LN229+LUC人膠(jiao)質(zhi)瘤細胞(bao)熒(ying)光素酶(mei)標(biao)記(ji)

公司(si)產品僅(jin)供科研研究(jiu)使(shi)用、不得(de)用於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷(duan)！

1、細胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生(sheng)長至覆蓋(gai)培養瓶的 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的培(pei)養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至培養瓶中(zhong)，倒(dao)置顯微(wei)鏡下(xia)觀察，待細胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培養

液(ye)終(zhong)止消化，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將(jiang)懸液(ye)轉移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱(dian)細胞(bao)用 1-2ml 培養基重懸(xuan)，然後按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最(zui)後放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培養；

2、細胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細胞(bao)生(sheng)長至覆蓋(gai)培養瓶的 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的培(pei)養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至培養瓶中(zhong)，倒(dao)置顯微(wei)鏡下(xia)觀察，待細胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru)培養液(ye)終(zhong)

止消化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將(jiang)懸液(ye)轉移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量的凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞(bao)，並放置於(yu)凍(dong)存(cun)管中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞(bao)凍(dong)存(cun)管放(fang)置於(yu)-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後轉入(ru)液(ye)氮中(zhong)進行長期保(bao)存(cun)。使用程序

降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直接(jie)放入(ru)-80℃。

二、細胞(bao)培(pei)養操作

1) 復蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞(bao)培(pei)養凍(dong)存(cun)處理僅(jin)供參考(kao)，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟以隨(sui)貨(huo)產品說(shuo)明(ming)書為主(zhu)。將(jiang)含有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的凍(dong)存(cun)管在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培養基混(hun)合(he)均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基後吹勻(yun)。然後將(jiang)所有(you)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含適(shi)量培(pei)養基的培(pei)養瓶中(zhong)培養過夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養基，培(pei)養過夜(ye)）。第(di)二天(tian)換液(ye)並檢查(zha)細胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果細胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進行傳代(dai)培(pei)養。

a、棄(qi)去(qu)培養上(shang)清(qing)，用不含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的PBS潤(run)洗細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶中(zhong)，使消化液(ye)浸潤所有(you)細胞(bao)，將(jiang)培養瓶置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱(xiang)中(zhong)消化1-2 min（視(shi)細胞(bao)情(qing)況而(er)定(ding)），然後在顯微(wei)鏡下(xia)觀察細胞(bao)消化情(qing)況，若(ruo)細胞(bao)大部分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫落(luo)，迅(xun)速(su)拿回操(cao)作臺，輕(qing)敲(qiao)幾下培養瓶後加(jia)2-3ml培養基終(zhong)止消化。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液(ye)後吹勻(yun)。

c、將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例(li)分(fen)到新(xin)的含(han)8 mL培(pei)養基的新(xin)皿中(zhong)或者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置於(yu)培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長狀態(tai)良(liang)好(hao)時，可進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為例(li)；a、收集(ji)細胞(bao)及(ji)細胞(bao)培(pei)養液(ye)，裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗壹遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進行細胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細胞(bao)數(shu)量加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使細胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註意凍(dong)存(cun)管做(zuo)好標(biao)識(shi)。將(jiang)凍(dong)存(cun)管放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液(ye)氮灌儲(chu)存。記(ji)錄凍(dong)存(cun)管位(wei)置以(yi)便(bian)下(xia)次(ci)拿取(qu)。

公司正在出售的產(chan)品：

IFNL1 Protein Human 重組(zu)人 IL-29 / Ierleukin-29 蛋白 (His 標(biao)簽(qian)) 大鼠(shu)血(xue)管內皮生(sheng)長因(yin)子(zi)受體1(VEGFR1)ELISA試(shi)劑盒(he) Mouse D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH  小鼠(shu)D-乳(ru)酸(suan)脫(tuo)氫(qing)酶(mei) 96T

non-muscle Myosin IIA： 非(fei)平(ping)滑(hua)肌肌球(qiu)蛋白2A抗(kang)體 PTPRA Others Human 人 PTPRA / PTPalpha (aa 174-793) 桿狀病毒-昆蟲細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao))

大鼠(shu)腦微(wei)血(xue)管內皮細胞(bao)培(pei)養基 100mL 大鼠(shu)血(xue)管內皮生(sheng)長因(yin)子(zi)D(VEGFD)ELISA試劑盒(he) AmAC-1(Human Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1)  人巨噬細胞(bao)替代(dai)激(ji)活(huo)相(xiang)關(guan)化學(xue)因(yin)子(zi)1 96T

MMS19： DNA修復甲基(ji)磺酸敏(min)感(gan)性(xing)基(ji)因(yin)19抗(kang)體 COLO-320細胞(bao)，結(jie)腸腺癌細胞(bao) 直腸腺癌,HR-8348細胞(bao) 人巨細胞(bao)白(bai)血(xue)病(bing)細胞(bao)株(zhu);Mo7e

KLK11 Others Mouse 小鼠(shu) KLK11 / Kallikrein-11 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 大鼠(shu)血(xue)管內皮生(sheng)長因(yin)子(zi)C(VEGFC)ELISA試劑盒(he) IL-21  大鼠(shu)白(bai)介(jie)素21 96T

非(fei)洲綠(lv)猴(hou)腎(shen)細胞(bao);BS-C-1 人鉤端螺旋(xuan)體IgM(Lebtospira)ELISA 試劑盒(he) Cyclin D2 周期2抗(kang)原(yuan) 0.5mg

H3N1 hemagglutinin： 流(liu)感(gan)病(bing)毒(du)H3N1血(xue)凝(ning)素抗(kang)體(ti) 人胚(pei)腎細胞(bao)(SV40T基(ji)因(yin)修(xiu)飾);293T/17

L6(大鼠(shu)成(cheng)肌(ji)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 小(xiao)鼠(shu) AXR2 / CMG2 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 人鉤端螺旋(xuan)體IgG(Lebtospira)ELISA 試劑盒(he) Cyclin D3(C-term) 周期3抗(kang)原(yuan) 0.5mg

Hoxb3： 同源盒蛋白HoxB3抗(kang)體 人外(wai)根殼(ke)細胞(bao)裂(lie)解(jie)物(wu)HHORSCL

ANGPT4 Protein Human 重組(zu)人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (Fc 標(biao)簽(qian)) 人庚型(xing)肝(gan)炎病(bing)毒(du)IgM(HGV-IgM)ELISA 試劑盒(he) CYP3A4(Cytochrome p450 3A4) 細胞(bao)色(se)素P450 3A4抗(kang)原(yuan) 0.5mg

LN229+LUC人膠(jiao)質(zhi)瘤細胞(bao)熒(ying)光素酶(mei)標(biao)記(ji)phospho-PKMYT1(Thr495)： 0酸化髓(sui)鞘(qiao)轉錄因(yin)子(zi)1激酶(mei)抗(kang)體 PT67細胞(bao)，小(xiao)鼠(shu)逆(ni)轉錄病(bing)毒(du)包(bao)裝細胞(bao) 人癌細胞(bao),MCF-7/ER36細胞(bao) 小(xiao)鼠(shu)皮(pi)質(zhi)神經元(yuan)MN-c

HA Others Influenza B 乙型(xing)流(liu)感(gan) (B/Florida/4/2006) 血(xue)凝(ning)素HA2 (Hemagglutinin) 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 大鼠(shu)肝(gan)X受體α(LXRα)ELISA試(shi)劑盒(he) EBv IgM(Human epstein-barr virus IgM)  人EB病毒IgM 96T

Phospho-PDGFRA(Tyr988)： 0酸化血(xue)小(xiao)板(ban)源性生長因(yin)子(zi)受體α 0.1ml

Rhesus antibody Rh KCNE1L 離(li)子(zi)通(tong)道(dao)蛋白家(jia)族成(cheng)員1樣蛋白抗(kang)體 CM-H125人腦成(cheng)纖(xian)維細胞(bao)培(pei)養基100mL

A549人非(fei)小(xiao)細胞(bao)肺(fei)癌(ai)細胞(bao) A549 cells in human non small cell lung cancer F-12K+10% FBS 大鼠(shu)甘(gan)油(you)三(san)酯(TG)ELISA試劑盒(he) Resistin  大鼠(shu)抵(di)抗素 96T

三、培養註意(yi)事(shi)項 

1. 收到細胞(bao)後首先(xian)觀察細胞(bao)瓶(ping)是否完(wan)好，培養液(ye)是否有(you)漏液(ye)、渾濁(zhuo)等現象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述現象(xiang) 發(fa)生(sheng)請及(ji)時和我們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了(le)解(jie)細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞(bao)形態(tai)、所用培養基、血(xue)清(qing)比例(li)、所需 細胞(bao)因(yin)子(zi)等，確保細胞(bao)培(pei)養條(tiao)件(jian)壹致，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養條(tiao)件(jian)不壹致而(er)導(dao)致(zhi)細胞(bao)出現問(wen)題(ti)，責任由(you) 客(ke)戶自(zi)行承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯微(wei)鏡下(xia)觀察細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸問題(ti)，部分(fen)細胞(bao)由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變(bian)化及劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片，是正常現象(xiang)。觀察好細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後，75%酒(jiu)精(jing)消毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞(bao)可(ke)以(yi)消化，懸浮(fu)細胞(bao)直接(jie)混(hun)勻(yun)收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的培(pei)養基重懸(xuan) 細胞(bao)，並接(jie)種到新(xin)的培(pei)養瓶或(huo)培(pei)養皿中(zhong)，置於(yu)培(pei)養箱(xiang)中(zhong)進行培養。

5. 請客(ke)戶用相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的培(pei)養基用於(yu)細胞(bao)培(pei)養。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶收到細胞(bao)後前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾張細胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和我司技(ji)術(shu)部溝(gou)通(tong) 交流(liu)。由(you)於(yu)運(yun)輸的原(yuan)因(yin)，個別敏(min)感(gan)細胞(bao)會(hui)出現不(bu)穩(wen)定(ding)的情(qing)況，請(qing)及時和我們聯(lian)系，告(gao)知細胞(bao) 的具(ju)體(ti)情(qing)況，以(yi)便(bian)我們的技(ji)術(shu)人員跟蹤(zong)回(hui)訪直至問題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供科研使用。

8. 備註(zhu)：運輸用的培(pei)養基 (灌(guan)液(ye)培養基) 不(bu)能(neng)再用來培(pei)養細胞(bao)，請(qing)換用按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書細胞(bao)培(pei) 養條(tiao)件(jian)新配(pei)制(zhi)的培(pei)養基來(lai)培(pei)養細胞(bao)。     收到細胞(bao)後第壹次傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。