RBL-2H3大(da)鼠嗜(shi)堿(jian)性(xing)白血(xue)病(bing)細(xi)胞(bao)

公(gong)司(si)產品僅(jin)供(gong)科(ke)研研究使(shi)用(yong)、不得用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳代：

1）細(xi)胞(bao)生長至覆(fu)蓋(gai)培養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中(zhong)，倒置顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入 5ml 培養

液(ye)終(zhong)止消化(hua)，再輕輕吹打細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上清(qing)，沈澱(dian)細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養基(ji)重(zhong)懸，然後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行分瓶傳代，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養箱(xiang)中(zhong)培養；

2、細(xi)胞(bao)凍存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生長至覆(fu)蓋(gai)培養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中(zhong)，倒置顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入培養液(ye)終(zhong)

止消化(hua)，輕輕吹打細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並(bing)放置於(yu)凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍存(cun)管(guan)放置於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其移入(ru)-80℃過夜，24h 後(hou)轉入液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行長期(qi)保(bao)存(cun)。使(shi)用(yong)程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫盒可直(zhi)接(jie)放入-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培養操(cao)作

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以下細(xi)胞(bao)培養凍(dong)存(cun)處理(li)僅(jin)供(gong)參考，具體(ti)操(cao)作步驟以隨(sui)貨產品(pin)說明(ming)書(shu)為主(zhu)。將(jiang)含有1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培養基(ji)混(hun)合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件下離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後(hou)吹勻。然後(hou)將(jiang)所(suo)有細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入含適量(liang)培養基(ji)的(de)培養瓶(ping)中(zhong)培養過夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入約8 mL培養基(ji)，培養過夜）。第二(er)天(tian)換液(ye)並(bing)檢(jian)查細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即可進(jin)行傳代培養。

a、棄(qi)去(qu)培養上清(qing)，用(yong)不含鈣、鎂離子(zi)的PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消化(hua)液(ye)浸潤所(suo)有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視細(xi)胞(bao)情況(kuang)而定），然後(hou)在顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)消化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿(na)回操(cao)作臺，輕敲幾(ji)下培養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養基(ji)終(zhong)止消化(hua)。輕輕打勻後裝(zhuang)入無(wu)菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹勻。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培養基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待細(xi)胞(bao)生長狀態(tai)良好時(shi)，可進(jin)行細(xi)胞(bao)凍存(cun)。下面(mian) T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件下離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹遍，棄(qi)盡PBS，進(jin)行細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入無(wu)血清(qing)細(xi)胞(bao)凍存(cun)液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每支(zhi)凍(dong)存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註(zhu)意(yi)凍存(cun)管(guan)做(zuo)好標(biao)識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管(guan)放入-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記(ji)錄凍(dong)存(cun)管(guan)位置(zhi)以便下次(ci)拿(na)取(qu)。

公司(si)正在出售的產(chan)品(pin)：

NUDCD3： NUDCD3蛋(dan)白抗(kang)體 COLO 205細(xi)胞(bao)，結腸(chang)癌(ai)細(xi)胞(bao) 正常人肝(gan)細(xi)胞(bao),L-02細(xi)胞(bao) CL-0056CCD-1095Sk(人浸潤性(xing)導管(guan)癌(ai)旁(pang)皮(pi)膚細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2

NGFR Others Human 人 NGFR / P75 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao)) 大(da)鼠檸檬(meng)酸(suan)合酶(mei)(CS)ELISA試劑(ji)盒(he) ADP(Mouse adiponectin)  小(xiao)鼠脂(zhi)聯素 96T

NKR2B4： CD244自(zi)然殺(sha)傷(shang)細(xi)胞(bao)受(shou)體(ti)2B4抗(kang)體 食(shi)管(guan)上皮(pi)細(xi)胞(bao)Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105次(ci)方(1ml)

SW579 [SW 579; SW-579]人甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)鱗癌(ai)細(xi)胞(bao) SW579 [SW 579; SW-579] in human thyroid carcinoma cells L-15培養基(ji)+10%FBS 大(da)鼠尿(niao)液(ye)三(san)葉因(yin)子(zi)3(TFF-3)ELISA試劑(ji)盒(he) HSP gp96  大(da)鼠熱休(xiu)克蛋(dan)白糖(tang)蛋(dan)白96 96T

phospho-NFATc2(Ser326)： 0酸(suan)化(hua)核(he)因(yin)子(zi)活化(hua)T細(xi)胞(bao)胞(bao)漿蛋(dan)白2抗(kang)體 CLEC4M Others Human 人 CD299 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

JMY： 連接(jie)介導調節(jie)蛋(dan)白抗(kang)體 5E Others Mouse 小(xiao)鼠 5E / CD73 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

人毛(mao)細(xi)胞(bao)cDNAHHDPC cDNA 牛熱休(xiu)克蛋(dan)白70(HSP-70)ELISA試(shi)劑盒(he) TIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator ) P53誘導糖(tang)酵(jiao)解和雕亡(wang)調節(jie)因(yin)子(zi)蛋(dan)白(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

JNK3： 基(ji)末端(duan)激酶(mei)3抗(kang)體 人結(jie)直(zhi)腸(chang)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao);COLO 320DM [COLO320DM]

A875(人黑(hei)色(se)素瘤細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 小(xiao)鼠腎(shen)集合管(guan)細(xi)胞(bao)(SV40轉化(hua));M-1 牛熱休(xiu)克蛋(dan)白27(HSP-27)ELISA試(shi)劑盒(he) TIMP-4(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-4) 金屬蛋(dan)白酶(mei)組(zu)織抑(yi)制因(yin)子(zi)-4(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

Phospho-JunB (Thr102 + Thr104)： 0酸(suan)化(hua)活化(hua)蛋(dan)白激酶(mei)B抗(kang)體 MCF-7(MCF7)(ATCC來(lai)源(yuan)), 人癌(ai)細(xi)胞(bao)

RBL-2H3大(da)鼠嗜(shi)堿(jian)性(xing)白血(xue)病(bing)細(xi)胞(bao)SHOC2： 富含亮(liang)酸(suan)重(zhong)復蛋(dan)白SHOC2抗(kang)體 IFNB1 Others Cynomolgus 食(shi)蟹猴(hou) IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

HEH 人胚胎心(xin)臟組(zu)織來(lai)源(yuan)細(xi)胞(bao) 大(da)鼠toll樣(yang)受(shou)體(ti)1(TLR1)ELISA試劑盒 OTF2B(Human octamer transcription factor 2B)  人八(ba)聚(ju)體轉錄因(yin)子(zi) 96T

SEPT14： 細(xi)胞(bao)分化(hua)蛋(dan)白SEPT14抗(kang)體 Hut-78細(xi)胞(bao)，皮(pi)膚T細(xi)胞(bao)淋(lin)巴(ba)瘤(liu) 人血(xue)管(guan)平(ping)滑肌(ji),T/G細(xi)胞(bao) 人低侵襲性(xing)脈絡(luo)膜黑(hei)色(se)素素瘤細(xi)胞(bao);OCM-1A

FAS Others Rat 大(da)鼠 FAS / TNFRSF6 / CD95 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao)) 大(da)鼠TNF-B酶(mei)聯免疫(yi)分析(xi)ELISA試劑盒 OTF2A(Human octamer transcription factor 2A)  人八(ba)聚(ju)體轉錄因(yin)子(zi) 96T

SLC12A6： 氯(lv)離子(zi)轉運(yun)蛋(dan)白3抗(kang)體 水(shui)牛皮(pi)膚成(cheng)纖維(wei)樣(yang)細(xi)胞(bao);WB-S5

三(san)、培養註(zhu)意(yi)事項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後首先觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否(fou)完(wan)好，培養液(ye)是(shi)否(fou)有漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有(you)上述(shu)現象(xiang) 發(fa)生請(qing)及(ji)時和我(wo)們(men)聯系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細(xi)胞(bao)說明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相關(guan)信息(xi)，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所(suo)用(yong)培養基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保細(xi)胞(bao)培養條件壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培養條件不壹致(zhi)而導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)出現(xian)問(wen)題，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面，顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題，部(bu)分細(xi)胞(bao)由於(yu)溫度(du) 變化(hua)及(ji)劇(ju)烈(lie)碰亡(wang)破碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是正(zheng)常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好細(xi)胞(bao)狀態(tai)後，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶置於(yu) 37℃培養箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞(bao)可以(yi)消(xiao)化(hua)，懸浮(fu)細(xi)胞(bao)直接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培養基(ji)重(zhong)懸 細(xi)胞(bao)，並(bing)接種到(dao)新(xin)的(de)培養瓶(ping)或(huo)培養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培養。

5. 請(qing)客(ke)戶用(yong)相(xiang)同(tong)條件的培養基(ji)用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培養。

6. 建(jian)議客戶收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後前 3 天各拍(pai)幾(ji)張細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便於(yu)和我(wo)司(si)技術部(bu)溝(gou)通(tong) 交流。由於(yu)運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因(yin)，個別敏感細(xi)胞(bao)會(hui)出現(xian)不穩(wen)定的情況(kuang)，請(qing)及(ji)時和我(wo)們(men)聯系(xi)，告(gao)知細(xi)胞(bao) 的具體(ti)情(qing)況(kuang)，以便我(wo)們(men)的技術人員(yuan)跟(gen)蹤回(hui)訪(fang)直至(zhi)問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培養基(ji) (灌(guan)液(ye)培養基(ji)) 不能再用(yong)來(lai)培養細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說明(ming)書(shu)細(xi)胞(bao)培 養條件新(xin)配(pei)制的(de)培養基(ji)來(lai)培養細(xi)胞(bao)。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後第壹次傳代建(jian)議 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代就(jiu)是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿(min)。