Raji人(ren)淋巴(ba)瘤細(xi)胞

公司產品僅(jin)供(gong)科研(yan)研(yan)究(jiu)使用(yong)、不(bu)得用(yong)於(yu)臨床診(zhen)斷！

1、細(xi)胞傳代(dai)：

1）細(xi)胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入 5ml 培養(yang)

液(ye)終止消化，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞使之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培養(yang)基重(zhong)懸，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養(yang)箱中(zhong)培養(yang)；

2、細(xi)胞凍存(cun)：

1）細(xi)胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入培養(yang)液(ye)終

止消化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞使之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞，並放置(zhi)於(yu)凍存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞凍存(cun)管(guan)放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其移入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮中(zhong)進(jin)行長(chang)期(qi)保(bao)存(cun)。使用(yong)程(cheng)序

降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直(zhi)接(jie)放入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞培養(yang)操作

1) 復蘇(su)細(xi)胞：以下細(xi)胞培養(yang)凍存(cun)處(chu)理(li)僅(jin)供(gong)參考，具體(ti)操作步(bu)驟以隨貨(huo)產品說(shuo)明書(shu)為(wei)主(zhu)。將(jiang)含有1 mL細(xi)胞懸液(ye)的凍存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培養(yang)基混合均(jun)勻。在1000 rpm條件下離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基後(hou)吹(chui)勻。然後(hou)將(jiang)所(suo)有細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入含適(shi)量(liang)培養(yang)基的培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培養(yang)過夜(ye)（或(huo)將細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培養(yang)基，培養(yang)過夜(ye)）。第(di)二天換(huan)液(ye)並檢查細(xi)胞密度(du)。

2) 細(xi)胞傳代(dai)：如果(guo)細(xi)胞密度(du)達 80%-90%，即(ji)可(ke)進行傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上清(qing)，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂(mei)離子的PBS潤洗(xi)細(xi)胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消化液(ye)浸潤所(suo)有細(xi)胞，將培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細(xi)胞情況而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞消化情(qing)況，若細(xi)胞大部分(fen)變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落，迅速(su)拿回(hui)操作臺，輕(qing)敲(qiao)幾下培養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基終止消化。輕(qing)輕(qing)打勻後(hou)裝入無菌(jun)離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻。

c、將細(xi)胞懸液(ye)按1:2比例(li)分(fen)到新的(de)含8 mL培養(yang)基的新皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱中(zhong)培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍存(cun)：待細(xi)胞生長(chang)狀(zhuang)態良好時(shi)，可(ke)進行細(xi)胞凍存(cun)。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集細(xi)胞及細(xi)胞培養(yang)液(ye)，裝入無菌(jun)離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件下離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍，棄(qi)盡PBS，進(jin)行細(xi)胞計數。

b、根(gen)據細(xi)胞數量(liang)加(jia)入無(wu)血(xue)清(qing)細(xi)胞凍存(cun)液(ye)，使細(xi)胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻，每支凍(dong)存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細(xi)胞懸液(ye)，註意凍(dong)存(cun)管(guan)做好標(biao)識(shi)。將凍(dong)存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位置(zhi)以便(bian)下次拿(na)取(qu)。

公司正在出售(shou)的(de)產品：

QGY-7703(人(ren)肝(gan)癌(ai)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 7721(7721肝(gan)癌(ai)細(xi)胞) 大鼠(shu)脫氫酶(XDH)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) RANTES/CCL5(Human regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted)  人(ren)正常(chang)T細(xi)胞表達和(he)分(fen)泌(mi)因子 96T

Phospho-MARCKS (Ser162)： 0酸化蛋(dan)白(bai)激酶C底物(wu)Marcks抗體(ti) 人(ren)腎(shen)上腺皮(pi)質(zhi)腺癌(ai)細(xi)胞;NCI-H295R

IL18BP Protein Human 重(zhong)組(zu)人(ren) IL18BPa 蛋(dan)白(bai) (His & Fc 標簽(qian)) 大鼠(shu)脫氫酶(ALDH)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) P-Selectin(Human P-Selectin/CD62P/GMP140)  人(ren)P選擇(ze)素 96T

Met (c Met)： 肝(gan)細(xi)胞生長(chang)因子受(shou)體(ti)抗體(ti) PGK1 Others Mouse 小鼠(shu) PGK1 / PGKA 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆蟲細(xi)胞裂解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao))

小鼠(shu)食管(guan)上皮細(xi)胞培養(yang)基 100mL 大鼠(shu)脫氫表(biao)雄(xiong)酮酯(zhi)(DHEA-S)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Lep IgG ISA Kit 大鼠(shu)鉤(gou)端螺旋(xuan)體(ti)IgG 96T

Integrin alpha L： 整(zheng)合素αL抗體(ti) 人(ren)晶狀(zhuang)體(ti)上皮細(xi)胞HLEpiC

CXCL12 Protein Human 重(zhong)組(zu)人(ren) CXCL12 / SDF-1 蛋(dan)白(bai) (isoform a) 人(ren)表皮(pi)生(sheng)長(chang)因子受(shou)體(ti)2(Her2)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) MAGE-1 黑色(se)素瘤相(xiang)關 0.5mg

Interferon alpha： 幹(gan)擾(rao)素α抗體(ti) CHN1 Others Human 人(ren) CHN1 / Chimerin 1 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆蟲細(xi)胞裂解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao))

人(ren)結腸(chang)平滑肌(ji)細(xi)胞培養(yang)基 100mL 人(ren)表皮(pi)生(sheng)長(chang)因子受(shou)體(ti)(EGFR)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) MAPKK1 (MAP kinase kinase 1) 原活化蛋(dan)白(bai)激酶激酶1抗原 0.5mg

Phospho-INPPL1(Ser576)： 0酸化肌(ji)醇聚(ju)0酸鹽(yan)0酸酶樣蛋(dan)白(bai)1抗體(ti) 長尾綠(lv)猴(hou)胚(pei)胎細(xi)胞;4179 病(bing)毒(du)轉(zhuan)染(ran)小鼠(shu)細(xi)胞，PT-67細(xi)胞 SMMC-7721(肝(gan)癌(ai)細(xi)胞)

Raji人(ren)淋巴(ba)瘤細(xi)胞RABGAP1： Rab蛋(dan)白(bai)GTP酶激活蛋(dan)白(bai)1抗體(ti) 非洲(zhou)綠(lv)猴(hou)腎(shen)細(xi)胞;VERO

人(ren)胚肺(fei)二(er)倍體(ti)細(xi)胞;HL 人(ren)小腸粘(zhan)膜(mo)上皮細(xi)胞培養(yang)基 100mL 大鼠(shu)促卵泡素(FSH)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) Apo-E(Human Apolipoprotein E)  人(ren)載(zai)脂蛋(dan)白(bai)E 96T

RELM beta： 結(jie)腸(chang)癌相(xiang)關基因蛋(dan)白(bai)抗體(ti) 角膜(mo)內皮(pi)細(xi)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

小鼠(shu)成纖(xian)維細(xi)胞(EGFP標記(ji)) 大鼠(shu)促甲狀(zhuang)腺素受(shou)體(ti)(TSHR)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) OGP(Human Osteogenic Growth Peptide)  人(ren)成骨生長(chang)肽 96T

phospho-Ron(Tyr1238)： 0酸化原癌基因c-Met相(xiang)關酪(lao)酸激酶抗體(ti) CLEC5A Others Cynomolgus 食蟹(xie)猴(hou) CLEC5A / MDL1 / MDL-1 人(ren)細(xi)胞裂解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao))

三(san)、培養(yang)註意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到細(xi)胞後(hou)首(shou)先觀(guan)察細(xi)胞瓶(ping)是否完(wan)好，培養(yang)液(ye)是否有漏液(ye)、渾濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若有上述現象(xiang) 發生(sheng)請及(ji)時(shi)和我們聯系(xi)。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞說明(ming)書，了解細(xi)胞相(xiang)關信(xin)息，如細(xi)胞形態(tai)、所(suo)用(yong)培養(yang)基、血(xue)清(qing)比例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞因子等，確保細(xi)胞培養(yang)條件壹(yi)致，若由(you)於(yu)培養(yang)條件不(bu)壹(yi)致而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞出現(xian)問題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客戶自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細(xi)胞瓶(ping)表(biao)面，顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞狀(zhuang)態。因運輸問題(ti)，部分(fen)細(xi)胞由於(yu)溫(wen)度(du) 變(bian)化及(ji)劇烈(lie)碰(peng)亡破碎形成碎片，是正常(chang)現象。觀(guan)察好細(xi)胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞可(ke)以消化，懸浮細(xi)胞直(zhi)接(jie)混勻收(shou)集細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用(yong)新鮮(xian)的培養(yang)基重(zhong)懸 細(xi)胞，並接(jie)種到新的(de)培養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱中(zhong)進(jin)行培養(yang)。

5. 請客戶用(yong)相(xiang)同(tong)條件的培養(yang)基用(yong)於(yu)細(xi)胞培養(yang)。

6. 建(jian)議客戶收(shou)到細(xi)胞後(hou)前(qian) 3 天各拍幾張細(xi)胞照(zhao)片，記錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和我(wo)司技(ji)術(shu)部溝(gou)通 交流。由(you)於(yu)運輸的原因，個別(bie)敏感(gan)細(xi)胞會出(chu)現不(bu)穩定(ding)的(de)情況，請及(ji)時(shi)和我們聯系(xi)，告知(zhi)細(xi)胞 的具體(ti)情況，以便(bian)我們的技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤回(hui)訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞僅(jin)供(gong)科研(yan)使用(yong)。

8. 備註：運輸用(yong)的培養(yang)基 (灌(guan)液(ye)培養(yang)基) 不(bu)能再(zai)用(yong)來(lai)培養(yang)細(xi)胞，請換(huan)用(yong)按照(zhao)說明書(shu)細(xi)胞培 養(yang)條件新配(pei)制(zhi)的培養(yang)基來(lai)培養(yang)細(xi)胞。     收(shou)到細(xi)胞後(hou)第(di)壹(yi)次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿。