fei)二倍體細胞(bao);2BS 前列腺成(cheng)纖維細(xi)胞*培養基 100mL9004-34-6微晶纖維素(su)Microcrystalline Cellulose (AS)
檢(jian)測步驟：
壹、 試劑(ji)的(de)準(zhun)備(bei)
從(cong)試劑(ji)盒(he)中(zhong)取(qu)出熒光PCR反應(ying)液(BC-qPCR MIX)、酶混(hun)合物(wu)(Enzymes MIX)，冰上(shang)融化(hua)並振蕩(dang)混(hun)勻(yun)後，10000rpm離(li)心10s。
設所(suo)需要的(de)PCR反應(ying)管管數(shu)為N(N=樣(yang)本數(shu)+1管陰(yin)性(xing)對照+1管陽(yang)性(xing)對照)，每(mei)個測試反應(ying)體系配(pei)制如(ru)下表(biao)：
試劑(ji) 每(mei)個反應(ying)加入(ru)的(de)量 N個(ge)反應(ying)加入(ru)的(de)量
熒光PCR反應(ying)液 14µL N×14µL
酶混(hun)合物(wu) 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算(suan)好各試劑(ji)的(de)使用(yong)量(liang)，加入(ru)壹適當(dang)體(ti)積(ji)潔凈(jing)離(li)心管中(zhong)，充(chong)分混(hun)勻(yun)，10000rpm離(li)心10s，向(xiang)設定(ding)的(de)N個(ge)PCR反應(ying)管中(zhong)分別(bie)加(jia)入(ru)15μL熒光PCR反應(ying)液，向(xiang)每(mei)管中(zhong)加入(ru)處理後樣品(pin)或(huo)陰(yin)性(xing)對照(NTC)和陽(yang)性(xing)對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時(shi)離(li)心10秒。
7.2 qPCR反應(ying)條(tiao)件(jian)
將(jiang)各(ge)反應(ying)管放(fang)入(ru)定量PCR儀器的(de)反應(ying)槽內(nei)。
循(xun)環條(tiao)件(jian):
1循(xun)環 50℃ for 2 min
預(yu)變(bian)性 1循(xun)環 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增(zeng) 40循(xun)環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸(shen)時(shi)收集(ji)熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬(cui)滅基團：NONE，請(qing)勿選(xuan)擇(ze)ROX參比熒光。